银翘清咽挥发油的抗菌活性研究

目的:观察银翘清咽挥发油的体外抗菌作用。方法:采用纸片法进行药敏测试,采用肉汤稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果:银翘清咽挥发油对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、铜绿假单胞菌、伤寒杆菌、变形杆菌均有不同程度的抑菌作用,其中对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌的抑菌作用最强,MIC分别为0.5mg/mL和2mg/mL,MBC分别为2mg/mL和4mg/mL。结论:银翘清咽挥发油具有较好的抗菌作用,实验结果为银翘清咽颗粒用于治疗外感风热证提供了药理学的数据和参考。     

HPLC测定双黄祛毒片中7种成分的含量

目的:建立测定双黄祛毒片(盐酸小檗碱、大黄、五倍子)含量的方法.方法:采用HPLC在同一色谱条件ZORBAX SB-Pheny色谱柱(4.6mm×150 mm,5μm)对没食子酸、盐酸小檗碱、大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚进行含量测定.结果:线性范围分别为0.12 ～2.4 μg(r=0.999 9),盐酸小檗碱线性范围0.11 ～2.2 μg(r =0.999 9),0.015～0.3 μg(r=0.9998),0.02～0.4 μg(r=0.9998),0.008～0.16 μg(r=0.9999),0.013 ～0.26 μg(r=0.9998),0.006 ～0.12 μg(r =0.999 9),平均回收率分别为100.97％,100.20％,99.01％,99.76％,101.10％,101.97％,101.56％.结论:该方法简便、快速、准确,重复性好,可作为双黄祛毒片中没食子酸、盐酸小檗碱、大黄酸、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素、大黄素甲醚含量测定方法.     

冰片含量对参芩微乳凝胶的促渗透作用研究

目的：研究冰片含量对参芩微乳凝胶体外透皮吸收性能的影响。方法：以离体小鼠腹部皮肤为透皮屏障,采用Franz扩散池法进行体外透皮吸收试验,以黄柏、黄芩提取物的透皮吸收为考察指标,通过测定透皮接收液中盐酸小檗碱、黄芩苷的含量,计算其累积渗透量和透皮速率,比较不同剂量冰片对参芩微乳凝胶的促渗透作用,优选冰片含量,同时观察其对小鼠湿疹反应的抑制效果。结果：不同剂量冰片均可促进参芩微乳凝胶的透皮吸收,强弱作用顺序为3.0%>4.0%>2.0%>1.0%>0.5%>0.0%（质量浓度）;药效评价显示3.0%冰片可抑制DNCB诱发小鼠的湿疹反应,抑制率大于0.0%冰片组。结论：质量浓度为3.0%的冰片对参芩微乳凝胶的促渗透效果良好,可提高原参芩微乳凝胶对湿疹反应的抑制效果。     

紫背万年青调控非小细胞肺癌A549细胞凋亡活性成分筛选和含量测定标准研究

目的 对紫背万年青中的化学成分进行非小细胞肺癌A549细胞凋亡活性测定,并以筛选出的活性成分为指标建立含量测定方法,用以评价该植物的功效。方法 将A549细胞和不同浓度的紫草素、木犀草素、补骨脂素(8、16、32μg·mL^-1)孵育后,使用Western-Blot法检测caspase-3蛋白表达,对所得结果进行统计分析,研究各成分对A549细胞凋亡的调控活性;选择紫草素为含量测定指标,使用Agilent TC C₁₈(柱长25 cm,内径0.46 cm,填料直径5μm)色谱柱,乙腈(A)-0.1%磷酸(B)为流动相,梯度洗脱,程序为0～10 min, 20%～20%A;10～20 min, 20%～80%A;20～30 min, 80%～20%A;30～35 min, 20%～20%A;流速1.0 mL·min^-1,检测波长274 nm,柱温25℃,进样量10μL;测定10批紫背万年青样品中补骨脂素的含量。结果 3个待测成分中,补骨脂素对caspase-3蛋白表达存在明显的调控效果,提示该成分具有较强的促进A549细胞凋...     

紫背万年青提取物联合吉非替尼对A549肺癌细胞的协同作用研究

目的:探讨紫背万年青提取物与吉非替尼联用对A549肺癌细胞的协同作用,并阐明其可能的分子机制。方法:采用CCK-8法检测细胞活力和细胞增殖的影响,并通过Isobologram方法进行联用效应分析。采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期。采用Western blot法检测相关蛋白,包括Bcl-2、Bax、p-PI3K和p-Akt的表达水平。结果:与单用吉非替尼相比,紫背万年青提取物与吉非替尼联用能显著降低吉非替尼抑制A549细胞IC₅₀(P<0.05);Isobologram分析表明联用具有协同效应。联用可以显著诱导细胞的凋亡(P<0.05),同时上调凋亡标记蛋白Bax/Bcl-2的表达比例(P<0.05)。同时,联用也可以显著提高G0/G1期的比例(P<0.05),促进细胞分裂G0/G1停滞。Western blot结果表明,联用可以显著下调p-PI3K和p-Akt的蛋白表达水平(P<0.05)。结论:紫背万年青提取物与吉非替尼联用可协同抑制细胞增殖、阻滞细胞周期和促进细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关。     

基于网络药理学和分子生物学探讨温下方治疗肺癌的作用机制

【目的】应用网络药理学方法预测温下方(由人参、大黄、附子、当归组成)治疗肺癌疾病的作用靶点和信号通路,并通过细胞实验验证其预测的准确性。【方法】搜索TCMSP数据库获得温下方组成药物的有效活性成分,使用Cytoscape软件建立活性成分-作用靶点网络,使用String数据库和Cytoscape软件绘制蛋白相互作用网络,并通过DAVID数据库对靶点进行基因本体论(GO)注释及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。制备不同浓度温下方含药血清作用A549细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法测定细胞增殖情况,采用定量聚合酶链反应(qPCR)技术测定苏氨酸激酶(AKT)的mRNA表达水平,验证预测结果的可靠性。【结果】温下方作用于肺癌的有效活性成分有32个,相关靶点112个,在靶点间的蛋白-蛋白相互作用网络中,分析出温下方中有39个重要靶点与治疗肺癌有关。验证实验可知,温下方含药血清能浓度依赖性抑制A549细胞的增殖,下调AKT mRNA水平。【结论】温下方治疗肺癌具有多成分-多靶点-多途径的作用特点,可为深入研究其机制指明方向。