双歧杆菌DNA对J774A.1巨噬细胞的活化作用

双歧杆菌的细胞壁成分能有效的激活免疫细胞,促使这些效应细胞释放免疫活性物质,并对多种肿瘤的发生与发展具有一定的抑制作用。本研究利用我室提取的双歧杆菌DNA观察了其对小鼠J774A.1巨噬细胞的活化作用。收集厌氧培养的双歧杆菌(菌种由山东省防疫站提供),加入溶菌酶(1mgm1)与10%SDS(终浓度为1%)裂解菌体,饱和酚抽提去除菌体蛋白,透析,用紫外分光光度计测定所提取的双歧杆菌DNAA260/A280为1.823,经薄板层析证实所制备的双歧杆菌DNA中无脂多糖存在,经HpaⅡ酶酶切证实所制备的双歧杆菌DNA具有一定的非甲基化CpG基序,冷冻干燥后备用…     

罗勒多糖对人树突细胞抗原摄取功能及共刺激分子表达的影响

目的探讨罗勒多糖对人外周血单核细胞来源的树突细胞（dendritic cells，DC）抗原摄取功能以及共刺激分子表达的影响。方法从正常人外周血单核细胞诱导未成熟和成熟的DC，实验组加入罗勒多糖（150μg/ml），对照组加入PBS，分别培养24h，收获未成熟的DC，与OVA—FTTC（100μg/ml）共同孵育，流式细胞仪检测DC的抗原摄取能力。同时收获成熟DC，流式细胞仪检测DC表面共刺激分子CD80、CD86的表达情况。结果与对照组比较，罗勒多糖作用组DC的抗原摄取能力显著提高，同时成熟DC表面共刺激分子CD80、CD86的表达也明显升高。结论罗勒多糖可显著增强DC的抗原摄取能力，并且能够提高细胞表面共刺激分子的表达，这可能是罗勒多糖发挥抗肿瘤免疫的机制之一。     

尖锐湿疣患者的细胞免疫功能研究

目的探讨尖锐湿疣患者细胞免疫功能状态,并为其免疫治疗提供实验依据。方法采用流式细胞仪检测外周血T细胞亚群和NK细胞百分比、MTT法检测淋巴细胞的增殖能力、ELISA法检测血清中细胞因子。结果CA患者外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和CD56+细胞(NK细胞)的比例均明显低于对照组(均P<0.01);CA组血清中IL-12和IFN-γ产生水平均明显低于对照组(均P<0.01);而IL-10产生水平高于对照组(P<0.01);CA患者的PBMC对PHA四种诱导浓度的增殖能力均明显低于对照组(均P<0.01);CA患者的RBC-C3bRR的百分率明显低于对照组(P<0.01),而RBC-ICR百分率明显高于对照组(P<0.01)。结论CA患者存在细胞免疫功能缺陷,临床治疗过程中须提高CA患者的细胞免疫功能。     

上皮性卵巢肿瘤组织中端粒酶活性的表达及与临床病理因素相关性研究

目的:探讨端粒酶在卵巢癌发 生和发展中的作用,及端粒酶活性与临 床病理因素的相关性。方法:应用端粒 重复序列扩增技术(TRAP)检测45例卵 巢上皮性肿瘤及9例正常卵巢组织端粒 酶活性。结果:端粒酶阳性检出率在恶 性和交界性卵巢肿瘤组中分别为 83.33%(25/30)和5/7,差异无统计学意 义,P=0.5963;良性上皮性卵巢肿瘤及 正常卵巢上皮组织中未检测到端粒酶活 性,与前两组之间均差异有统计学意义 P<0.01。端粒酶的表达与临床病理因 素无明显相关性。结论:端粒酶在卵巢 癌发生和发展过程中可能具有重要作 用,并有望作为卵巢上皮性癌基因治疗 的靶点。     

Wistar大鼠树突状细胞的体外培养、扩增与鉴定

目的：探讨体外分离、培养和扩增大鼠骨髓来源树突状细胞（DC）的有效方法。方法：采用改良的Chen－WoanDC培养方法，梯度离心提取骨髓单核细胞中的非粘附细胞，加入GM CSF 5?ng/ml、IL 4 5?ng/ml进行诱导扩增，对培养的目的细胞进行形态学、OX62－FITC免疫荧光检查以及功能学鉴定。结果：DC前体细胞培养10?d呈典型树突状结构，表面标志物染色阳性，流式细胞学检查OX62单抗阳性率86％，不同培养时段的DC诱发混合淋巴细胞反应以培养10?d的DC最强，培养10?d的DC诱发混合淋巴细胞反应对同源淋巴细胞有更好的活性。结论：改良的Chen－Woan法为体外诱导扩增大鼠骨髓来源DC的有效方法。     

CYP1A1基因多态性与子宫内膜腺癌发生的关系研究

目的研究细胞色素P4501A1(CYP1A1)基因MspI位点和Ile-Val位点多态性与子宫内膜腺癌发生的关系。方法以病例-对照研究,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法和等位基因特异性PCR(AS-PCR)技术检测84例子宫内膜腺癌患者和66例对照者CYP1A1基因MspI位点和Ile-Val位点的多态性。结果Ile-Val三种多态基因型在对照组和子宫内膜腺癌组中的分布在显著性差异(P<0.05),其中Ile/Val和Val/Val基因型在子宫内膜腺癌组中的分布频率明显高于对照组。与Ile/Ile基因型相比,Ile/Val基因型个体发生子宫内膜腺癌的相对危险度(OR)是2.682,两者差异有统计学意义(P<0.05);而MspI位点的多态性在对照组和子宫内膜腺癌组中的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论CYP1A1基因第7外显子的Ile/Val基因型与子宫内膜腺癌的发生有关,可以作为子宫内膜腺癌易感人群筛查的重要指标,MspI位点多态性与子宫内膜腺癌的发生无相关性。     

罗勒胶囊对小鼠脾细胞产生IL-2和IFNγ能力的影响

目的探讨罗勒胶囊对小鼠免疫功能的影响.方法用罗勒胶囊含药血清孵育小鼠脾细胞而诱生IL-2和IFNγ,利用IL-2依赖株CTLL-2和IFNγ敏感细胞L929细胞,采用MTT法检测含药血清作用后小鼠脾细胞产生IL-2和IFNγ的能力.结果罗勒胶囊血清大、中剂量组及香菇多糖(LNT)组能显著提高小鼠脾淋巴细胞IL-2产生能力,与生理盐水对照组比较,P＜0.01,但罗勒胶囊大、小剂量组作用不如香菇多糖(P＜0.05,P＜0.01);罗勒胶囊血清大、中剂量组及香菇多糖(LNT)组能显著提高小鼠脾淋巴细胞IFNγ产生能力,与生理盐水对照组比较,P＜0.01.结论罗勒胶囊能促进IL-2和IFNγ的产生,增强机体的免疫功能.     

抑癌基因FHIT真核表达质粒的构建

目的 构建抑癌基因FHIT真核表达质粒pHCMVsp1A-FHIT。方法 用限制性内切酶EcoRⅠ酶切抑癌基因FHIT的克隆载体pGEM-FHIT获得FHIT基因片段,长度为0.9kb,将其插入真核表达载体pHCMVsp1A CMV启动子的下游,用HindⅢ酶切鉴定FHIT基因插入方向。结果 PCR扩增及EcoRⅠ、HindⅢ酶切鉴定证实FHIT基因以正确方向插入表达质粒pHCMV1A中。结论 成功构建抑癌基因FHIT真核表达质粒pHCMVsp1A-FHIT,为研究FHIT的抑癌作用提供有效的分子工具。     

CD47在维生素E琥珀酸酯诱导人宫颈癌细胞凋亡过程中的作用

目的 探讨CD47在维生素E琥珀酸酯诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡过程中的作用.方法 实验采用的细胞系是人宫颈癌Hela细胞,分为空白对照、VES处理(10μg/ml VES作用24h)、CD47抑制剂处理细胞和VES处理、CD47过表达转染细胞和VES处理、空载体转染细胞和VES处理共5组.流式细胞术检测各处理组细胞的...     

基因hMSH2、hMLH1与p53突变型在散发性大肠癌患者的表达

目的:探讨错配修复基因hMSH2、hMLH1与p53突变型在散发性大肠癌发生中的作用。方法:用聚合酶链反应和单链DNA多态性分析(PCR-SSCP)对45例散发性大肠癌患者肿瘤组织及正常组织基因hMSH2、hMLH1、p53进行检测。结果:45例散发性大肠癌患者中,发生hMSH2、hMLH1、p53基因突变分别为2、6、22例,分别占4.44%、13.33%和48.89%。hMLH1、hMSH2基因在突变型p53患者中的突变率为27.27%明显高于在p53未发生突变的患者中的突变率8.69%(P<0.05)。结论:一定比例的散发性大肠癌患者中存在MMR基因缺陷,其中hMLH1所起的作用大于hMSH2,散发性大肠癌中MMR基因突变与p53突变密切相关。