2016-2020年杭州地区单中心EB病毒感染患儿阳性检出率的统计与分析

目的 回顾性分析杭州地区2016年至2020年间儿童EB病毒的感染情况、构成、流行趋势等信息。方法 选取2016年至2020年期间,杭州市儿童医院病原体核酸检测的样本共72526例,将其中EB病毒核酸阳性的1391例纳入统计研究,并分析各年份杭州地区儿童EB病毒感染的人数、感染月份、性别比例及年龄构成等因素。结果 2016-2020年,报告EB病毒核酸阳性检出病例1391例,占全院儿童检测病原体包括肺炎支原体,沙眼支原体,解脲支原体,EBV和人巨细胞病毒等各类DNA病毒的1.92%,五年间EB病毒核酸阳性检出率分别为1.56%,1.81%,1.89%,1.63%和3.11%;性别方面,男性感染患儿的核酸阳性检出778例,女性感染核酸阳性检出613例,男女比例为1.27：1;年龄分布方面,1-6学龄前儿童EB病毒感染患儿核酸阳性检出1184例,占我院1-15岁患儿总检出病例数的85.12%。流行季节方面,夏秋季为感染高峰,冬春季不明显。结论 2016年-2019年,杭州地区EB病毒感染患儿比例相对平稳（x2趋势检验,P>0.05）,但在2020年,阳性检出率明显上升,这可能与新冠疫情有关;学龄前儿童为EB病毒的主要易感者,这与学龄前儿童的免疫水平以及淋巴细胞比例水平可能存在一定相关性,同时男童与女童的阳性检出率存在显著差异（P<0.05）且男童易感率更高,此外EB病毒传播还具有一定季节规律。     

铁皮石斛SCoT-PCR反应体系的优化

目的 对铁皮石斛的目标起始密码子(start condon targeted polymorphism,SCoT)多态性反应体系进行优化,为进一步对铁皮石斛遗传多样性的SCoT分析奠定基础.方法 以铁皮石斛的新鲜叶片为试验材料,采用控制单一变量的方法分别研究模板DNA用量、引物浓度、TaqDNA聚合酶用量、dNTPs浓度、及退火温度共5个因素对SCoT-PCR扩增结果的影响.结果 铁皮石斛SCoT标记的20 μL优化反应体系为:DNA模板20 ng、引物浓度为30 μmol/L、Taq DNA聚合酶用量为1.0 U、dNTP浓度为100 μmol/L.适宜的PCR扩增程序为95℃预变性4 min; 95℃变性50 s,56.1℃复性退火40 s,72℃延伸2 min,循环36次;72℃延伸5 min,4℃保存.1.5％琼脂糖凝胶电泳显示扩增产物在600～2 000 bp.结论 该体系的建立为铁皮石斛种质遗传多样性分析、分子标记辅助育种等研究奠定了基础.     

滤泡辅助性T细胞在柯萨奇病毒A6型手足口病患儿外周血中的表达及作用

目的 探讨滤泡辅助性T细胞(Tfh)在柯萨奇病毒A6型手足口病(HFMD)患儿外周血中的表达水平及作用。方法 采集2022年6月至2023年8月杭州市儿童医院收治的A6型HFMD患儿33例作为HFMD组,选择同期体检健康儿童26例作为健康人对照组,利用流式细胞术检测HFMD患儿和体检健康儿童外周血中的Tfh频数,分析并比较二者之间的关系。结果 HFMD组和健康人对照组CXCR5⁺CD4⁺细胞占CD4⁺ T淋巴细胞的频数分别为3.95(2.31,6.21)%和1.44(0,94,2.43)%,两组之间差异有统计学意义(P<0.001)。HFMD组中ICOS⁺CXCR5⁺CD4⁺和PD-1⁺CXCR5⁺CD4⁺ Tfh细胞频数分别为1.44(0.81,2.86)%和1.64(0.65,4.05)%,而在健康人对照组分别为0.84(0.27,1.46)%和0.47(0.13,1.12)%,两...     

铁皮石斛SCoT-PCR反应体系的优化

目的 观察蠲痹通督汤配合小针刀松解术等治疗强直性脊柱炎的临床疗效。方法 126例强直性脊柱炎（AS）患者随机分为治疗组与对照组,对照组患者口服非甾体类抗炎药＋柳氮磺胺吡啶片＋雷公藤多苷片;治疗组患者口服蠲痹通督汤,同时采用小针刀闭合松解术治疗,可配合中药熏蒸及激光照射,4周为一个疗程,两组均治疗3个疗程。采用国际AS评价工作组（ASAS）推荐的ASAS20改善标准和患者主要相关体征进行疗效评价。结果 治疗组ASAS20改善例数、临床疗效指标及主要体征的改善均明显优于对照组（P＜0.05）。结论 蠲痹通督汤配合小针刀松解术及中药熏蒸治疗强直性脊柱炎疗效确切,不良反应少,值得临床推广。     

2017—2022年杭州地区4079例儿童RSV感染流行特征分析

目的 了解杭州地区急性呼吸道感染儿童中呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus,RSV）的核酸阳性检出情况及流行特征。方法 收集整理2017年1月至2022年12月杭州市儿童医院检出的RSV核酸阳性患儿的信息,对年龄、性别、检出时间等因素进行回顾性分析。结果 累计送检样本22 755例,其中RSV病例4079例,总阳性检出率17.93%,历年总体呈现不断波动的感染特征。性别方面,男童RSV阳性检出率10.36%,女童7.57%,男女比例为1.36∶1,差异有统计学意义（P<0.05）;年龄上,<1岁的婴幼儿阳性检出2378例,占所有阳性检出患儿的58.30%,<3岁患儿占比94.93%,不同年龄段患儿的RSV阳性检出率随年龄增大呈下降趋势;季节方面,RSV在秋、冬季高发,两季检出率占比83.82%,春、夏季检出率仅为16.18%,秋、冬季节的RSV阳性检出率显著高于春、夏季（P<0.05）。结论 杭州地区历年急性呼吸道感染患儿中,RSV感染呈波动趋势,且秋、冬季高发,婴幼儿及男童阳性检出率较高,应注意在相应季节的重点人群的防护。     

2016至2022年杭州地区14 259例儿童肠道病毒流行特征分析

目的 了解杭州地区手足口病（hand-foot-mouth disease,HFMD）病原体肠道病毒（entero virus,EV）的阳性检出情况及流行特征,为今后制定杭州地区HFMD防控策略提供科学依据。方法 收集整理2016年1月至2022年12月期间杭州市儿童医院检出的EV通用型核酸阳性的14 259例的病例信息,对年龄、性别、检出时间等因素进行回顾性分析。 结果 EV历年平均阳性检出率为45.48%（14 259/31 354）,其中男童阳性检出率为27.20%,女童为18.28%,差异有统计学意义（P<0.01）。不同年龄段患儿EV阳性检出率随年龄增大呈下降趋势,5岁以下儿童的EV阳性检出率占所有阳性检出患儿的90.38%。在季节方面,EV夏季高发,历年夏季5月至7月的总阳性检出数占总检出数的49.16%,自2016年以来EV阳性检出率呈逐年下降趋势。结论 杭州地区EV感染具有性别差异,男童易感染,尤其需要重视5岁以下儿童的EV防护。另外HFMD存在一定的季节性,夏季高发,历年检出率自2016年后逐年下降,可能与疫苗推广和健康意识提高存在一定关系。     

野生白及SRAP-PCR反应体系的优化

采用浓度梯度设计法研究适合白及的SRAP-PCR反应体系。对影响SRAP-PCR的DNA模板、引物、dNTP、Mg2+、Taq酶、退火温度等6个因素进行优化。最终确定白及的SRAP-PCR优化体系:在20μL体系中,DNA模板30 ng、Mg2+2.5 mmol/L、dNTPs 0.25μmol/L、引物20μmol/L、Taq酶2.0U,扩增体系为:94℃预变性5 min;5个循环的94℃变性1 min,36℃退火1 min,72℃延伸1 min;之后35个循环:94℃变性1 min,48℃退火1 min,72℃延伸1 min;72℃最后延伸5 min。该体系的建立为野生白及种质资源遗传多样性的进一步相关遗传分析奠定了基础。