自制金属冷冻板法冷冻人附睾精子的实验研究

目的:研究一种新型人精子冷冻方法对精子复苏率的影响,以探索人附睾精子、睾丸穿刺精子的最佳冷冻方法。方法:选取76例梗阻性无精子症患者的附睾穿刺(PESA)标本,按照自制金属冷冻板法和传统冷冻法分两组冷冻。采用计算机辅助精液分析系统检测冷冻前、后前向运动精子百分率,并对比两种方法对精子膜功能、DNA碎片指数(DFI)、顶体酶活性和精子畸形百分率的影响。结果:复苏后自制金属冷冻板法和传统冷冻法前向运动精子百分率[(12.0±7.5)%vs(8.0±5.1)%,P0.05]和低渗肿胀精子百分率[(22.0±17.5)%vs(18.0±20.5)%]比较有显著性差异(P0.05),均较冷冻前[(20.7±8.8)%和(30.0±13.5)%]显著下降(P0.05)。自制金属冷冻板法复苏后精子顶体酶活性显著高于传统冷冻法[(75.2±9.5)μIU/10~6精子vs(55.7±8.3)μIU/10~6精子,P0.05],均较冷冻前(120.0±10.5)μIU/10~6精子显著下降(P0.05)。两种方法复苏后畸形精子百分率和DFI无显著差异[(98.7±8.8)%vs(98.5±9.2)%,P0.05]和[(38.2±8.5)%vs(39.5±10.2)%,P0.05],并均较冷冻前[(97.2±9.5)%和(30.8±9.7)%]显著升高(P0.05)。自制金属冷冻板法和传统冷冻法冷冻复苏率[(65.2±12.0)%vs(52.3±18.0)%]有显著性差异(P0.05)。结论:自制金属冷冻板法是一种经济高效、操作简单的精子冷冻方法且能最大限度的节约精子;复苏后可以保证较好的精子复苏率、活动力和顶体酶活性。     

神经上皮干细胞粘附壳聚糖纤维生长分化的实验研究

目的 检测神经上皮干细胞与壳聚糖纤维的生物相容性,并探讨其在壳聚糖纤维材料上的生长、分化情况.方法 从胚胎神经管取材神经上皮干细胞,并与壳聚糖纤维进行体外共培养.采用MTT法检测细胞在壳聚糖纤维上的活性,采用光镜和扫描电镜技术观察细胞在壳聚糖纤维上的存活、生长状况,采用免疫细胞化学染色鉴定神经上皮干细胞的分化情况.结果 神经上皮干细胞可以贴附在壳聚糖纤维表面生长,并可分化为神经元和神经胶质细胞,细胞活性与单纯神经上皮干细胞培养组没有明显差别.结论 壳聚糖纤维与神经上皮干细胞有良好的生物相容性,二者在外周神经损伤的治疗中具有良好的应用前景.     

不明原因反复性自然流产89例主动免疫治疗及护理

目的:探讨主动免疫治疗不明原因反复性自然流产(URSA)的效果及护理方法。方法:选择89例自身封闭抗体阴性的URSA患者作为治疗对象。采用丈夫或无关健康第三个体的外周静脉血30 ml提取淋巴细胞进行上臂三角肌下缘皮下多点注射,3～4次为一个疗程。2周后检测患者自身封闭抗体变化,若为阴性,继续追加1～2个疗程主动免疫治疗,鼓励患者在3～6个月内妊娠,同时进行传统保胎治疗,加强优生优育知识宣教及心理护理。结果:本组78例URSA患者获妊娠成功,治疗成功率为87.64%。结论:主动免疫治疗URSA疗效显著,且操作简便,经济实用,安全可靠,无副作用,值得推广。     

夫精官腔内人工授精404周期的护理

目的 探讨夫精官腔内人工授精的护理方法.方法 对404周期各阶段实施专业护理及心理护理.结果 404周期,妊娠周期为71,周期妊娠率17.6％,无盆腔感染、卵巢过度刺激征等并发症发生.结论 做好术前、术中、术后的护理工作非常重要,通过加强专业护理,使不孕症患者以积极的心态接受治疗,提高了周期妊娠率.     

夫精宫腔内人工授精404周期的护理

目的探讨夫精宫腔内人工授精的护理方法。方法对404周期各阶段实施专业护理及心理护理。结果 404周期,妊娠周期为71,周期妊娠率17.6%,无盆腔感染、卵巢过度刺激征等并发症发生。结论做好术前、术中、术后的护理工作非常重要,通过加强专业护理,使不孕症患者以积极的心态接受治疗,提高了周期妊娠率。     

当归四逆汤治疗膝关节骨性关节炎临床研究

目的:观察当归四逆汤联合玻璃酸钠关节腔内注射治疗膝关节骨性关节炎的临床疗效。方法:选取本院收治的膝关节骨性关节炎患者80例作为研究对象,随机分为治疗组与对照组各40例,对照组单纯给予玻璃酸钠关节腔内注射治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用当归四逆汤治疗,日1剂,分早晚两次服用,疗程均为4周。比较两组患者临床疗效及关节功能评分改善情况。结果:治疗组与对照组临床愈显率分别为85.0%、60.0%,治疗组愈显率明显高于对照组(P0.05);治疗组治疗后较对照组膝关节功能评分改善更加明显(P0.05),具有统计学意义。结论:当归四逆汤联合玻璃酸钠关节腔内注射治疗膝关节骨性关节炎疗效显著。     

轴突导向因子EphA5沉默后抑制中脑神经上皮细胞投射

目的:探讨轴突导向因子EphA5在中脑神经上皮细胞向纹状体投射中的作用.方法:从孕11d大鼠胚胎取材并培养中脑神经上皮细胞；设计EphA5基因干扰序列,构建RNA干扰载体,采用电转染技术将EphA5干扰载体转入中脑神经上皮细胞,电转后将中脑神经上皮细胞与纹状体共培养,观察转染后中脑神经上皮细胞向纹状体组织的靶向生长情况.结果:中脑神经上皮细胞与纹状体组织块联合培养,神经突起明显朝向组织块生长；EphA5基因干扰载体转染中脑神经上皮细胞可降低EphA5蛋白表达,EphA5基因沉默后神经上皮细胞突起朝向纹状体生长趋势不明显.结论:EphA5基因沉默后中脑神经上皮细胞向纹状体投射减弱,EphA5基因可调控中脑神经上皮细胞向纹状体的靶向投射.     

躯干神经嵴干细胞与壳聚糖纤维组织相容性的研究

目的 探讨体外培养的躯干神经嵴干细胞与壳聚糖纤维的相容性.方法 采用神经管植块法培养躯干神经嵴干细胞,并行免疫荧光细胞化学双重染色鉴定,将培养48h的躯干神经嵴干细胞接种在壳聚糖纤维材料上,观察两者的组织相容性.结果 采用神经管植块法培养的神经嵴干细胞,免疫细胞化学染色呈现neatin及P75双阳性,将其接种在壳聚糖纤维支架材料上,可见神经嵴干细胞贴附于壳聚糖纤维上生长;S-100免疫细胞化学染色显示,S-100阳性细胞突起的末端呈扁平状膨大;扫描电镜显示,壳聚糖纤维上的躯干神经嵴干细胞为梭形,呈现"端对端"、"肩并肩"排列,伸出爪形伪足贴附于壳聚糖纤维上.结论 躯干神经嵴干细胞与壳聚糖纤维有良好的组织相容性,并可分化为Schwann细胞.     

EphA5介导胚胎中脑神经上皮干细胞向纹状体投射的实验研究

目的探讨轴突导向分子EphA5在胚胎中脑神经上皮干细胞向靶组织纹状体特异性投射中的作用。方法自孕11d大鼠取材胚胎中脑神经上皮干细胞并进行体外培养,应用免疫细胞化学的方法检测EphA5在神经上皮干细胞中的表达情况;取材鼠脑纹状体组织,应用冰冻切片、RT-PCR及Western-blot等方法检测EphA5的配体Ephrin-A5的特异表达情况;将胚胎中脑神经上皮干细胞与新生鼠纹状体组织块联合培养,观察细胞的靶向生长情况。结果体外培养的胚胎中脑神经上皮干细胞可明显向纹状体生长并呈EphA5阳性,靶区纹状体组织中可检测到其配体Ephrin-A5高表达。结论轴突导向分子EphA5受体及其配体Ephrin-A5可介导胚胎中脑神经上皮干细胞向纹状体组织的靶向生长。     

子宫内膜不同刺激方式对冻融胚胎移植患者妊娠结局的影响

目的探究冻融胚胎移植(FET)前患者行子宫内膜机械刺激、宫腔灌注人绒毛膜促性腺激素(hCG)、宫腔灌注重组人生长激素(GH)治疗对妊娠结局的影响。方法对2018年1月—2019年8月在淄博市妇幼保健院生殖医学中心着床失败再次行FET治疗的患者共376个周期进行回顾性研究,分为A组(子宫内膜机械刺激36个周期)、B组(宫腔灌注hCG 158个周期)、C组(宫腔灌注GH 90个周期)、D组(未进行宫腔灌注治疗92个周期),比较各组患者黄体酮转化日子宫内膜厚度、着床率、临床妊娠率、早期流产率、活产率。结果A组、B组、C组、D组黄体酮转化日子宫内膜厚度分别为(9.77±1.20)mm、(10.08±1.51)mm、(9.35±1.54)mm、(9.30±1.25)mm,临床妊娠率分别为52.78%、55.70%、52.22%、36.96%,4组黄体酮转化日子宫内膜厚度、临床妊娠率比较差异均有统计学意义(F=19.012,P<0.05;χ^(2)=8.614,P<0.05)。结论着床失败的患者在FET前行子宫内膜机械刺激、宫腔灌注hCG、宫腔灌注GH可以改善子宫内膜厚度,有助于提高临床妊娠率。