胶质瘤中LGI 1的突变及微卫星不稳定性研究

目的 为了检测人脑胶质瘤组织及胶质瘤细胞系LGI 1基因编码区中有无碱基突变及微卫星不稳定性(MSI)和杂合性缺失(LOH).方法 收集30例胶质瘤标本,2例脑膜瘤、2例瘤旁及2例颅脑损伤内减压脑组织标本及体外培养5个脑胶质瘤细胞系.提取组织标本及培养细胞基因组DNA.设计特异性引物分别扩增LGI 1各外显子序列,采用SSCP银染分析;扩增LGI 1微卫星序列,凝胶电泳银染分析;发现异常泳动条带进行DNA序列分析.结果 ①PCR-SSCP分析琼脂糖凝胶电泳检测有1例Ⅱ级胶质瘤标本未检测到第1 a外显子处扩增产物以及Ⅱ、Ⅲ级各1例胶质瘤标本均未检测到第8 c外显子处扩增产物.未在30例胶质瘤标本和4个脑胶质瘤细胞系中检测到电泳条带异常,在细胞系TJ905第5外显子处检测到电泳条带异常,经DNA测序分析证实确有突变.②在30例胶质瘤标本及5个细胞系中均未检测到MSI和LOH.结论 基因突变及MSI和LOH可能不是LGI 1在胶质瘤恶性进展过程中失活的主要原因.     

白藜芦醇抑制C6及TJ905胶质瘤细胞生长的研究

白藜芦醇是近年来发现的具有预防肿瘤发生的天然植物成分，属于非黄酮类多酚化合物，广泛存在于种子植物中，并以新鲜葡萄皮中所含的量为最高（50～100μg/g），而在红葡萄酒中也可高达1．5～3mg／L。白藜芦醇是植物在遇到真菌感染、紫外线照射不利条件时所产生的植物补体，对植物本身起保护作用，同时对人体也具有调节脂质代谢、抑制血小板聚集、保护心血管、抗炎、抗肿瘤等多种生物学活性和药理作用，具有很大的药用价值。目前的研究表明，白藜芦醇对鼠肝细胞癌、人肝母细胞、乳腺癌等多种肿瘤细胞均有显著抑制作用。但白藜芦醇对脑胶质瘤作用的研究国内还未见报道。本实验初步研究白藜芦醇对大鼠C6及人脑TJ905胶质瘤细胞的生长抑制和杀伤作用。     

甲状腺重量及血清TSH浓度对小剂量131Ⅰ治疗甲亢疗效的影响

目的:评价甲状腺重量及血清TSH浓度对小剂量131Ⅰ治疗甲状腺功能亢进症(甲亢)疗效的影响.方法:患者治疗前均行甲状腺SPECT扫描并检测血清FT3、FT4、TSH浓度;131I治疗的剂量为常规剂量的1/2～2/3.结果:①治疗前一次给药组TSH浓度为0.10±0.34mμ·L-1,重复给药组为0.04±0.10mμ·L-1,两者差异有显著性(P＜0.05);②治疗前甲状腺的重量一次给药组为51.22±26.09g,重复给药组87.34±63.69g,两者差异有显著性(P＜0.0001).结论:小剂量131Ⅰ治疗甲亢的疗效良好,多数患者能一次治愈,但对于大甲状腺患者或血清TSH浓度很低者则需多次治疗.     

RP-HPLC法测定花生仁、花生油和葡萄干中白藜芦醇

白藜芦醇的化学名为三酚(3,5,4-trhydrox-ystilbene)。研究表明,白藜芦醇具有抗菌、抗炎、抗过敏、抗血栓作用,明显的抗氧化、抗自由基作用,对冠心病、高血脂的防治作用,抗癌、抗诱变的作用以及抑制肿瘤的产生。花生仁、花生油和葡萄干为常用食物,富含白藜芦醇,对人们的健康非常重要。因此本研究采用RP-HPLC法测定花生仁、花生油和葡萄干中白藜芦醇。1仪器与材料Agilent1100高效液相色谱仪,化学工作站;CX—250超声波清洗器;909型电热干燥箱;AE240S电子分析天平(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)。乙腈为色谱纯,水为四蒸水,甲醇为分析…     

白藜芦醇对U251脑胶质瘤细胞Bcl-2、Bcl-XL、CyclinD1和STAT-3蛋白表达的影响

探讨白藜芦醇对U251人脑胶质瘤细胞生长的抑制和相关蛋白的表达及其意义.采用MTT法检测白藜芦醇对U251细胞的增殖活性的影响;采用ABC免疫组化法检测相关Bcl-2、Bcl-XL、CyclinD1和STAT-3蛋白的表达.结果显示,白藜芦醇对U251脑胶质瘤细胞生长有抑制作用,且呈时间、剂量相关;白藜芦醇作用于U251脑胶质瘤细胞后Bcl-2、Bcl-XL、CyclinD1、STAT-3蛋白表达下降,同时细胞形态也发生改变.白藜芦醇能抑制U251脑胶质瘤细胞的增殖,能诱导细胞凋亡.     

RNA干扰胰岛素样生长因子结合蛋白2基因治疗胶质瘤的体外实验研究

目的 研究与胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGF-BP2)对胶质瘤的抑制作用.方法 化学合成3条针对IGF-BP2的siRNA和1条阴性对照siRNA,采用小分子干扰RNA技术使胶质瘤U251细胞的IGF-Bit2基因沉默.通过逆转录PCR和免疫组化的方法检测IGF-BP2的表达,用MTT法检测干扰后U251细胞的增殖活性变化.结果 逆转录PCR检测表明转染后24 h IGF-BP2的mRNA表达明显降低,空白对照、阴性对照、脂质体、siRNA1、siRNA2、siRNA3组中IGF-BP2 mRNA水平分别为:0.88±0.02,0.87±0.03,0.84±0.02,0.65±0.03,0.55±0.04和0.64±0.02.48 h分别为0.93±0.04.0.90±0.04,0.93±0.03,0.76±0.04,0.58±0.03和0.75±0.02,72 h为0.95±0.04,0.95±0.03,0.94±0.02,0.78±0.05,0.60±0.02和0.76±0.03.3条siRNA中siRNA2作用最显著.免疫组织化学方法检测表明IGF-BP2的蛋白表达阳性率也由92.3%明显降低至24 h的15%,至48 h为52.5%,仍低于正常胶质瘤细胞.RNA干扰后胶质瘤细胞的MTT值虽在缓慢升高,于24 h相对于对照组差异无统计学意义,但至48 h和72 h均低于对照组(P＜0.05).结论 理想的IGF-BP2小分子干扰RNA序列能够抑制该基因的mRNA和蛋白的表达并能抑制胶质瘤细胞的增殖活性.     

卡氮芥-聚乳酸缓释剂对鼠胶质瘤的抑制作用

为了提高胶质瘤化疗的疗效 ,我们研制了卡氮芥聚乳酸缓释剂 (ＢＣＮＵ ＰＬＡ) ,并曾初步探讨了其体外释放特性。本研究进一步对ＢＣＮＵ ＰＬＡ对大鼠体重和血细胞的影响 ,还将ＢＣＮＵ ＰＬＡ用于治疗大鼠脑胶质瘤 ,收到良好疗效。一、材料与方法1 .ＢＣＮＵ ＰＬＡ缓释剂对外周血的影响 :36只大鼠随机分成 6组 (载药量 30 %ＢＣＮＵ ＰＬＡ 3组、空白 ＰＬＡ 3组 ) ,每组 6只 ,体重 2 0 0～ 2 50ｇ ,戊巴比妥钠腹腔麻醉 (40ｍｇ ｋｇ)后 ,将鼠头部固定于立体定位仪上 ,碘酒、酒精消毒 ,于矢状缝左 2ｍｍ ,冠状缝后 3ｍｍ处 ,切开皮肤 ,钻…     

冠状动脉支架术患者血浆血小板激活因子含量的变化

冠状动脉(冠脉)支架术是救治急性冠脉综合征(ACS)及时而有效的手段。血小板激活因子(PAF)在各种感染和非感染性炎症反应的发生中起主要作用。我们观察了行与未行冠脉支架术ACS患者血浆PAF含量的变化，并与稳定型心绞痛(SA)患者及健康人进行比较，报告如下。     

血瘀证患者血浆组织型纤溶酶原激活因子与组织型纤溶酶原激活抑制因子活性改变的观察

探讨急性心肌梗塞、冠心病及恶性肿瘤等血瘀证的准确治则。观察１２４例血瘀证患者，与２８例正常中老年作对照，以分析血浆组织型纤溶酶原激活因子（ｔＰＡ）和组织型纤溶酶原激活抑制因子（ＰＡＩ）的活性改变与临床病证的关系。结果：冠心病组（７９例）与对照组比较，血浆ｔＰＡ活性显著降低，ＰＡＩ活性显著升高（Ｐ均＜０．０５）；急性心肌梗塞组（１５例）与对照组比较，血浆ｔＰＡ活性高于其１．５倍，而ＰＡＩ活性也明显增高（Ｐ均＜０．０５）；恶性肿瘤组（３０例）血浆ｔＰＡ活性高于对照组１倍以上（Ｐ＜０．０５），而ＰＡＩ活性无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。提示：冠心病患者血浆ｔＰＡ活性下降，ＰＡＩ活性增高，纤溶活性普遍下降，血液趋于凝滞，临床应行活血化瘀的治疗方法。急性心肌梗塞患者血浆ｔＰＡ和ＰＡＩ的变化较复杂，随病程进展，在较短的时间后，纤溶功能下降需以较大灵活性辨证论治，随时更改药方。恶性肿瘤患者血浆ｔＰＡ活性明显增高，纤溶功能亢进，血粘度下降，对恶性肿瘤的局部浸润和全身转移有促进作用，故中医治疗应慎用活血化瘀攻法而应以扶正祛邪为治则，可获良效     

重组腺病毒Vpr诱导脑胶质瘤细胞凋亡的体外研究

目的 探讨重组腺病毒介导的人类免疫缺陷病毒1型病毒蛋白R(HIV1-Vpr)体外对胶质瘤细胞U251凋亡的影响.方法 将U251细胞分为正常对照组、空载体组和实验组进行细胞培养,24 h后空载体组和实验组按MOI=50分别进行空载体腺病毒(rAd5-null)和含有HIV1-Vpr基因的重组腺病毒(rAd5-Vpr)转染,转染后用MTT比色法测定细胞增殖活性,用Hoechst染色和流式细胞仪分别检测细胞的凋亡和细胞周期改变,用Western blot方法 检测相关蛋白的表达.结果 rAd5-Vpr能够抑制U251细胞增殖,其作用从转染后48 h开始,随着时间的延长,抑制作用逐渐增强(P＜0.05);实验组Hoechst染色观察到明显的细胞凋亡现象;流式细胞周期检测显示实验组细胞G2期比例升高(P＜0.05);Western blot结果 显示,实验组U251细胞经转染rAd5-Vpr72 h后,可见Vpr蛋白表达,同时Bcl-2蛋白表达降低,Bax、Caspase3和Fas-L蛋白表达增强.结论 rAd5-Vpr在体外能够抑制U251细胞增殖,诱导细胞周期G2期阻滞和细胞凋亡.