黄连解毒汤中9种主要成分在大鼠脑组织中分布特征研究

目的建立灵敏、准确、可靠的小檗碱、小檗红碱、药根碱、巴马汀、黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A、京尼平苷和栀子黄素B在大鼠海马、皮层、纹状体和脑脊液组织中高效液相色谱-串联质谱联用(HPLC-MS-MS)分析方法,用于黄连解毒汤中9种主要成分在大鼠脑组织中分布研究。方法优化黄连解毒汤中9种主要成分及内标克拉霉素和氯霉素的质谱检测条件,确定分析条件并对方法学进行考察。正常大鼠ig给予黄连解毒汤,末次给药1 h后采集脑脊液、海马、皮层和纹状体样品,经处理后将该方法用于9种成分的测定。结果小檗碱、药根碱、巴马汀、黄芩苷、汉黄芩素、千层纸素A、栀子黄素B在1～250 ng/mL呈现良好的线性关系(r~20.99),小檗红碱在1～500 ng/mL具有良好的线性关系(r~2=0.991 2),京尼平苷在5～500 ng/mL具有良好的线性关系(r~2=0.999 5);各成分的日内、日间精密度RSD均小于12.94%,准确度均在-12.71%～6.91%;提取回收率均在88.02%～106.70%,基质效应均在88.92%～105.10%;短期、冻融循环和长期稳定性RSD均小于12.51%。各成分在海马、皮层和纹状体中的含量为小檗碱黄芩苷京尼平苷小檗红碱巴马汀汉黄芩素药根碱千层纸素A栀子黄素B;各成分在脑脊液中的含量为京尼平苷小檗碱小檗红碱巴马汀黄芩苷栀子黄素B药根碱汉黄芩素千层纸素A。结论该方法可用于大鼠脑组织中小檗碱、药根碱等9种成分含量的同时检测,并可用于这9种成分在大鼠脑组织分布研究,为探究黄连解毒汤治疗脑部疾病的物质基础提供依据。     

栀子总环烯醚萜对抑郁模型小鼠神经递质的影响

目的探讨栀子总环烯醚萜对抑郁模型小鼠神经递质的影响。方法小鼠随机分为对照组、盐酸氟西汀组(20 mg/kg)、4个不同时间点模型组(2、6、12、24 h)和4个总环烯醚萜组(2、6、12、24 h,90 mg/kg),各组连续给药7 d,于末次给药后1 h,腹腔注射脂多糖(0.83 mg/kg)建立小鼠抑郁模型。采用强迫游泳实验检测小鼠抑郁行为,同时以LC-MS/MS分析小鼠海马区GABA、Glu、ACh、5-HT和DA水平。结果LPS注射后2 h和6 h,总环烯醚萜可以缩短强迫游泳小鼠的不动时间(P<0.01);同时总环烯醚萜可以降低2 h和6 h抑郁模型小鼠海马区Glu,ACh水平(P<0.01),并升高GABA、5-HT、DA水平(P<0.01)。结论栀子总环烯醚萜可以改善脂多糖诱导的抑郁模型小鼠的行为,其作用机制可能与总环烯醚萜调节GABA、Glu、ACh、5-HT和DA的水平有关。     

基于HERB数据库草药成分的新型冠状病毒多靶点新型抑制剂虚拟筛选

目的 通过计算机虚拟筛选从HERB数据库草药成分中筛选出靶向新型冠状病毒主蛋白酶（main protease,Mpro）、木瓜样蛋白酶（papain-like protease,PLpro）和受体结合域（receptor binding domain,RBD）的新型潜在抑制剂并阐述其相互作用机制。方法 以从HERB数据库中获得的天然化合物为筛选对象,综合运用药效团模型、分子对接、ADME-T预测、分子动力学模拟和分子力学泊松-玻尔兹曼表面积（molecular mechanics Poisson-Boltzmann surface area,MM-PBSA）等计算方法,获取靶向新型冠状病毒中Mpro、PLpro和RBD等多个靶点的潜在抑制剂,并采用酶活性抑制实验评价其植物提取物对Mpro的抑制效果。结果 化合物HBIN006454、HBIN032286和HBIN031053对SARS-CoV-2的Mpro、PLpro和RBD靶点均具有较高的结合亲和力。其中,巴戟天中的HBIN031053具有更好的类药性和药动学特性,且与各靶点所形成的复合物在分子动力学模拟中均表现出良好的稳定性。MM-PBSA分析结果进一步揭示了在HBIN031053-Mpro、HBIN031053-PLpro以及HBIN031053-RBD的结合中发挥关键作用的氨基酸残基,并深入阐述了其抑制病毒蛋白酶活性的机制。酶活性抑制实验表明,巴戟天提取物对Mpro有抑制效果。结论 天然化合物HBIN031053可作为靶向SARS-CoV-2中Mpro、PLpro和RBD等靶点的潜在新型抑制剂。