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目的研究BMP4因子在诱导型干细胞(iPS细胞)培养过程中的作用和起作用的相关通路。方法通过RT-PCR的方法从小鼠的胎盘组织中扩增BMP4成熟肽,并且在其N末端连接IgK分泌肽,此融合的片段克隆至pPYCAG载体上。重组质粒pPYCAG-IgK-BMP4转染至293T17细胞中并进行嘌呤霉素的筛选。通过细胞免疫荧光和Western blot方法鉴定出表达BMP4的阳性克隆。为进一步检测上清中BMP4的生物活性,iPS细胞培养于含BMP4因子的细胞培养上清和LIF因子中,连续培养3代,并进一步观察细胞表型、三胚层细胞的分化潜能和多潜能相关基因的表达水平。结果 Smad1被分泌至上清中的BMP4磷酸化。当培养基中含BMP4同时加入LIF因子后,可以有效抑制iPS细胞分化。在此种方法培养3代后,不仅iPS细胞的表型可以有效维持,iPS细胞中多潜能相关的基因表达水平也未受到影响,同时这些iPS细胞仍具有向三个胚层分化的能力。结论 BMP4可高效表达在真核细胞中,有效地使培养iPS细胞保持其多向分化潜能。 相似文献
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目的建立颈椎后纵韧带成纤维细胞的体外培养方法。方法采用组织块培养法培养小鼠颈椎后纵韧带细胞,行HE染色,光镜及电镜观察;采用免疫细胞化学法对其进行鉴定。结果倒置相差显微镜下观察细胞呈梭形,胞质近中央处有椭圆形胞核,细胞呈放射状、漩涡状等走行形式。HE染色见细胞为长梭形,胞核为淡蓝色,胞质为粉红色。透射电镜下见胞质内有较为丰富的粗面内质网和高尔基体,线粒体呈卵圆形,常染色质丰富,异染色质靠近核膜,有核仁。免疫细胞化学鉴定表达波形蛋白,角蛋白表达为阴性。结论在体外可成功培养出颈椎后纵韧带成纤维细胞,第3-5代体外培养细胞是细胞实验的最佳选择。 相似文献
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药物累积毒性是用药剂量过大或用药时间过长,在体内蓄积而逐渐发生的毒性反应,可损害肝、肾、神经、内分泌等器官功能,对患者的危害较大,影响治疗结局。肿瘤患者治疗疗程较长,多药序贯治疗易导致累积毒性反应。周围神经病变是其毒性反应的一种,发生后需停止相关药物,但周围神经病变仍可能继续恶化,这一过程被称为“滑行”现象。鉴于这一现象的危害性,应对药物所致周围神经病变进行关注。本文对乳腺癌术后(Ⅳ期)多周期化疗累积毒性致周围神经病变的病例进行分析总结,建议临床建立周围神经病变用药风险评估体系,采取防治措施。 相似文献
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中医药治疗椎动脉型颈椎病作用机理的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
中医药疗法是椎动脉型颈椎病非手术治疗的重要手段之一,应用广泛,疗效肯定。近年来,对其机理研究的开展,不仅丰富了人们对颈椎病的认识,同时。也促进了椎动脉型颈椎病中医药治疗的临床实践。下面仅就中医药治疗椎动脉型颈椎病作用机理的进展情况综述如下。 相似文献
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目的 探讨中药能量包在四肢骨折患者围手术期胃肠道管理中的应用效果。方法 选取2021年3月—2022年3月在厦门市中医院骨二科接受四肢骨折手术患者120例,采用随机数字表法分为观察组与对照组各60例,对照组术前予以常规禁食禁水,观察组在术前晚上22:00、次日术前6 h、术后6 h经少量饮水无不适后口服中药能量包各1次,比较2组术前0.5 h、术后2、6 h口渴、饥饿、恶心、呕吐发生率和术前24 h、术前0.5 h、术后6 h焦虑自评量表(SAS)评分以及出院时围手术期胃肠道管理满意率。结果 观察组术前0.5 h和术后2 h、6 h口渴、饥饿、恶心、呕吐发生率均低于对照组及术前24 h观察组(P<0.05);术前24 h 2组SAS评分比较差异无统计学意义(P>0.05),术前0.5 h和术后6 h观察组SAS评分显著低于对照组及术前24 h观察组(P<0.05);观察组围手术期胃肠道管理满意率为95.00%,明显高于对照组的35.00%(P<0.05)。结论 四肢骨折手术患者围手术期口服中药能量包,可显著改善患者因为较长时间的禁食禁饮出现的口渴、饥饿、恶心、呕... 相似文献
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目的观察动物口服活血定眩丸的急性毒性和长期毒性反应。方法以最大浓度、最大体积的活血定眩丸灌服小鼠,测定1日最大给药量。以高、中、低3个剂量的活血定眩丸灌服大鼠连续6周,观察大鼠的生长发育、血液学、血液生化学、脏器系数、组织病理学变化及停药后2周上述指标的变化。结果小鼠2次/d灌服活血定眩丸的最大给药〉148、8g生药/kg体重,此剂量相当于临床成人每日口服剂量0.2242g生药/kg体重的663倍。长期毒性实验显示,大鼠摄食量、活动、体重、血液学、生化指标检查、脏器重量系数、病理学检查均未见明显异常,与对照组相比均无明显差异。结论活血定眩丸的急性毒性和长期毒性实验均未见有明显毒性反应。 相似文献
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目的:观察益气化瘀方对腰神经根压迫损伤后L4神经根组织Bax和Bcl-2的表达影响。方法:雄性SD大鼠(SPF级)40只按随机数字表法分为假手术组、模型组、弥可保组和益气化瘀方组,每组各10只。采用自制胶块压迫于大鼠右侧L4神经根背根节处,假手术组仅切开皮肤和椎旁肌。造模后假手术组和模型组给予生理盐水灌胃;弥可保组采用肌肉注射弥可保注射液;益气化瘀方组给予益气化瘀方煎剂灌胃,于造模10d后取右侧受压神经根。采用免疫组织化学法检测背根节神经细胞Bax和Bcl-2的蛋白表达情况;实时荧光定量聚合酶链反应法检测神经根组织Bax和Bcl-2的基因表达变化。结果:腰神经根压迫后,模型组的Bax蛋白和基因表达明显增高,其中基因表达与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.01);而Bcl-2蛋白和基因表达明显减少,其中基因表达与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.01)。益气化瘀方可减少Bax的蛋白和基因表达,其中基因表达低于模型组(P<0.01)。另外益气化瘀方可增加Bcl-2的蛋白表达,但对Bcl-2基因表达无明显影响。结论:腰神经根压迫模型可导致受压神经根组织Bax的过表达增加和Bcl-2的表达抑制。益气化瘀方可抑制神经根组织Bax的过表达;可增加Bcl-2的蛋白表达,但对其基因表达无明显影响。 相似文献
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目的:观察益气化瘀方联合过表达Mash-1修饰的胚胎干细胞对小鼠脊髓损伤的修复作用。方法:采用钳夹法建立小鼠急性脊髓损伤模型,于造模后第3天将Mash-1修饰的胚胎干细胞移植到脊髓损伤部位,并给予益气化瘀方干预。通过观察小鼠的后肢功能评分、脊髓的剩余面积以及神经营养因子、炎症因子和凋亡相关基因的表达改变;并采用免疫荧光检测OCT3/4、nestin、β-tubulin Ⅲ、GFAP的阳性细胞数目,分析移植细胞在体内的存活和分化情况。结果:与模型组比较,益气化瘀方可减少炎症因子TNF-α和凋亡基因caspase-3的表达,轻微提高小鼠运动功能。与单纯干细胞移植组比较,益气化瘀方联合Mash-1修饰胚胎干细胞移植能减少炎症因子TNF-α的基因表达水平,提高移植细胞的存活数量,进而改善小鼠的后肢运动评分。结论:益气化瘀方能减轻脊髓损伤的炎症反应,增加移植细胞在脊髓损伤部位的存活数量,促进脊髓损伤的修复。 相似文献