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目的 检测糖酵解相关基因缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、转录因子叉头框蛋白(FOX)O4(FOXO4)、乳酸脱氢酶A(LDHA)在胃癌组织中的表达情况,并探讨其与胃癌临床病理特征及预后的关系。方法 UALCAN、LinkedOmics数据库分析HIF-1α、FOXO4、LDHA在胃癌组织与正常组织中的表达及与表达相关的基因。免疫组化方法检测70例胃癌组织、癌旁组织及30例正常胃组织中HIF-1α、FOXO4、LDHA的表达,分析其与胃癌患者临床病理特征及预后的关系。Spearman相关性检验分析HIF-1α、FOXO4、LDHA表达的相关性,并用Starbase数据库验证三者间的关系。Kaplan-Meier Plotter数据库分析HIF-1α、FOXO4、LDHA表达对患者生存预后的影响。选择与HIF-1α、FOXO4、LDHA表达相关的前50个基因与GeneCards中获得的胃癌相关基因取交集,并进行KEGG分析。结果 生物信息学分析显示,胃癌组织中HIF-1α、LDHA高表达而FOXO4低表达,且三者可以共表达。免疫组化结果显示,胃癌组织中HIF-1α、LDHA高表达而FOX...  相似文献   
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目的 基于胃类器官损伤模型探究南蛇藤提取物(COE)调控富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5 (Lgr5)/配体分泌介质(Wnt)/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路影响胃类器官增殖分化及Lgr5表达从而逆转胃癌前病变(PLGC)的作用机制。方法 通过小鼠胃腺体干细胞建立胃类器官,使用N-甲基-N''-硝基-N-亚硝基胍(MNNG,0.02 mg·L-1)处理胃类器官构建胃类器官损伤模型;将胃类器官损伤模型随机分为正常组、模型组(0.02 mg·L-1 MNNG)、COE低、中、高质量浓度组(5、10、20 mg·L-1)、Wnt抑制剂Dickkopf相关蛋白1(DKK1)(0.5 mg·L-1)组并分别用不同药物处理24 h;镜下观察不同药物浓度胃类器官的数量与体积;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测胃类器官损伤模型活力;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察胃类器官形态与病理学;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同药物浓度胃类器官中Lgr5、黏蛋白2 (MUC2)、黏蛋白5AC (MUC5AC)、黏蛋白6 (MUC6)、Wnt和β-catenin表达情况。结果 与正常组比较,模型组胃类器官数量显著减少(P<0.01),体积显著减小(P<0.01),活力显著降低(P<0.01),Lgr5、MUC2、Wnt与β-catenin表达显著升高(P<0.01),MUC5AC、MUC6表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,COE低、中、高质量浓度组胃类器官数量及体积均显著升高(P<0.01);胃类器官活力显著增强(P<0.01),且在COE质量浓度为20 mg·L-1时效果最显著(P<0.01);COE中、高质量浓度组Lgr5、MUC2表达显著降低(P<0.01),COE低、中、高质量浓度组MUC5AC、MUC6的表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,Wnt抑制剂能够明显促进胃类器官MUC5AC、MUC6的表达(P<0.05,P<0.01),显著降低MUC2、Wnt与β-catenin的表达(P<0.01),COE高质量浓度与Wnt抑制剂共同使用能够促进这一趋势(P<0.01)。结论 COE通过抑制Lgr5、MUC2、Wnt、β-catenin的表达和促进MUC5AC及MUC6的表达,抑制Wnt/β-catenin通路,促进胃类器官增殖分化,逆转PLGC过程。  相似文献   
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目的 探讨南蛇藤提取物(COE)对小鼠胃类器官生长及其胃上皮细胞E-cadherin表达的影响。方法 将8周龄C57小鼠胃幽门部分离并培养成胃类器官。光镜下观察胃类器官形成的动态变化,HE染色观察胃上皮细胞间结构,免疫荧光染色观察胃上皮细胞的上皮钙黏蛋白E-cadherin表达。类器官传代到第3代后,用不同浓度的COE(0、5、10、20μg/ml)处理,收集类器官,计算其数量,测量其直径,噻唑蓝(MTT)比色法测其细胞活性,并用Western blot法检测COE处理后类器官中的E-cadherin表达。结果 24~48 h形成囊样结构并出现中心结构为囊腺样的三维细胞团,72 h后逐渐出芽并形成胃类器官,提示类器官成功构建。类器官中的上皮细胞标志物E-cadherin表达,进一步证实类器官的形成。与对照组比较,COE组胃类器官数量与直径均增加、细胞活性增强(P<0.05),且E-cadherin的表达随着COE的剂量增加而逐渐增加(P<0.01)。结论 小剂量的COE可促进E-cadherin的表达与类器官的生长形成,可能会影响胃黏膜损伤的修复。  相似文献   
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