《伤寒论》治疫方用药规律分析及核心药对治疗COVID-19的作用机制研究

目的 基于数据挖掘分析《伤寒论》疫病治疗相关方剂的用药规律,并利用网络药理学分析核心药对“柴胡-黄芩”治疗新型冠状病毒肺炎（coronavirus disease 2019,COVID-19）的作用机制。以期探讨经方治疗疫病的当代价值。方法 筛选《伤寒论》中治疗疫病的经方,利用R语言等软件对频次、性味归经、相关性、关联规则等用药规律进行分析,并运用网络药理学方法对用药规律中核心药对治疗COVID-19的机制进行探究。用Cytoscape对筛选出的成分及靶点构建“疾病-药物-成分-靶点”网络,将关键靶点导入String数据库进行蛋白相互作用（protein-protein interaction,PPI）网络分析,并在R语言中进行基因本体论（gene ontology,GO）功能分析和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）通路分析。结果 纳入《伤寒论》中与疫病相关的方剂61首,共52味中药。前20味高频用药中以温性药、辛味药为主,多归脾、肺经,功效以补气药居多。“柴胡-黄芩”药对相关性最强,5个类聚方为小柴胡汤...     

基于AHP的中医药+重大传染病应急管理体系建设指标分析

将中医药融入体系建设,充分发挥中医药在战疫工作中的特色,构建并完善中西医结合应急管理体系,对于我国重大传染病防控有至关重要的作用.本研究借助文献可视化分析软件Cite space对我国重大传染病应急管理体系建设研究现状进行分析,初步构建中医药+重大传染病应急管理体系建设层次结构模型,并对各指标进行权重计算和一致性检验,...     

桃仁膝康丸治疗骨性关节炎机制的网络药理学分析与验证

目的：以网络药理学方法探讨桃仁膝康丸治疗骨性关节炎的可能作用机制。方法：通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）搜索和筛选出桃仁膝康丸活性成分及作用靶点,检索GeneCards、OMIM和CTD数据库获得与骨性关节炎相关的非重复靶点,取交集获取中药抗骨性关节炎相关的药物活性成分靶点,使用String软件构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,利用Cytoscape 3.8.2软件构建蛋白质-蛋白质相互作用网络图,筛选核心靶点和构建药物-活性成分-骨性关节炎相关靶点网络;借助DAVID数据库进行基因本体论（GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析;将活性成分与预测疾病核心靶点进行分子对接验证;免疫印迹法（Western Blot）验证对细胞凋亡效应蛋白半胱氨酸蛋白酶（Caspase,CASP）3靶点的干预。结果：从桃仁膝康丸中筛选出53个活性成分,主要作用于骨性关节炎相关55个的靶点,靶标作用主要涉及细胞凋亡、炎症、细胞自噬、细胞老化、活性氧代谢、免疫生物过程和通路;分子对接结果发现活性成分与核心靶标结合性能良好;Western Blot结果显示,桃仁膝康丸能显著...     

CDCP1胞外段基因的克隆及在大肠杆菌中表达

目的：构建携带 CDCP1胞外段基因的原核表达载体。方法以 A549的 mRNA 为模板,应用所设计的引物通过 RT-PCR 法扩增 CDCP1胞外段基因;将 PCR 产物与 pGEX-KG 载体连接,获得重组质粒 pGEX-KG/CDCP1;经双酶切、PCR 及 DNA 序列测定进行鉴定;IPTG 诱导表达。结果①RT-PCR 扩增得到约270 bp 大小的 CDCP1胞外段基因目的片段;②目的片段正确插入到 pGEX-KG 中;③经 IPTG 诱导表达,可见在相对分子质量约35kD 处出现明显的诱导蛋白条带,与预期一致。结论成功构建了携带 CDCP1胞外段基因的原核表达载体,在大肠杆菌中获得大量表达。     

人工膝关节置换术围手术期护理

膝关节病变严重影响关节功能,使患者生活质量降低,因此接受全膝关节置换的患者越来越多.我院自1998年7月～2003年6月共实施了12例全膝关节置换术.通过我们精心的护理及配套的康复训练,患者关节功能恢复良好,现将围手术期护理总结报告如下.     

稳心律合剂对房颤大鼠3种血栓前标志物CD62p、D2D、VWF影响的研究

目的 研究稳心律合剂对房颤大鼠3种血栓前标志物CD62P、D2D、VWF的影响.方法 以氯化钙-乙酰胆碱混合溶液尾静脉注射的方式,建立房颤大鼠模型,筛选具有典型房颤心电图的大鼠40只,随机分为房颤模型组、稳心律合剂治疗组、西药阿司匹林和华法林治疗对照组,平行设定正常对照组10只,连续给药4周后,测定血清中CD62P、D2D、VWF的含量.结果 大鼠房颤模型组与正常对照组比较,血清中CD62P、D2D、VWF的含量明显增加,差异有统计学意义(P<0.05).稳心律合剂治疗组和华法林及阿司匹林对照组与模型组比较,可以明显地降低血清中CD62P、D2D、VWF的含量(P<0.05).稳心律合剂治疗组对房颤大鼠血清中CD62P、D2D、VWF的改善程度接近于法华林对照组,优于阿司匹林对照组,三组均显著地较模型组下降.结论 稳心律合剂可有效地降低房颤大鼠血液中CD62P、D2D、VWF的含量,可有效地防治房颤,并对房颤后血栓形成有一定干预作用.     

HPLC 法同时测定复方血栓通胶囊中5种皂苷类成分

目的：建立 HPLC 法同时测定复方血栓通胶囊中人参皂苷 Rg1、Re、Rb1、Rd 和三七皂苷 R1含量的方法。方法采用YMC －Pack Pro C18柱（250 mm ×4．6 mm,5μm）,以乙腈为流动相 A,水为流动相 B 进行梯度洗脱,检测波长为203 nm,流速为1．0 mL·min －1,柱温为35℃。结果测得三七皂苷 R1在50．10～501．00 ng、人参皂苷 Rg1在151．02～1510．20 ng、人参皂苷Re 在32．01～302．10 ng、人参皂苷 Rb1在102．23～1022．30 ng、人参皂苷 Rd 在16．32～163．20 ng 范围内线性关系良好（r ＝0．9999）;精密度、稳定性、重复性 RSD 均小于3％;平均加样收回率在95％～105％之间。结论该法简便、准确、重复性好,可用于复方血栓通胶囊的质量控制。     

桃仁膝康丸对骨性关节炎相关细胞因子和软骨细胞凋亡的影响

目的：用细胞学方法探讨桃仁膝康丸治疗骨性关节炎的作用和机制。方法：人滑膜成纤维细胞采用肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor, TNF)-α诱导建立急性炎症模型,采用脂多糖诱导建立巨噬细胞M1极化模型,人软骨细胞采用CoCl₂诱导建立缺氧凋亡模型,通过CCK-8法检测桃仁膝康丸对细胞的毒性,Western Blot检测全长基质金属蛋白酶9(Full-length Matrix Metalloproteinase-9,Full MMP9)、裂解基质金属蛋白酶9(Cleaved Matrix Metalloproteinase-9,Cleaved MMP9)、TNF-α、白细胞介素(Interleukin,IL)-6、全长半胱氨酸蛋白酶3(Full Caspase-3)和裂解半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)的表达。结果：1μL/mL及以下浓度的桃仁膝康丸不影响细胞活力;Western Blot结果显示,桃仁膝康丸显著抑制滑膜成纤维细胞MMP9生成、活化,以及M1巨噬细胞炎症因子生成和软骨细胞Caspase-3活化。结论：桃仁膝康...