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目的 建立真核表达重组体pcDNA-BLC的稳定转染细胞株,为研究趋化因子BLC的抗肿瘤免疫作用机制奠定基础。方法 以小鼠脾脏组织总RNA为模板,通过RT-PCR扩增BLC全长cDNA,并将扩增的cDNA片段插入pcDNA3.1( )真核表达质粒,构建重组质粒pcDNA-BLC,重组子经限制性内切酶酶切分析及测序鉴定后,用脂质体转染技术导入Colon26细胞,经G418筛选建立稳定转染细胞株。用免疫印迹法(Western Blot)鉴定转染细胞表达的蛋白质,证实BLC存在。用趋化实验证实转染细胞株表达的BLC有生物学活性。结果 真核表达重组体pcDNA-BLC构建成功,pcDNA-BLC稳定转染细胞株表达有生物学活性的BLC。结论 成功建立了BLC的稳定转染细胞株,为研究BLC的抗肿瘤免疫作用机制继而发展肿瘤疫苗奠定了基础。 相似文献
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关于提高针灸临床疗效的思路与方法 总被引:1,自引:0,他引:1
从辨证方法、腧穴功用、针灸方法以及时间因素等方面阐述如何提高针灸临床疗效,并指出针灸临床当构筑契合针灸临床实际的辨证体系,辨证与辨病相结合,重视腧穴的特异性,把握针灸的时间因素,分经分病辨证选术,方可进一步提高临床疗效. 相似文献
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在过去的几十年里,研究者们尝试多种治疗方式以改善卵巢癌患者的预后。然而,无论是标准卡铂和紫杉醇化疗,常规化疗药物的三联疗法,或是肿瘤细胞减灭术联合化疗虽然能有限改善卵巢癌患者的预后,但是也会导致副作用的发生率增加。因此,迫切需要探寻新的治疗策略,以提高疗效,降低疾病复发和提高疾病对药物的响应速度。血管内皮生长因子(VEGF)对血管生成的作用引发了贝伐单抗的发展和肿瘤治疗上的广泛应用。 相似文献
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试论亚健康状态的中医干预 总被引:4,自引:1,他引:3
在人们日益追求生活质量的今天,却有越来越多的人为亚健康状态所困扰,西医学在20世纪70年代就提出了"亚健康"的概念,但没有一个有效的防治方法.中医学的"整体观念""阴平阳秘""治未病"等理论为亚健康状态的防治提供了理论依据,而"调摄精神,平衡心态""生活调理""传统的体育运动干预""气功""针灸疗法"以及"中药的辨证论治"为亚健康状态的防治提供了丰富的手段. 相似文献
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目的 研究何首乌苷(2,3,5,4′-tetrahydroxyl diphenylethylene-2-O-glucoside,THSG)在脑缺血再灌注(cerebralischemia/reperfusion,CI/R)中对大鼠皮层神经元的保护作用。方法 采用线栓法建立大鼠短暂性大脑中动脉栓塞再灌注(transient middle cerebral artery occlusion/reperfusion,tMCAO/R)模型。雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和THSG低、中、高剂量(10、20、40 mg/kg)组,每组10只。采用Longa 5分法评估神经功能缺损情况; TTC染色检测大鼠脑梗死体积百分比;苏木素-伊红(HE)染色检测神经元结构; Nissl染色检测Nissl小体数量; Western blotting检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cystein-asparate protease-3,Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、PTEN诱导的激酶1(PTEN induced putative kinase 1,PINK1)、Parkin、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、p62的蛋白表达;透射电镜观察皮层神经元线粒体自噬情况;免疫荧光检测神经元Parkin、LC3的表达。结果 THSG显著降低了MCAO/R大鼠脑梗死体积百分比和神经功能缺损评分(P<0.05、0.001),降低了MCAO/R大鼠皮层神经元结构损伤和Nissl小体丢失的现象,下调了皮层区cleaved Caspase-3、Bax、p62蛋白表达(P<0.05、0.01、0.001),上调了皮层区Bcl-2、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达(P<0.01),促进皮层神经元中自噬体的数量增加以及PINK1、Parkin蛋白表达(P<0.05、0.001)。结论 THSG能显著改善MCAO/R大鼠皮层神经元损伤,其神经保护机制与促进PINK1/Parkin依赖性线粒体自噬途径有关。 相似文献
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目的 研究开发一种能有效转染CDKN1B基因进入肺和肝癌细胞的非病毒基因传递系统。方法 重组构建了含有CDKN1B序列和EYFP报告基因的质粒。该重组DNA与鱼精蛋白缩合后再与脂质体作用形成脂质-聚阳离子-DNA复合物(lipidspolycation-DNA-complex,LPDs),分别用激光粒度仪法和透射电镜法研究该LPDs的理化性质;用该LPDs转染几种肺癌、肝癌细胞;该LPDs中的EYFP在A549细胞中的表达情况用荧光显微镜和流式细胞仪观察和评价;在LLC肺癌细胞、Chang正常肝细胞和7721肝癌细胞中表达的CDKN1B蛋白用Western印迹方法分析。结果 该LPDs为凹陷的球状;平均粒径是167Bill,多分散指数为0.35;平均zeta电位为+32.6mV;从A549细胞的荧光显微照片可清楚观察到EYFP的表达;A549细胞的流式细胞仪分析结果显示,LPDs的转染效率与阳性对照LipofectAMINE的转染效率相当;Western印迹法分析显示,以LPDs装载的CDKN1B质粒在LLC细胞、常细胞和7721细胞中表达CDKN1B蛋白,而裸CDKN1B质粒没有表达。结论脂质-聚阳离子-CDKN1B质粒复合物的构建是成功的。LPDs能够将CDKN1B质粒传递到肺癌细胞和肝癌细胞,并获得高效率的表达。因此,这种基因传递系统有望开发用作肺癌和肝癌的基因治疗传递系统。 相似文献
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在过去几年癌症治疗已经取得积极进展,肿瘤标志物在诊断和预测肿瘤发展上已成热门研究。骨桥蛋白是一种胞外磷酸化糖蛋白,由激活的巨噬细胞,白细胞,淋巴细胞及活化的T细胞分泌。骨桥蛋白在肿瘤形成过程中刺激细胞黏附,迁移和信号传导和血管形成。已在多种癌症中发现骨桥蛋白的表达,是新近发现的卵巢癌生物学标志物之一。本文就骨桥蛋白的研究进展作一综述,希望对卵巢癌生物标志物的应用有所帮助。 相似文献
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目的:观察中医清泻法对梗阻性黄疸肠源性内毒素血症的疗效。方法:将大鼠分成4组,即模型清泻法组、模型西药组、模型对照组、空白组,模型清泻法组、模型西药组、模型对照组开腹胆总管结扎法造模,空白组仅游离牵拉胆总管即可,不结扎。模型清泻法组、模型西药组灌喂实验试剂。实验结束后,检测各组大鼠血浆中内毒素、TNF-α依据实验数据,分析清泻法对梗阻性黄疸内毒素血症大鼠内毒素、TNF—α等的影响。结果:梗阻性黄疸内毒素血症大鼠经过清泻法自拟汤治疗后,可降低各项实验室指标,各指标均明显低于模型对照组(P均〈0.01),对TNF—α指标的改善优于西药组(P均〈0.05),其他疗效指标与西药组相比疗效相近(P均〉0.05),且总体指标改善情况有高于后者之,表明清泻法自拟汤对梗阻性黄疸内毒素血症治疗有效,疗效有优于西药乳果糖对照组之趋势。结论:中医清泻法治疗梗阻性黄疸内毒素血症安全、有效。 相似文献