PEG胁迫对黄芩黄酮类有效成分积累及相关基因表达的影响

目的:研究不同程度PEG胁迫对黄芩悬浮细胞中黄芩苷、黄芩素的积累及相关基因表达的影响.方法:采用HPLC法检测黄芩悬浮细胞中黄芩苷、黄芩素的含量,用酶标仪检测细胞内游离脯氨酸含量,并用半定量RT-PCR的方法对相关基因的表达进行分析.结果与结论:黄芩悬浮细胞内游离脯氨酸含量随PEG胁迫浓度升高而升高,10％ PEG胁迫黄芩悬浮细胞可以模拟干旱条件,提高悬浮细胞PAL基因表达量且会促进黄芩素的积累.20％ PEG胁迫提高了UBGAT基因的表达量,但同时APX酶活性的提高抑制了黄芩素参与清除活性氧,导致了黄芩素向黄芩苷的转化.     

黄芩延长因子1a基因全长cDNA的克隆及其功能

目的:克隆黄芩延长因子1a全长cDNA序列,并分析温度对其表达水平的影响。方法:通过构建黄芩全长cDNA文库克隆黄芩延长因子1a,利用生物信息学手段分析该基因的序列特征;利用RT-PCR分析温度对黄芩延长因子1a基因表达水平的影响。结果:黄芩延长因子1a基因长1 672 bp,开放阅读框位于97～1 446,共449个氨基酸,具有典型的延长因子1a结构域;高温和低温处理后,黄芩EF1a的转录水平均显著提高。结论:黄芩EF1a的克隆为进一步研究其在黄芩生长代谢过程中的功能和作用提供了基础。     

黄芩体内H2O2清除系统和黄酮类活性成分积累的相关性研究

目的:研究黄芩H2O2清除系统和黄酮类活性成分积累的相关性.方法:采用HPLC方法检测黄芩悬浮细胞中黄芩苷、黄芩素的含量,采用紫外分光光度法测定总黄酮、H2O2含量和POD,PAL酶活性.结果:40℃、黑暗、PEG胁迫组总黄酮含量和PAL酶活性在12 d显著提高.NPA,NPA+40℃,40℃,NPA+黑暗,黑暗,PEG胁迫12 d前后黄芩苷呈下降趋势,黄芩素呈上升趋势,POD酶活性呈升高趋势,H2O2含量保持稳定.结论:适度的环境胁迫促进黄芩总黄酮的积累,黄芩苷在POD酶的作用下转化为黄芩素,同时维持H2O2水平的稳定以避免氧化伤害.