运用蛋白质组学技术研究EB病毒诱导鼻咽癌细胞CNE2表达变化的蛋白质

【目的】寻找并鉴定CNE2细胞在EB病毒感染后表达发生变化的功能蛋白质，为阐明该病毒诱导鼻咽上皮细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。【方法】分别从EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞中抽提总蛋白质，通过双向电泳分离。运用软件比较分析上述两组的蛋白质表达图谱，寻找表达有差异的蛋白质点。从凝胶上切下差异蛋白质点，通过基质辅助激光解吸，离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定。【结果】图像分析显示，EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞之间存在一些明显差异的蛋白质点。通过MALDI-TOF-MS成功地鉴定了其中4个蛋白质点，EB病毒感染CNE2细胞后蛋白质GRP78和硫氧还蛋白过氧化物酶1表达上调，蛋白质肌动蛋白胞浆组分2和蛋白酶体。链表达下调。【结论】EB病毒感染鼻咽上皮细胞后引起生物学变化的分子机制可能包括：①诱导细胞大量合成蛋白质以促进增生．同时上调蛋白质GRP78的表达而抗凋亡；②提高细胞内氧化状态而诱导蛋白质硫氧还蛋白过氧化物酶1的表达，并可能通过该蛋白质调控NF-κB和AP-1来影响细胞生长。     

粉尘螨主要变应原Derf1基因的改造与可溶性表达

目的在大肠杆菌中提高粉尘螨1类变应原（Derf1）的可溶性表达。方法用RT-PCR方法扩增得到Derf1的全长序列与成熟肽序列（mDerf1）；以已知DerP5基因的前导序列替换Derf1前导序列和原酶序列，重新构建出rDerf1基因；将上述3个基因分别克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中表达，经Western-blot对三者的表达产物进行分析鉴定。结果Western-blot表明，pGEX-Derf1与pGEX-mDerf1的表达产物分别为分子量约63000与51000的重组蛋白质，重组蛋白质主要存在于细胞裂解液的沉淀中。pGEX-rDerf1大量表达了可溶性目的蛋白质，分子量约53000，并被成功地分离纯化。以上三种表达产物均可被鼠抗GST抗体与螨过敏患者血清特异地识别。结论表达了含Derf1，mDerf1与rDerf1的三种GST融合蛋白质，它们均具免疫反应性，纯化获得了GST-rDerf1融合蛋白质，为后期的诊断及治疗奠定了基础。     

脑宁治疗中风的作用机制实验研究

脑血肿模型比较接近临床脑出血的病理特征，以干湿重法检测脑组织水份，能直接反映脑水肿存在与否和程度，并可同时检测脑组织中Na 、K 、Ca 、Mg 含量。脑水肿时伴有电解质紊乱。脑血肿时，BBB通透性增高，有EB透过BBB入脑。脑宁的应用较好地促进了血肿的吸收，增强了胶质细胞的吞噬消化作用，降低脑水肿及BBB通透发性，对脑水肿有较好的防治作用。     

阿司匹林联合辛伐他汀防治缺血性脑血管病临床研究

目的：探讨缺血性脑血管病应用阿司匹林联合辛伐他汀治疗的效果,以丰富临床治疗经验。方法：选择2012年6月～2013年6月在我院接收并确诊的缺血性脑血管病患者100例,根据入院治疗顺序随机分为对照组与观察组各50例,对照组通过给予阿司匹林进行治疗,观察组则通过给予阿司匹林以及辛伐他汀同时治疗,治疗后8周,统计两组患者的治疗总有效率,将结果进行对比。一年以后对所有患者进行随访,了解患者的长期病情。结果：治疗后,患者的临床症状均有明显的改善与缓解,观察组治疗的总有效率为84.00%,优于对照组的68.00%,差异显著（P<0.05）;在治疗一年后,对患者进行随访,观察组心肌梗死、短暂性脑缺血发作以及再发性脑梗死等疾病的发生率为16.00%,远远低于对照组的36.00%,差异显著（P<0.05）。结论：缺血性脑血管病应用阿司匹林联合辛伐他汀治疗,具有疗效确切、安全可靠等优点,值得临床推广。     

广西二孩父母对预防接种知识和服务需求的调查分析

目的了解广西二孩父母对预防接种认知、态度和行为,以及对预防接种的需求,为提高免疫规划工作质量提供依据。方法采用随机抽样方法,在广西壮族自治区115个县区抽取3891名二孩父母使用统一设计的问卷进行调查。结果二孩父母中98.46%知道小孩需要接种疫苗,98.74%知道国家免疫规划疫苗是免费接种,94.50%知道接种疫苗可以预防乙型病毒性肝炎,94.60%知道孩子上学时需要查验预防接种证,99.51%认为孩子接种疫苗是必要的,90.44%会主动了解孩子预防接种完成情况,78.46%会主动按照预防接种证预约日期带儿童进行接种,97.02%在参与预防接种过程中最关注的是疫苗安全,75.10%希望在预防接种过程中减少排队时间。结论广西二孩父母对预防接种认知、态度和行为有较好的水平,但仍应根据不同儿童父母对预防接种知识的知晓情况,开展有针对性的预防接种宣传教育,提高健康教育工作效果;各地要提高预防接种服务质量,为群众提供满意的预防接种服务。     

乙型肝炎病毒核酸定量检测中不确定度的研究

目的研究应用实时荧光定量PCR（Fluorescence Quantitative PCR,FQ-PCR）开展乙型肝炎病毒（Hepatitis Bvirus,HBV）核酸定量检测中的测量不确定度。方法通过实时荧光定量PCR进行乙型肝炎病毒核酸定量检测的实验分组设计与数据处理分析,计算分析该检测方法不同来源的测量不确定度值。结果对3组不同水平浓度值样本来源的数据采用两种方法进行统计分析,QDNA的组标准差远远大于LGQDNA的标准差,初始浓度数值经过对数转化后离散程度降低,统计平均值也发生了偏离。LGQDNA为3.465、4.927和6.018的样本,其浓缩过程来源的相对不确定度分别为0.020、0.019和0.009;LGQ无偏估计在3.706、6.750的样本的核酸提取来源相对不确定度分别为0.016和0.009;数据分析来源的LGQ不确定度为0.000～0.008;热循环仪来源的LGQ不确定度为0.002～0.008。结论使用核酸浓度值QDNA与使用其对数值LGQDNA进行数据统计分析的结果存在差异;标本制备过程中的浓缩和DNA提取是实时荧光定量PCR进行HBV核酸定量检测时测量不确定度的重要来源,标本制备环节是影响该项检测的关键因素,包括试剂、方法和操作者的准确操作能力。     

带锁髓内钉在下肢骨干多段骨折的应用

目的：探讨带锁髓内钉在下肢骨干多节段骨折应用的临床疗效及有关问题。方法：回顾性分析31例股骨、胫骨干多节段骨折应用带锁髓内钉的临床资料，有关适应证、切开复位、扩髓及动力和静力固定问题进行讨论。结果：31例中除2例失访，29例随访8～31个月，平均随访12．5个月，关节功能恢复优良率93．1％，骨折愈合率98．3％。结论：只有掌握好操作技术，带锁髓内钉是目前治疗下肢骨干多节段骨折的一种良好内固定方法，值得推广应用。     

神农消颗粒对荷瘤小鼠抑瘤作用的实验研究

神农消颗粒由湖北省黄冈市安康医院研制(专利号:ZL200410013488.8),临床应用于肝癌、肺癌等恶性肿瘤的治疗,取得了较好的疗效.笔者应用S180实体瘤和H22腹水瘤小鼠模型,观察了神农消颗粒的抑瘤效果.现报道如下.     

铝碳酸镁、莫沙必利联合治疗胆囊切除术后胆汁反流性胃炎的临床观察

目的:观察铝碳酸镁、莫沙必利联合治疗胆囊切除术后胆汁反流性胃炎的临床疗效。方法:69例均服用铝碳酸镁,每日3次,每次1.0 g,餐后l h嚼服,同时服用莫沙必利,每日3次,每次5 mg,餐前半小时服用,疗程4周。根据症状严重程度及发作频率的评分和复查胃镜所见胃黏膜炎症的转归及胆汁反流程度的胃镜分级作为临床观察和疗效评定的指标。结果:69例中显效42例(60.9%);有效24例(35.07%);无效3例(4.03%),总有效率95.97%。结论:铝碳酸镁与莫沙必利联合胆囊切除术后的胆汁反流性胃炎,既能有效的改善胃肠的动力功能,恢复胃-幽门-十二指肠协调运动功能,防止十二指肠胃反流,又能有效中和胆汁酸、保护胃黏膜,阻断胃腔内各种攻击因子的侵袭,应该成为胆囊切除术后胆汁反流性胃炎的首选治疗方案。