运动性肥大心肌活细胞胞浆游离Ca2+动态变化的激光共聚焦研究以及局部IGF-Ⅰ和AngⅡ的变化

目的:研究运动与心脏重塑过程中心肌胞浆游离Ca2 ([Ca2 ]c)动态变化的生物学机制.方法:采用激光扫描共聚焦显微技术(LSCM)对STDIn Ca2 荧光试剂负载的运动肥大心肌活细胞[Ca2 ]c动态变化进行研究,采用放射免疫测定运动小鼠心肌局部IGF-Ⅰ和AngⅡ含量.结果:运动肥大心肌[Ca2 ]c变化表现为基值稳态和峰值显著升高,达峰时间延长(P＜0.001).心肌局部IGF-Ⅰ和AngⅡ显著升高(P＜0.001).结论:运动性心肌肥大与[Ca2 ]c变化、机械信号、IGF-Ⅰ和AngⅡ关系密切,机械信号、IGF-Ⅰ和AngⅡ可能是引起[Ca2 ]c显著升高,增强心肌收缩能力的胞外刺激因素.     

响应曲面法优选金银花中绿原酸微波辅助提取工艺

目的:优选金银花中绿原酸微波辅助提取工艺,并对提取物的抗氧化能力进行分析。方法:以甲醇浓度、料液比、提取时间为考察因素,以提取液在327nm波长的吸光度和二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)清除率为响应值,采用响应曲面法优选工艺;通过比较提取液对DPPH·的清除能力分析提取物的抗氧化能力。结果:最佳提取工艺为以43%的甲醇溶液作提取剂、按液料比40mL·g-1、在微波功率400W下提取8min,绿原酸提取率为7.62%;金银花提取物对DPPH·的清除能力与绿原酸含量呈正相关。结论:优化的工艺稳定、合理、可行,提取率高、提取时间短;绿原酸在金银花提取物的抗氧化能力中起主要作用。     

川芎中多糖的研究

目的研究川芎L igusticum chuanx iong干燥根茎中的多糖组分。方法采用DEAE-纤维素柱色谱和凝胶渗透色谱分离纯化,化学和光谱方法分析其结构特征。结果从川芎水提物中分级得到4个均一多糖组分LCP-1、LCP-2、LCP-3和LCP-4,其相对分子质量分别为3.1×104、5.2×104、9.0×104、3.6×104,四者均为结构复杂的多糖组分。结论首次从川芎中分离得到LCP-1、LCP-2、LCP-3和LCP-4 4种杂多糖。     

小鼠运动性疲劳相关基因筛选的初步研究

目的：运用基因芯片技术筛选运动性疲劳的相关基因。方法：将小鼠２３０４点阵的基因芯片中的２２０１条待研究基因，与对照组和疲劳组小鼠脑组织中抽提的ｍＲＮＡ并被Ｃｙ３和Ｃｙ５逆转录荧光标记制成的ｃＤＮＡ混合探针杂交，通过芯片扫描仪对其荧光强度进行扫描，经计算机进行分析。结果：在待研究的２２０１条基因中，与中枢疲劳相关的１１７条基因具有显著性表达差异，其中上调表达的基因有６３条，下调表达的基因有５４条。结论：应用基因芯片技术可同时检测与运动性中枢疲劳相关的多个基因的差异表达，具有高通量、并行性和快速准确等优点。     

同时测定乌梅中8种有机酸含量

目的：建立RP-HPLC同时测定乌梅中8种有机酸成分：草酸、酒石酸、苹果酸、抗坏血酸、乳酸、醋酸、柠檬酸和琥珀酸。方法：在C₁₈柱上,用（NH₄）H₂PO₄-H₃PO₄水溶液(pH 2.8)作流动相,紫外检测器检测（214 nm）,流动相流速为0.5 mL·min^-1。结果：分别建立了8种有机酸成分的回归方程。草酸、酒石酸、苹果酸、抗坏血酸、乳酸、醋酸、柠檬酸和琥珀酸的含量分别为1.29%,0.36%,1.82%,1.82%,2.09%,1.65%,16.0%,3.09%。结论：该方法操作简便,准确,快速,一次测定不超过10 min；不但可以作为中药乌梅有机酸成分的质量分析,也可用作为其他植物中有机酸的定量分析。     

川芎中多糖的研究

目的研究川芎L igusticum chuanx iong干燥根茎中的多糖组分。方法采用DEAE-纤维素柱色谱和凝胶渗透色谱分离纯化,化学和光谱方法分析其结构特征。结果从川芎水提物中分级得到4个均一多糖组分LCP-1、LCP-2、LCP-3和LCP-4,其相对分子质量分别为3.1×104、5.2×104、9.0×104、3.6×104,四者均为结构复杂的多糖组分。结论首次从川芎中分离得到LCP-1、LCP-2、LCP-3和LCP-4 4种杂多糖。     

超声提取延胡索总生物碱的研究

目的考察超声对延胡索的干燥粉末中总生物碱提取的影响,探讨、改进延胡索总碱的提取工艺。方法以活性成分延胡索乙素、原阿片碱二者的含量为指标,采用单因素轮换试验法,考察超声时间、温度、功率以及提取溶媒的酸度、用量、体积分数等因素对提取的影响。结果实验确定延胡索总生物碱提取条件为超声时间60min,提取温度40℃,超声功率350W,提取溶媒用量30倍,乙醇体积分数70%,醋酸调pH3.5。结论此提取方法的提取率高,温度低,时间短,提取工艺简便,在工业化生产中可以降低能耗,提高经济效益。     

猫爪草中脂肪酸成分的GC—MS分析

目的:采用 GC-MS 法对猫爪草中的脂肪酸进行分析。方法:使用 RTX-5MS(30 m×0.25 mm,0.25 μm)弹性石英毛细管色谱柱,采用程序升温,进样口温度为280℃,分流比为20:1,流速为1.1 mL·min~(-1),分析时间共20 min,对猫爪草提取物的甲酯化样品进行 GC-MS 分析,质谱图用 NIST 谱库检索,鉴定各种脂肪酸,并用色谱峰面积归一化方法测定其相对含量。结果:鉴定出18种脂肪酸,主要成分亚油酸、软脂酸、油酸、亚麻酸和硬脂酸的相对百分含量分别为48.11%,21.37%,13.75%,8.86%,1.75%。结论:本法简便、快速,灵敏度高。     

不同产地延胡索药材RP—HPLC指纹图谱及质量研究

目的：建立延胡索药材的RP—HPLC指纹图谱，研究不同产地延胡索药材的质量差异，为延胡索药材制定质量标准提供参考。方法：应用Phenomenex LunaC18（250mm×4．6mm，5μm）色谱柱，柱温30℃，以甲醇一磷酸盐缓冲溶液为流动相梯度洗脱，流速1．0mL·min^-1，检测波长289nm；采用“中药色谱指纹图谱相似度评价2004A版”软件比较不同产地炮制与未炮制延胡索药材指纹图谱的相似度，利用对照药材指纹图谱对21批样品进行聚类分析。结果：不同产地炮制和未炮制延胡索药材指纹图谱稍有不同，分别建立共有模式，相似度较好；聚类分析结果表明个别药材质量较差。结论：炮制与否对延胡索药材的化学组成有所影响，但各地延胡索药材质量差异不大，采用RP—HPLC方法分别建立炮制和未炮制延胡索药材的指纹图谱，方法重现性好，可用于延胡索的质量评价和品种鉴别。     

铁牛七生物碱提取工艺研究

目的:优选铁牛七中生物碱的提取工艺。方法:采用L16(45)正交设计并结合单因素轮换法,以酸性染料比色法测定总生物碱含量,以高效液相色谱法测定乌头碱含量,对铁牛七中生物碱的提取条件进行优化。结果:总碱和乌头碱具有不同的最佳提取条件。采用6倍量酸性乙醇溶液(无水乙醇∶pH 3.0 HAc=85∶15,v/v)回流提取1 h时总生物碱提取量最高,3次提取基本可将其完全提出,测得总生物碱含量为0.980%;采用4倍量酸性乙醇溶液(无水乙醇∶pH 3.0 HAc=15∶85,v/v)回流提取0.5 h时乌头碱提取量最高,3次提取基本可将其完全提出,测得乌头碱含量为0.109%。结论:实验证明该提取工艺科学、合理。