HGF慢病毒载体的构建及其转染脂肪来源间充质干细胞的实验研究

目的:本研究旨在构建携带人肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因的慢病毒载体,探索HG F慢病毒转染脂肪间充质干细胞(adipose derived mesenchymal stem cells,ADSC)的方法。方法:应用PCR法从带有HGF基因的质粒上钓取目的基因,克隆到GV287载体中。将重组GV287-HGF载体质粒和慢病毒包装质粒共转染293T细胞,测定病毒滴度,并转染ADSC。结果:HGF基因PCR产物电泳结果与预期大小一致,重组GV287-HGF质粒PCR产物电泳结果正确,酶切后产物测序分析所得结果与目的基因序列一致,含有HGF基因的重组慢病毒构建正确。通过ELISA法测得病毒滴度为5×108TU/ml。HG F重组慢病毒转染ADSC的最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)值为50。结论:本研究构建表达人HGF的慢病毒载体并成功转染ADSC,为进一步研究过表达HGF的ADSC,治疗放射引起的骨髓及重要脏器损伤奠定基础。     

溃结灌肠液Ⅱ改善溃疡性结肠炎菌群结构和炎症机制的网络药理学筛查及实验验证

目的：借助网络药理学筛查溃结灌肠液Ⅱ改善溃疡性结肠炎（UC）菌群结构及炎症的主要成分和靶点,并通过动物实验探究溃结灌肠液Ⅱ对葡聚糖硫酸钠盐（DSS）造模小鼠肠道菌群结构和炎症因子的调节作用,从菌群平衡角度阐明其治疗UC的机制及现代生物学内涵。方法：通过TCMSP数据库和相关文献搜集溃结灌肠液Ⅱ的主要化学成分,通过PubChem数据库获得其2D分子结构,利用Swiss Target Prediction平台预测溃结灌肠液Ⅱ主要化学成分作用的靶点。通过GeneCards数据库获取UC和肠道菌群的基因表达数据;利用String平台对交集差异表达基因进行蛋白质相互作用分析,构建PPI网络;通过R软件进行GO分析和KEGG分析可视化;最后通过Cytoscape3.7.1软件制作“活性成分-靶点-富集通路”网络图。随机选10只小鼠作为空白对照组,26只小鼠自由饮用2.5%DSS溶液诱导构建小鼠UC疾病模型,将25只造模成功小鼠随机分为模型对照组、给药组。监测小鼠体质量,处死各组小鼠后测量结肠长度,观察小鼠结肠组织病理学变化。16S r DNA测序分析小鼠粪便菌群,采用PCR检测小鼠结肠组织TNF-...     

非淋菌性尿道炎的病原检查研究

目的：探讨有性乱史女性沙眼衣原体、解脲支原体和人型支原体感染的检查方法。方法：沙眼衣原体抗原检查采用C-C快速法解脲支原体和人型支原体的检查采用培养法。结果：406例被检者，沙眼衣原体抗原阳性者106例（26.10%)解脲支原体和人型支原体培养阳性者266例（65.52%)。结论：有性乱史的女性支原体感染率较高；对非淋菌性尿道炎的病原检查，沙眼衣原体抗原采用C-C快速法检查，解脲支原体和人型支原体采用培养法检查均较简便、快速、实用。     

电针“中髎”“下髎”对慢传输型便秘大鼠结肠5-羟色胺信号系统及粪便短链脂肪酸的影响

目的:观察电针“中髎”“下髎”对慢传输型便秘(STC)大鼠结肠5-羟色胺(5-HT)信号系统及粪便中短链脂肪酸(SCFA)的影响,探讨电针治疗STC的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组及电针组,每组8只。采用洛哌丁胺灌胃建立STC大鼠模型。阳性药组予6 g/kg乳果糖灌胃治疗,电针组电针“中髎”“下髎”,每次30 min,两组均每日治疗1次,连续干预14 d。观察各组大鼠首粒黑便排出时间及粪便含水率;Western blot法检测各组大鼠结肠组织中5-羟色胺4受体(5-HT4R)、色氨酸羟化酶1(TPH1)、5-HT转运体(SERT)相对表达量;ELISA法检测各组大鼠血清P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)含量;高效液相色谱-质谱联用法检测各组大鼠结肠组织中5-HT含量及粪便中SCFA含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠首粒黑便排出时间延长(P<0.05),粪便含水率降低(P<0.05);结肠组织中5-HT含量及5-HT4R、TPH1、SERT蛋白表达量降低(P<0.05);血清SP含量降低(P<0.05),VIP含量升高(P<0...     

肛周局部处理方案在克罗恩病肛瘘治疗中的研究进展

克罗恩病肛瘦(perianal fistula of Crohn's disease,PFCD)的治疗策略在过去20年里有了长足的发展,目前已经演变成一种多学科协作(肠胃科、结直肠外科医生、内镜和放射科医生均需要参与)、多种方法联合治疗(肛周局部处理与药物相结合)的治疗管理方式,并具有明显优势.由于此类疾病的特殊性,肛...     

降钙素原在血液恶性肿瘤患者合并血流感染中的临床应用价值

目的 本研究主要探讨降钙素原(PCT)在血液恶性肿瘤合并血流感染患者中的临床应用价值及其影响因素。方法 收集2013年1月至2020年8月该院血液内科住院治疗的270例血液恶性肿瘤合并血流感染的患者的临床资料,回顾性分析患者PCT水平的影响因素,采用SPSS25.0软件非参数检验行单因素分析,进一步使用多元线性回归进行多因素分析,建立ROC曲线计算曲线下面积(AUC),评价诊断效能,同时计算最佳临界(cut-off)值。结果 在单因素分析中,年龄、是否化疗、不同菌种、不同临床症状显著影响患者PCT值,进一步行多因素分析提示革兰阴性(G^-)菌、伴休克血压症状与患者PCT水平增高显著独立相关。诊断效能方面,在不同菌种中G^-菌PCT的AUC(AUC=0.64)最大,诊断效能明显优于革兰阳性(G⁺)菌(AUC=0.5)及真菌(AUC=0.56),差异有统计学意义(P<0.001)。在不同粒细胞数分组中,各组PCT的AUC值均接近0.5,诊断效能不佳,且各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究中PCT在不同的...