中国保健食品行业的现状和发展趋势

<正>保健食品在不同的国家有不同的定义,实施不同的标准、规范和管理,中国的保健食品是由传统的养生概念扩展、衍生而来,其作用机理为:用五味之阴,养五气之阳:平衡阴阳,通经活络、调和气血、滋补脏腑、培     

不同类型动脉粥样硬化病人血清中白细胞介素17及γ-干扰素表达的分析

目的研究动脉粥样硬化患者体内白细胞介素17（interleukin 17,IL-17）及γ-干扰素（interferon-γ,IFN-γ）的水平与动脉粥样硬化疾病的严重程度的关系。方法收集2016年黑龙江省医院心内科住院的37例患者,将病人分成急性冠脉综合征组与慢性冠脉病患者组,分析两组病人的年龄、性别,危险因素分布情况,并对这两组病人血清中IL-17与IFN-γ水平进行检测。结果分析表明急性冠脉综合征和慢性冠脉病两组患者在年龄、性别、冠心病危险因素方面的情况差异,均无统计学差异（P〉0.05）;对不同组别间IL-17及IFN-γ因子表达情况分析显示,急性冠脉综合征组患者与正常组相比IL-17表达明显降低[（22.19±5.02）pg/mL比（44.90±9.41）pg/mL],IFN-γ明显升高[（7.48±3.60）pg/mL比（5.30±0.71）pg/mL]而慢性冠脉病组与正常组相比IL-17和IFN-γ差异均无统计学意义（P〉0.05）;急性冠脉综合征患者血清中IL-17与IFN-γ因子相关性分析结果显示两者间具有负相关的趋势（r＝－0.69）。结论血清IL-17水平可随冠心病病情严重程度而降低,对评价不同类型动脉粥样硬化具有诊断价值。     

纤粘连蛋白诱导Hela细胞黏附及MMP-2基因表达

目的 观察纤粘连蛋白(fibronectin,FN)诱导的Hela细胞的黏附及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)基因的表达,探讨恶性肿瘤细胞侵袭、转移发生的机制。方法 无血清培养Hela细胞,以FN作为细胞外基质(extracellular matrix,ECM)成分,用MTT法检测Hela细胞的黏附率及光镜下计数Hela细胞的铺展率并观察Hela细胞形态的变化;用明胶酶谱法检测MMPs的活性。结果 无FN作用的Hela细胞不发生黏附及铺展,亦无明显MMPs基因表达;当纤粘连蛋白浓度为5—10μg/ml时,黏附率及铺展率最大;黏附的Hela细胞启动MMP-12基因的表达,纤粘连蛋白浓度为5～10μg/ml时,MMP-2活性最大。结论 FN可诱导Hela细胞黏附,进而引发一系列细胞内信号转导机制,启动MMP-2基因表达,促进肿瘤细胞的侵袭与转移。     

TIMP-1在肝纤维化形成过程中的作用

目的 研究TIMP-1在肝纤维化形成过程中的作用。方法 皮下注射CCl4建立小鼠肝纤维化模型;RTPCR扩增TIMP-1cDNA片段,定向克隆到转录载体pSPF18上,构建pSPF18／TIMP-1重组质粒,转化E-coli JM109,进行质粒提取、酶切鉴定、序列分析、体外转录合成探针、原位杂交。结果 成功建立小鼠肝纤维化模型;获得的TIMP-1目的基因片段大小为262bp,与预期结果相同;经酶切鉴定和序列分析证实成功构建了pSPT18/TIMP-1重组质粒;原位杂交结果显示,TIMP-1主要在激活的肝星型细胞、内皮细胞、间质细胞以及正常肝细胞中表达,且随着肝纤维化的逐步形成,TIMP-1的表达逐渐升高。结论 TIMP-1参与肝纤维化的形成过程,并与肝纤维化的程度成正相关。     

保健品不宜进药店

药店，顾名思义，就是卖药品的商店。但如今药店也开始了多种经营，不但卖起了保健品、器械，甚至标注为“食”字号的普通食品，在药店也可觅其芳踪，药店货架可谓琳琅满目。如果从药品销售利润不断下降的角度看，药店卖点相近产品似乎可以获得些许同情，但老百姓进药店绝大多数是“无病不登门”，在药店卖非药品，难免会给消费者误导。     

FAK反义寡聚脱氧核苷酸对FN诱导Hela细胞MMP-2表达的影响

目的：利用反义核酸技术探讨纤黏连蛋白(fibronectin，FN)诱导Hela细胞中基质金属蛋白酶(matrix nletalloproteinases，MMPs)基因表达的机制。方法：无血清培养Hela细胞。以不同浓度及作用时间的FN诱导Hela细胞中MMPs基因表达，并用反义寡聚脱氧核苷酸(oligodeoxynucleotides，ODN)封闭焦点黏着激酶(focal adhesion kinase.FAK)，用酶谱分析方法检测MMPs的活性。结果：FN浓度为0μg/mL时，Hela细胞无MMP-2基因表达；FN浓度为5μg/mL-10μg/mL、作用时间为12h，MMP-2活性最大；当在培养液反义ODN后，MMP-2活性明显降低。结论：MMP-2基因表达与FN的浓度以及作用时间有关；FN可通过其整合素受体的信号转导通路启动Hela细胞中MMP-2基因表达、降解ECM,从而促进肿瘤的浸润和转移。     

慢性应激大鼠抑郁模型的建立及其评价

目的探讨建立慢性应激抑郁大鼠模型的实验方法及模型的有效性。方法利用慢性轻度不可预见性应激(CUMS)制作抑郁模型,观察动物的体重和摄食量的变化,用敞箱试验及液体消耗实验测定动物行为。结果大鼠抑郁模型在第27天建立成功。抑郁组大鼠敞箱试验得分、液体消耗试验中糖水消耗和糖水偏爱百分比均明显下降。结论慢性轻度不可预见性应激可以成功建立大鼠抑郁模型。     

小干扰RNA抑制胃癌细胞株葡萄糖调节蛋白Grp78的表达

目的:观察Grp78靶向RNA干扰质粒载体对人类胃癌细胞株7901 Grp78基因表达的抑制作用.方法:设计1对Grp78基因发卡寡核苷酸,并与psiSTRIKETM质粒载体连接,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达载体,将重组质粒导入人类胃癌细胞株7901内,分别在转染前、转染后24,48和72 h通过RT-PCR、免疫荧光技术检测Grp78 mRNA及蛋白水平的表达情况.结果:成功构建RNA干扰质粒载体,靶向Grp78干扰质粒载体命名为p siSTRIKETM/Grp78.将上述质粒转染到人类胃癌细胞株后,观察到Grp78 mRNA及蛋白水平的表达明显下调,随着时间的延长Grp78在实验组中的表达逐渐降低,并随着时间推移稳定存在.阴性对照组,转染前组,转染12,48,72 h组Grp78的mRNA相对表达量分别为1.069,0.972,0.662,0.408,0.420.转染后组较转染前组及阴性对照组分别具有显著性差异(P＜0.01),转染前与阴性对照组无显著性差异(P＞0.05).转染前后组免疫荧光表达结果统计学差异明显(P＜0.001),其中转染后48 h同转染后24 h相比较Grp78蛋白表达明显减少(P＜0.00714).结论:构建的RNA干扰真核表达载体psiSTRIKETM/Grp78能明显抑制Grp78 mRNA及蛋白的表达.     

小干扰RNA对胃癌细胞葡萄糖调节蛋白94表达的抑制作用

目的构建Grp94靶向RNA干扰质粒载体，观察其对人类胃癌细胞株SGC-7901 Grp94基因表达的抑制作用。方法从GenBank中选取人类Grp94基因序列，采用siRNA Target Designer-Version 1．51设计软件设计1对Grp94基因发卡寡核苷酸，序列符合siRNA表达载体siSTRIKE^TM U6的要求并与psiSTRIKE^TM质粒载体连接，构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达载体。采用Lipofectamne^TM 2000转染试剂进行转染，将重组质粒导入人类胃癌细胞株SGC-7901内，分别在转染前、转染后24、48和72h通过逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）、Western blot及免疫荧光技术检测Grp94 mRNA及蛋白水平的表达情况。结果成功构建RNA干扰质粒载体，靶向Grp94干扰质粒载体命名为psiSTRIKE^TM／Grp94，将上述质粒转染到人类胃癌细胞株后，观察到psiSTRIKE^TM／Grp94能够明显下调Grp94 mRNA及蛋白水平的表达，并随着时间推移稳定存在。结论构建的RNA干扰真核表达载体psiSTRIKE^TM／Grp94能明显抑制Grp94 mRNA及蛋白的表达，提示通过降低胃癌细胞中Grp94的表达，可能抑制或辅助抑制胃癌细胞的生长的作用。