分子生物学实验教学初探与体会

21世纪是生物研究快速发展的时代 ,社会对人才质量的要求也不断提高 ,为适应下世纪科学发展的需要 ,医学生必须掌握分子生物学基本知识和基本技能 ,为此 ,本院对 1 999年硕士研究生开设分子生物学实验教学。初步尝试 ,现谈谈教学体会。1　开设分子生物学实验教学的目的及意义　　众所周知 ,硕士研究生的培养将为我国科研和创新工程提供后备人才 ,而培养研究生创新思维和实际科学研究能力将关系到所培养的人才是否能胜任毕业后既富有挑战性又具有时代所需的创新研究工作。 2 1世纪是生物研究快速发展的时代 ,分子生物学的一系列新技术的问世 …     

溴化异丙托品对稳定期COPD患者肺功能及运动耐受性的影响

目的 观察不同剂量的溴化异丙托品（ＩＰＢ）短时及长期应用,对稳定期慢性阻塞性肺疾病（ＣＯＰＤ）患者的肺功能及运动耐受性的影响。方法 ３７例稳定期ＣＯＰＤ患者,随机分３组,分别吸人ＩＰＢ１６０μｇ／次、８０μｇ／次、４０μｇ／次。用药前后行肺功能及自行车功量仪极量运动负荷法运动试验测验。结果 吸入ＩＰＢ１６０μｇ／次、８０μｇ／次组与安慰剂对照组相比,通气及运动指标均明显改善（Ｐ〈０．０１、Ｐ〈０．     

肾脏AQP2表达及穿梭调节的分子机制

水通道蛋白是位于细胞膜或细胞内囊泡能够通透水的蛋白质分子 ,其中水通道蛋白 2 (AQP2 )主要分布于肾脏集合管主细胞的管腔侧膜及近管腔侧的胞浆囊泡内 ,是抗利尿激素敏感型水通道。抗利尿激素可调节肾脏集合管AQP2的表达及穿梭 ,在肾脏水平衡调节中起重要作用     

芳香开窍类中药含药脑脊液对星形胶质细胞水通道-4表达的影响

目的探讨芳香开窍类中药在治疗中枢神经疾病时的作用机制。方法原代培养小鼠大脑星形胶质细胞表达水通道-4mRNA,观察家兔含药脑脊液对原代培养的小鼠大脑星形胶质细胞水通道基因表达的影响。结果培养液中加入家兔脑脊液对水通道-4 mRNA表达没有影响(P>0.05),含石菖蒲的含药脑脊液使原代培养的小鼠大脑星形胶质细胞水通道-4基因表达降低(P<0.05);而含麝香的含药脑脊液对原代培养的小鼠大脑星形胶质细胞水通道-4基因表达无明显影响(P>0.05)。结论芳香开窍药石菖蒲可能能降低星形胶质细胞水通道-4基因的表达。     

中医药院校大学生创新基地建设探讨

随着国家对大学生创新创业训练计划的关注与投入不断增加,中医药院校承担的大学生创新创业训练项目也大幅增加,因此中医药院校如何构建适应中医药现代研究的大学生创新基地成为亟待解决的问题。该文从以国家重点学科科研基地为依托建设大学生创新基地、以中医药科研三级实验室为依托建设中医药院校大学生创新基地、设立大学生创新基地项目和大学生创新基地建设的模式四个方面对中医药大学生创新基地的建设进行了探讨。     

中药消痈溃得康对乙酸胃溃疡模型大鼠TFF-2表达的影响

目的研究消痈溃得康对乙酸法大鼠胃溃疡模型治疗作用的分子机制。方法将大鼠随机分为正常对照组、假手术对照组、胃溃疡模型组、消痈溃得康治疗组及奥美拉唑治疗组。局部注射乙酸法制备胃溃疡模型,术后第2天开始给药,术后第12天取材,取血清,ELISA方法检测血清三叶因子-2(trefoilfactorfamily2,TFF-2)含量。取溃疡局部胃组织,一部分胃组织用Trizol方法提取RNA,RT-PCR法检测胃组织TFF-2mRNA表达,另一部分胃组织匀浆,ELISA方法检测胃组织TFF-2蛋白表达量。结果模型组大鼠胃组织TFF-2mRNA表达水平明显高于正常对照组和假手术对照组(P0.05),模型组大鼠胃组织及血清TFF-2蛋白含量高于正常对照组和假手术对照组,但统计学差异不显著。消痈溃得康治疗组和奥美拉唑治疗组大鼠胃组织TFF-2mRNA和蛋白表达水平及血清TFF-2蛋白含量明显高于胃溃疡模型组(P0.05)。结论消痈溃得康促进胃溃疡愈合作用的分子机制之一可能是与其上调胃组织TFF-2mRNA及蛋白表达有关。     

基于VEGFR2/Src/FAK通路探讨葫芦素D抗血管新生机制

目的探讨葫芦素D对VEGF诱导的血管新生的作用及其机制。方法鸡胚绒毛尿囊膜血管新生实验、大鼠胸主动脉血管内皮迁出与人血管内皮细胞划痕实验检测葫芦素D对VEGF诱导的血管新生和内皮细胞迁移的作用,Western blot技术检测葫芦素D对VEGF诱导的VEGFR2及其下游的Src、FAK磷酸化水平的影响。结果葫芦素D对VEGF诱导的鸡绒毛尿囊膜血管新生具有明显的抑制作用,并能抑制VEGF诱导的大鼠胸主动脉环模型和划痕实验中血管内皮迁移。葫芦素D能够抑制VEGF刺激的VEGFR2、Src、FAK磷酸化。结论葫芦素D具有抑制VEGF诱导的血管新生作用,其机制可能与抑制VEGFR2及其下游的细胞信号通路蛋白活化有关。     

参附汤、芪附汤、姜附汤对阿霉素心脏毒性损伤 大鼠线粒体途径细胞凋亡的影响

目的 :探讨参附汤、芪附汤、姜附汤对阿霉素心脏毒性损伤大鼠线粒体途径细胞凋亡的影响。 方法 :采用酶联免疫测定法(ELISA)测定心肌线粒体抗凋亡基因(Bcl-2),促凋亡基因(Bax),细胞色素c(cytc),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9), 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)含量。 结果 :阿霉素组心肌线粒体Bcl-2含量降低、Bax含量提高,cytc,Caspase-9,Caspase-3含量上升,均有统计学意义(P＜0.05)。参附汤、芪附汤、姜附汤3组心肌线粒体Bcl-2含量提升、Bax含量下降,cytc,Caspase-9, Caspase-3含量下降,均有统计学意义(P＜0.05)。 结论 :Bcl-2,Bax, cytc,Caspase-9,Caspase-3与阿霉素心脏毒性损伤发生、发展过程有关,参附汤、芪附汤、姜附汤通过抑制线粒体途径的细胞凋亡保护心肌抑制阿霉素心脏毒性损伤。     

实验性哮喘豚鼠内脏感觉传入部位SP免疫反应的研究

用免疫组织化学方法结合显微图像分析 ,观察哮喘豚鼠脊神经节、结状神经节、脊髓和孤束核内 P物质的变化。正常豚鼠 C7～ T5 脊神经节及结状神经节内存在 SP阳性反应细胞 ,其细胞质内充满棕色阳性反应颗粒 ,并可见大量的阳性反应纤维。 P物质免疫反应也见于 C7～ T5 脊髓后角板层 、板层 、中间带外侧核 ,呈点状分布 ,偶见阳性纤维。孤束核内可见大量的 P物质阳性反应。哮喘豚鼠结状神经节、C7～ T5 脊神经节和相应节段脊髓后角、孤束核内 P物质阳性反应的密度明显增多而平均灰度值却明显地低于对照组。上述结果表明 ,哮喘豚鼠内脏感觉传入部位 P物质表达增强 ,提示这些部位的 P物质可能参与哮喘的发病过程     

肾上腺皮质激素对水通道蛋白表达的调节

肾上腺皮质激素参与水盐代谢的调节,盐皮质激素和糖皮质激素调节上皮细胞水通道蛋白 (Aquaporins,AQPs)的表达。盐皮质激素可使肾脏AQP3表达上调,对肾脏的AQP2表达依据刺激的时间不 同而表达不同,但对AQP1没有影响。糖皮质激素对不同组织器官AQPs的影响不尽相同。肾上腺皮质激素 对AQPs的调节作用在某些水代谢紊乱疾病的诊断与治疗方面可能有着广阔的应用前景。