不同动物大肠癌造模方法的研究进展

大肠癌是目前临床上最常见的消化道恶性肿瘤之一,迄今全球的发病率仍在持续上升并趋于年轻化,因此临床上迫切需要提高大肠癌诊断的灵敏性,充分了解大肠癌的病因和发病机制,寻求有效的治疗和预防措施。大肠癌动物模型能有效地模拟大肠癌发生、发展和转归,是研究发病和转移机制的重要方式之一,用于简化实验步骤和探究实验机制。已有大量的研究表明,在不同遗传背景的动物上进行大肠癌的复制,并在人为控制条件下进行各种实验研究,有利于缩短实验周期,观察大肠癌发生、发展和转化的全过程。目前实验中常用4~6周龄的裸鼠、小鼠、大鼠做为模式生物。斑马鱼肿瘤和人类肿瘤在组织学水平上具有高度相似性,随着显微技术的发展,斑马鱼作为模式生物在肿瘤学的研究中逐渐兴起。不同模式生物的生物特性不同,选择的造模方法也存在差异。根据实验目的、实验周期、实验技术等因素,选择合适的模式生物和对应的造模方法是大肠癌实验成功的关键。近年来,有关大肠癌模型的研究成果不断涌现,但多以造模方法为分类依据,缺乏对不同类别的造模动物的探讨。本文结合国内外相关文献,对近10年不同动物大肠癌造模方法的研究进展做一综述,以把握发展动向,为大肠癌进一步的研究发展提供思路与方法。     

丹皮酚平衡溶解度与油水分配系数测定及大鼠在体肠吸收研究

目的 测定丹皮酚在各种溶剂中的平衡溶解度及表观油水分配系数,并研究其在体肠吸收性质.方法 HPLC法测定丹皮酚的浓度,用摇瓶法测定丹皮酚的表观油水分配系数,大鼠在体单向肠灌流实验,按重量法计算动力学参数.结果 25℃丹皮酚在水中的平衡溶解度为0.5 g/L,在酸性磷酸盐缓冲液中的平衡溶解度较低,碱性磷酸盐缓冲液中的平衡溶解度较高,在常用的有机溶剂中的溶解度大于1 g/L;25℃丹皮酚在正辛醇-水系统中的油水分配系数Papp为263.2( lgPapp=2.42);丹皮酚在肠道各部位的吸收速率按空肠、回肠、十二指肠、结肠顺序下降.结论 不同pH值的介质对丹皮酚表观油水分配系数影响不大;丹皮酚在整个肠段均有吸收,小肠为主要吸收部位.     

20(S)-原人参二醇自微乳释药系统的处方优化和有效期预测

目的:优化20(S)-原人参二醇自微乳释药系统处方并预测其有效期。方法:以油相中油酸质量分数、油相比例、乳化剂与助乳化剂比值为自变量,载药量,粒径,Zeta电位和优选10 min时药物溶出度为因变量,采用星点设计-效应面法优选20(S)-原人参二醇自微乳的处方组成;利用单因素试验优选制备工艺;通过Q10法在较高温度下进行加速试验,预测该制剂的有效期。结果:自微乳的最佳处方为油相中油酸质量分数84.09%,油相比例30%,乳化剂-助乳化剂(2.58∶1);载药量102.22mg·g-1,粒径39.67 nm,Zeta电位-13.1 m V,10 min时药物溶出度75.01%。制备工艺参数为混合方式为磁力搅拌,混合速度400 r·min-1,混合时间30 min,混合温度45℃。Q10法预测自微乳的室温贮存有效期约1.51年。结论:优选的制剂处方合理、工艺可行、样品稳定性良好,可为20(S)-原人参二醇的新型制剂探索提供研究数据。     

20(S)-原人参二醇片含量测定及体外评价方法的研究

目的:制备20(S)-原人参二醇[20(S)-PPD]片,建立其含量测定及溶出度考察方法。方法:采用高效液相色谱法,C18色谱柱,乙腈-水(88∶12)为流动相,检测波长203 nm,流速1.0 mL.min-1,对样品中的20(S)-原人参二醇含量进行测定;并参照《中国药典》2010年版二部溶出度测定法第二法,以0.5%十二烷基硫酸钠水溶液为溶出介质,转速为100 r.min-1,对其进行体外溶出度考察,采用SAS软件非线性回归NLIN程序包中的Levenberg-Marquardt法进行迭代计算药物溶出度Weibull分布参数和特征溶出参数。结果:20(S)-原人参二醇的含量测定线性范围为20.4～1 020.0 mg.L-1(r=0.999 9),平均回收率为97.0%,RSD为1.99%;溶出度方法学考察,含量测定线性范围为10.0～80.0 mg.L-1(r=0.999 9),平均回收率为99.9%,RSD为2.13%,20 min即溶出完全;Weibull分布参数α位置参数为0.5 266,m形状参数为0.602 1,β尺度参数为2.387 2;特征参数Td为4.766 8 min,T50为2.834 7 min。结论:所建立的20(S)-原人参二醇片剂的含量测定和体外溶出度测定方法简便、准确、可靠,采用SAS系统可以简单快速的求解药物溶出度Weibull分布参数和特征参数。     

20（S）-原人参二醇油水分配系数测定和大鼠在体肠吸收的研究

目的测定20（S）-原人参二醇[20（s）-PPD]表观油水分配系数,并研究其在体肠吸收机理。方法利用高效液相色谱法测定20（S）-PPD浓度,采用摇瓶法测定其表观油水分配系数。采用大鼠在体单向肠灌流实验,按重量法计算动力学参数。结果37℃条件下,20（s）-PPD在正辛醇饱和水相中的表观油水分配系数为（log Papp=1．72）,在不同pH磷酸盐缓冲液中的表观油水分配系数与水相中数值接近。20（s）-PPD在整个肠段都有吸收,吸收速率常数按大小依次为十二指肠、空肠、回肠、结肠,结肠段的丘和只,,与其他肠段比较相对较小,说明2O（S）-PPD的主要吸收部位在小肠。结论不同pH值的介质对20（S）-PPD表观油水分配系数影响不大;20（S）-PPD在整个肠段均有良好的吸收,小肠为主要吸收部位。在该药物开发方面,应设法延长其在小肠内的滞留时间,以提高生物利用度。     

星点设计-效应面法优化丹皮酚片剂处方

目的:通过星点设计-效应面法优化丹皮酚片剂处方.方法:以MCC102、乳糖复合物Cellactose80和黏合剂PVPS630的用量、片剂硬度为考察因素,以崩解时间和脆碎度为考察指标,并计算其“归一值(OD)”,分别用多元线性模型、二次多项式和三次多项式模型描述考察指标和3个考察因素之间的数学关系,绘制效应面和等高线图,确定较优处方并进行验证.结果:根据拟合模型,发现3个考察因素和考察指标之间存在可信的定量关系;优选的最佳处方为MCC102与Cellactose80的比例为1∶1,PVP S630含量为1％,优化处方各设定的预测值和测定值非常接近.结论:采用星点设计-效应面法,得到了基于二次多项式和三次多项式模型的丹皮酚片剂处方优化模型,实现了该片剂的处方优化.