间质干细胞与脑缺血损伤

间质干细胞 (MSCs)是指存在于骨髓间质中具有自我复制能力 ,并在特定条件下分化为中胚层起源组织的非造血组织干细胞。MSCs具有多向分化潜能和强大的增殖能力 ,由于易从骨髓中分离及体外扩增纯化 ,在组织工程领域倍受关注。由于近二年来发现了MSCs可以横向分化 (Transdifferentiation)为外胚层起源的神经细胞 ,使其在神经系统疾病的应用更加广泛 ,尤其在脑血管病方面 ,本文就MSCs对脑缺血损伤治疗的研究与进展综述如下。1　MSCs的生物学特性Friedenstein等在 1970年左右首次报道了骨髓标本中小部分贴附细胞在培养过程中能够分化形成…     

脾虚是痹证的发病之本

脾虚是痹证的发病之本张化彪（河南省济源市卫生学校，４５４６５０）主题词痹证／中医病机，脾虚痹证是人体正气不足，风寒湿热等外邪侵袭，以致肢仲关节，肌肉疼痛，重着，麻木，肿胀，屈伸不利，甚则关节变形，僵硬或累及脏腑为特征的一类病证。是常见病、多发病，其中...     

细胞移植对脑出血脑损伤的保护作用

目前用于脑出血治疗研究的主要细胞有：神经干细胞、遗传工程神经干细胞、骨髓间质干细胞、脐血细胞、胚胎干细胞、重组细胞、微囊化人工细胞等，本文就前5种细胞移植在出血性脑损伤中的保护作用进行综述。干细胞移植在脑出血性动物身上的实验所取得的良好效果，显示细胞移植重建损伤的脑组织、改善脑功能成为治疗脑出血疾病的必然途径。临床实验也取得了一定效果，但要真正应用于临床目前还有许多问题要解决：要想准确的定向诱导细胞分化，需要更深入的研究局部微环境，细胞因子及基因对干细胞分化的作用；细胞移植促进脑出血功能的恢复，其确切的机制还需要进一步研究 ；诱导分化的神经干细胞是否能象正常神经细胞一样能分泌神经递质，是否具有复杂的电生理等。     

大量活性神经元细胞核的分离技术

背景：细胞分化、细胞融合乃至克隆均需要应用分离细胞核的方法以获得大量有活性的细胞核，但是目前很难在数量和质量上同时达到较高的水准。 目的：探索简单易行的分离细胞核的方法，为神经元细胞核移植、细胞拆合以及细胞核成分的研究提供大量完好有活性的细胞核。 设计、时间及地点：对比实验，于2006-09／2007-01在南京医科大学基础医学院卫生部抗体技术重点实验室完成。 材料：Cytochalasin B为Sigma公司提供，清洁级SD孕大鼠来源于南京医科大学动物实验中心。 方法：取胎鼠大脑皮质，进行神经元的培养并鉴定。用Cytochalasin B结合梯度离心法及细胞核分离液法两种方法进行细胞核分离的对比观察。 主要观察指标：用碘化丙啶标记后进行流式细胞仪检测凋亡率并用免疫荧光染色对细胞核进行形态学观察。 结果：两种方法均成功地分离出大量有活性神经元细胞核，且梯度离心法可以得到较为完整的胞质体，与完整细胞细胞核荧光强度比较无显著性差异（P〉0．05）。 结论：Cytochalasin B结合梯度离心法及细胞核分离液法均能够有效地进行神经元细胞核的分离，且细胞核在短期内有较高的活性。     

饥饿状态引起大鼠海马细胞DNA损伤

目的研究饥饿状态对海马细胞DNA的损伤。方法分别运用单细胞电泳(彗星实验)和缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞核DNA单链及双链损伤,半胱天冬酶3(caspase3)活性片段免疫组化检测海马细胞caspase-3激活;结合神经元尼(氏)体染色和苏木素伊红(HE)染色了解海马神经元形态和数目变化。结果经受饥饿状态1周的动物可见海马细胞DNA单链损伤,海马各区caspase-3活性片段免疫反应阴性,但TUNEL法检测到一种具非典型凋亡特征的阳性显色;经受饥饿状态2个月的动物,DNA单链损伤持续存在,海马CA1区caspase-3活性片段免疫组化见广泛细胞浆阳性表达,海马其他区域仅有零星阳性细胞,但TUNEL检测无阳性细胞。神经元尼(氏)体染色示,饥饿状态1周和2个月海马神经元部分尼(氏)体溶解消失。HE染色示,经受饥饿状态1周和2个月的动物,海马CA1区锥体层细胞数减少(P<0.05)。结论饥饿状态可造成大白鼠海马细胞染色体DNA损伤及部分细胞死亡。     

脑出血模型

自体血注入法和胶原酶诱导法脑出血模型的血肿大小一致且重复性好，适合研究脑出血时程的病理生理变化，且与人类脑出血的特点相似，目前应用较多；微球囊充胀法脑出血模型适合研究脑出血后占位效应和血肿清除的病理生理过程，颅内压变化和脑血改变等；自发性脑出血模型可产生与人类高血压动脉硬化相同的病理改变，但由于模型不确定，重复性差且无可比性，应用较少。     

脑缺血后细胞移植的抗凋亡机制

在治疗缺血性脑损伤的过程中,细胞移植的抗凋亡机制已引起广泛关注.移植细胞通过分泌生长因子和营养因子、直接结合、促进血管发生及抗炎等发挥抗凋亡效应.     

线粒体释放的凋亡因子与缺血性神经元凋亡

凋亡是细胞接受各种凋亡信号，在基因调控下发生的主动死亡过程。线粒体在脑缺血神经元凋亡的发生过程中起着关键作用。文章就线粒体释放的凋亡相关因子及其在缺血神经元凋亡通路中的作用机制作了综述。     

大鼠脑出血后细胞色素c表达和神经细胞凋亡的关系及牛磺酸熊去氧胆酸的干预作用

目的研究大鼠脑出血(ICH)后细胞色素c(cytc)表达和神经细胞凋亡的关系,探讨牛磺酸熊去氧胆酸(Tudca)的干预作用及其机制。方法用VII型胶原酶注入到大鼠右侧苍白球诱导ICH模型。用凋亡原位末端标记技术(TUNEL)和免疫组化方法检测血肿周围神经细胞凋亡和cytc表达的动态变化。透射电镜观察术后3d血肿周围神经元超微结构的变化。结果:ICH后6h cytc表达开始增加,1d达高峰,此后逐渐减少,7d时回落至假手术组水平。ICH后6h血肿周边组织可见TUNEL阳性细胞,3d达高峰,然后逐渐减少,7d、10d时仍见较多凋亡细胞。ICH后7d内cytc表达和神经细胞凋亡呈正相关(r=0.6357,P<0.01)。Tudca治疗组cytc和TUNEL阳性细胞数较模型组明显减少(P<0.05~0.01),神经元超微结构改变亦比模型组减轻。结论ICH后血肿周围神经细胞损伤有凋亡机制参与,cytc释放是神经细胞凋亡的一个关键事件,Tudca可以有效减轻脑出血后的细胞凋亡,其机制之一是抑制凋亡通路cytc的释放。     

脑溢安对脑出血大鼠脑内bFGF表达的影响

目的：探讨国家三类新药－脑溢安颗粒（NYA）对脑出血大鼠脑出碱性成纤维因子（bFGF）蛋白和mRNA表达的影响，从而为治疗脑出血，促进 神经功能的修复提供理论依据。方法：用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血模型，并进行行为学计分，免疫组化、Northern blot4及吸光度扫描。结果：模型组的行为学计分在术后24h时开始降低，7d时逐渐减弱，脑溢安组在各个时间的表达均强于模型组，结论：脑溢安治疗脑出血有增强bFGF的表达，从而使行为学得到改善，这可能是脑溢安促进神经功能修复的主要机制之一。