病毒性心肌炎的发病机制

心肌炎是一种由多种致病因素所引起的复杂疾病。急性或慢性感染性心肌炎是由病毒、细菌、支原体或真菌所引起的心肌炎症。其中，病毒性心肌炎最为常见。肠道病毒和腺病毒所引起的心肌炎约占临床病例的20％-50％。因此，本文对病毒性心肌炎的发病机制进行了总结。病毒性心肌炎造成的心脏损伤主要有三种发病机制：（1）病毒的感染和复制直接导致的心肌损伤；（2）免疫反应；（3）生化机制。     

肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)在心脏发育中的作用

肝素结合性表皮生长因子（hepafin-binding epidermal growth factor-like growth factor，HB-EGF），是表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）家族的成员。在体内，首先合成为Ⅰ型的跨膜蛋白前体（proHB-EGF），其结构包括信号肽，肝素结合区，表皮生长因子样结构域，近膜区，跨膜区和细胞质区，然后通过特定的金属蛋白酶水解近膜区，释放出可溶性的HB-EGF，与表皮生长因子受体结合。     

Rho激酶抑制剂的高通量筛选模型建立与应用

 目的 建立重组人Rho激酶（Rho-associated coiled-coil forming protein kinase, ROCK）的表达、纯化方法,并建立基于荧光素酶发光法的ROCK抑制剂的高通量筛选（high throughput screening, HTS）模型,通过大规模筛选发现其选择性抑制剂,为心脑血管、神经系统等疾病的预防和治疗提供新的治疗策略。方法 用分子生物学的技术,构建ROCK-Ⅰ/pET32a表达质粒,转化入大肠杆菌BL21中,筛选阳性克隆,诱导目的蛋白表达。纯化可溶性蛋白后,用Kinase-Glo Luminescent Kinase Assay进行活性鉴定,用Z’因子评价HTS方法的稳定性,并对3万个化合物和中药提取物进行了HTS。结果 重组人ROCK-Ⅰ蛋白显示较好的激酶活性,建立的HTS模型Z’因子为0.75,基于此模型筛选出4个活性化合物和5个活性提取物。结论 本实验建立了一个简单而快速的人重组ROCK-Ⅰ表达系统,该系统具有低成本、稳定、表达量大等特点。ROCK-Ⅰ的化学发光检测方法适用于HTS技术,具有较高的稳定性、灵敏性和可重复性。     

ErbBs受体在心脏发育和心肌病中的作用

ErbBs（ErbB1—4）属于酪氨酸激酶受体，可以传递表皮生长因子家族的信号。目前已知有4种亚型：ErbB1、ErbB2／HER2／neu、ErbB3及ErbB4。ErbBs信号系统在胚胎期心脏的发育过程中和维持成体心脏的功能方面都具有重要的作用。选择性ErbB2剔除的小鼠为研究ErbB2受体特异的抑制剂Trastuzumab所引起的扩张性心肌病和心力衰竭提供了动物模型，并揭示了ErbB2是ErbB3和ErbB4重要的辅助受体。在胚胎发育和成体心脏中ErbB2／4异源二聚体可以转导神经调节素信号，启动细胞内许多不同的信号传导途径，诸如ras／有丝分裂原激活的蛋白激酶、磷脂酰肌醇-3激酶／抗凋亡激酶、钙调蛋白依赖的激酶、p21激活的激酶-1及磷脂酶C途径，影响心脏的功能。     

肝素结合性表皮生长因子转基因小鼠的建立和功能研究

目的建立肝素结合性表皮生长因子（HB．EGF）的转基因动物模型，利用转基因动物模型研究HBEGF在心脏功能中的作用。方法构建α-MHC-HB-EGF表达载体，将目的片段注射到受精卵的雄原核中，使其发育成携带有HB．EGF的转基因小鼠。通过PCR的方法鉴定转基因的首建鼠。采用Western blotting方法鉴定HB．EGF在心脏中的表达，取HB-EGF在心脏中特异性高表达的阳性转基因小鼠的F1代与同窝阴性对照小鼠的心脏做BrdU免疫组化和Masson染色。结果得到了两只HB．EGF阳性的首建鼠，Western blotting发现16号小鼠中HB．EGF在心脏中的表达与同窝阴性对照小鼠相比蛋白表达明显增加。转基因小鼠心脏BrdU标记的阳性细胞数明显多于阴性对照组的阳性细胞数，Masson染色胶原纤维明显少于同窝阴性对照的小鼠。结论HB-EGF的高表达可以促进心肌细胞的增殖，减少胶原纤维生成，抑制心肌的纤维化。