胆红素对HBV DNA定量检测结果的影响

目的探讨高胆红素血清对实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)的影响,并选择有效减低胆红素对HBV DNA测定干扰的方法。方法将不同浓度的HBV DNA标准品(S1-S4:3.0×10~7、3.0×10~6、3.0×10~5、3.0×10~4IU/ml)按相同比例分别添加到胆红素正常血清和高胆红素血清中,按不同浓度胆红素进行分组来考察不同浓度胆红素血症对HBV DNA测定结果的影响程度大小,然后再分别测定HBV DNA的结果,每个标本重复检测三次,同时观察扩增曲线是否存在差异。对影响测定的血清标本作10、100、1000倍稀释后,进行检测,并收集5例临床高胆红素的乙肝血清标本进行验证。结果血清胆红素浓度介于401~500μmol/L、501~600μmol/L、600μmol/L三个组,HBV DNA定量检测结果高于胆红素正常血清组,差异有统计学意义(P0.05),血清胆红素浓度浓度介于20.6~100μmol/L、101~200μmol/L、201~300μmol/L和301~400μmol/L四个组,与胆红素正常血清组比较,差异无统计学意义(P0.05);血清胆红素浓度高于400μmol/L血清扩增时,扩增曲线先缓慢升高,其基线高于标准品,其阈值线处于拐点之下非S扩增区,之后升高呈现S型曲线;10、100、1000倍稀释后,扩增曲线平行且等间距,结果一致性较好。5例高胆红素血清有4例在定阈值线时,其阈值线处于拐点之下非S扩增区,定值偏高,结果高于稀释后的标本,差异有统计学意义(P0.05);有1例阈值线处于拐点处,其斜率低于标准品,结果低于稀释后的标本,差异有统计学意义(P0.05)。结论总胆红素高于400μmol/L对荧光定量PCR检测HBV DNA结果存在影响,通过稀释一般就可以降低胆红素因素干扰。     

穴位埋线配合运中定坤汤治疗早发性卵巢功能不全疗效观察

目的 观察穴位埋线配合运中定坤汤治疗早发性卵巢功能不全的临床疗效及其对下丘脑-垂体-卵巢轴功能的影响。方法 将80例早发性卵巢功能不全患者随机分为治疗组和对照组,每组40例。对照组采用运中定坤汤内服治疗,治疗组在对照组基础上配合穴位埋线治疗。治疗3个月经周期后,观察两组治疗前后各项症状(月经周期紊乱、月经量减少或闭经、潮热汗出、腰膝酸软、易怒心烦)积分、症状自评量表(SCL-90)积分、超声检测指标[卵巢直径(OVD)、窦卵泡数(AFC)、卵巢基质血流阻力指数(RI)]及血清内分泌激素[促卵泡生成素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、抗缪勒管激素(AMH)]水平的改善情况,并比较两组临床疗效。结果 治疗组总有效率为89.8%,明显高于对照组的68.4%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后各项症状积分、SCL-90积分、超声检测指标、血清内分泌激素水平与同组治疗前比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗组治疗后各项症状积分、SCL-90积分、超声检测指标、血清内分泌激素水平与对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 ...     

幽门螺杆菌外膜36kDa蛋白重组表纯化及初步鉴定

[目的]构建幽门螺杆菌(H. pylori) NCTC11637菌株36kDa (OMP36)外膜蛋白基因原核表达系统,探索研制H. pylori疫苗的新途径.[方法]培养和收集H. pylori NCTC11637菌株,提取基因组DNA, PCR扩增目的基因片断.将其克隆到T载体并测序,再将目的基因克隆入PET32a( ),构建重组表达载体PET32a-OMP36.转化E.coliBL21后IPTG诱导表达,经SDS-PAGE鉴定、镍亲和层析纯化、Western blot检测表达蛋白.(结果)测序分析表明,插入的基因片断为987bp,表达的蛋白的相对分子质量(Mr)约为36kDa,并显示具有良好的抗原性.SDS-PAGE检测表明,表达量占细菌总蛋白的37%,镍亲和层析纯化率约92%.Western blot检测表达蛋白具有良好的抗原活性.[结论]成功克隆了外膜蛋白OMP 36kDa的编码基因,其表达产物OMP 36有望成为新的Hp疫苗候选分子,为H. pylori疫苗的研制和试剂盒的开发奠定了良好的基础.     

幽门螺杆菌外膜36kDa蛋白重组表达、纯化及初步鉴定

[目的]构建幽门螺杆菌（H．pylori）NCTC11637菌株36kDa（OMP36）外膜蛋白基因原核表达系统，探索研制H．pylorl疫苗的新途径。[方法]培养和收集H．pylori NCTC11637菌株，提取基因组DNA，PCR扩增目的基因片断。将其克隆到T载体并测序，再将目的基因克隆入PET32a（＋），构建重组表达载体PET32a—OMP36。转化E．coli BL21后舢诱导表达，经SDS-PAGE鉴定、镍亲和层析纯化、Western blot检测表达蛋白。[结果]测序分析表明。插入的基因片断为987bp，表达的蛋白的相对分子质量（Mr）约为36kDa。并显示具有良好的抗原性。SDS—PAGE检测表明，表达量占细菌总蛋白的37％。镍亲和层析纯化率约92％。Western blot检测表达蛋白具有良好的抗原活性。[结论]成功克隆了外膜蛋白OMP36kDa的编码基因，其表达产物0MP36有望成为新的Hp疫苗候选分子，为H．pylori疫苗的研制和试剂盒的开发奠定了良好的基础。     

中西药合用治疗妊娠期高血压综合征临床观察

目的:观察中西药合用治疗妊娠期高血压综合征(PIH)的疗效.方法:111例随机分为对照组55例和观察组56例,两组均给以西药治疗,观察组加用益气养阴汤加减治疗.结果:总有效率观察组高于对照组(P＜0.05),血压(SBP和DBP)、氧化应激因子Hcy以及并发症发生率观察组低于对照组(P＜0.05),氧化应激因子NO和S...     

幽门螺杆菌NCTC 11637 cagT基因的克隆及序列分析

目的:克隆幽门螺杆菌(H pylori)NCTC 11637 cag T(HP0532)的编码基因,并分析其核苷酸序列.方法:应用PCR技术从H pylori基因组DNA中扩增cag T编码基因片段,克隆至pGEM-T载体后,再将其定向插入pQE30载体中,双酶切鉴定筛选阳性克隆,并进行序列分析.结果:NCTC 11637 cag T基因全长843 bp(GenBank登录号为EF114758),编码280个氨基酸,与GenBank公布的其他H pylori菌株基因序列的核苷酸同源性为97%-99%.结论:成功克隆了cag T基因,为进一步研究其生物学功能奠定了基础.     

磁共振成像在前置胎盘诊断中的价值分析

目的探讨磁共振成像(MRI)对前置胎盘的诊断价值,为评估预后而提供依据。方法回顾性分析58例前置胎盘患者的临床资料,其中26例前置胎盘患者并发胎盘植入;对所有患者进行MRI及超声检查,并分析对比MRI及超声检查对前置胎盘的诊断符合情况;将58例前置胎盘患者是否并发胎盘植入进行分组,分为胎盘植入组和对照组,对比两组患者的MRI影像特征,分析前置胎盘并发胎盘植入的特异性MRI影像特征。结果 MRI对前置胎盘的诊断符合率为100%,未出现漏诊及误诊的病例,超声对前置胎盘的诊断符合率为79.31%,其中漏诊1例,误诊11例;MRI与超声对前置胎盘的诊断符合率具有显著性差异(P0.05);胎盘植入组和对照组的MRI影像特征对比,胎盘植入组和对照组的子宫下段变形或局部隆起、T2WI像出现低信号暗带、植入局部流空血管影增多均具有统计学差异(P0.05)。结论 MRI对前置胎盘的诊断价值显著大于超声,诊断符合率高,且并发胎盘植入的患者具有特征性MRI征象,有利于评估前置胎盘的预后,为临床及时采取干预措施而提供依据。     

不同检测系统对新型冠状病毒核酸的检测结果分析

摘要：目的?评价不同检测系统对新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸的检测能力差异，为选择2019-nCoV核酸检测试剂提供指导。方法?用本实验室在用的提取试剂、扩增试剂及扩增仪组合成8个检测系统，分别对国家卫生健康委临床检验中心2019-nCoV室间质评发放的12个样本进行检测。结果?纳入统计指标的10个样本中，有5个2019-nCoV阴性样本，8个检测系统对5份阴性样本均为未检出，与预期结果相符，另5份2019-nCoV阳性样本中，8个检测系统均未检出202010(128 copies/mL)，均检测出202004、202008、202011。对202002(640 copies/mL)弱阳性样本，只有B及D 2个检测系统检出，其余均未检出。B及D检测系统扩增试剂均为e扩增试剂，检测的符合率总体优于f扩增试剂。N区的阳性率高于ORF区，样本2019-nCoV拷贝数越低，这一现象越显著。A-D检测系统检测到的ORF1ab基因的阳性率高于E-H检测系统，A-D检测系统均使用的是b快速提取试剂，而E-H检测系统使用的是a提取试剂，提取试剂的提取效率对检测结果影响较大。结论?在关注扩增试剂检测性能的前提下，也要关注核酸提取试剂的提取效率，尽量选择配套试剂。如选择非配套试剂，要做好试剂比对，确保检测结果的准确性及一致性。此外，还要重视人员培训，提高检测人员操作技能。     

系统性红斑狼疮患者多种自身抗体联合检测的临床意义

目的探讨血清抗核抗体(ANA)、抗可溶性抗原(ENA)抗体共16项自身抗体联合检测在系统性红斑狼疮(SLE)诊断中的应用价值。方法收集90例SLE患者、90例风湿性疾病患者和90例健康者血清,采用间接免疫荧光法检测ANA,采用蛋白质免疫印迹法检测其他15项抗体。结果 90例SLE患者ANA、抗核糖体核糖蛋白抗体(抗nRNP)、抗Smith抗体(抗Sm)、抗干燥综合征A抗体(抗SSA)、抗Ro-52抗体、抗双链DNA抗体(抗ds-DNA)、抗核小体抗体(AnuA)、组蛋白(AHA)和抗核糖体P蛋白抗体(ARPA)检测阳性率分别为97.8%、56.7%、33.3%、77.8%、70.0%、35.6%、38.9%、33.3%和43.3%,均高于风湿性疾病患者组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ANA灵敏度、阴性预测值最高,特异性最低。除ANA以外,抗nRNP/Sm、ARPA、AnuA、抗SSA、抗ds-DNA、抗Sm的正确指数均较高。抗Sm、抗ds-DNA、AnuA、ARPA、抗nRNP/Sm特异性及阳性预测值较高,此5种自身抗体具有互补关系。结论 ANA因灵敏度高,特异性低,只适宜作为SLE的筛选指标。抗Sm、抗ds-DNA、AnuA、ARPA、抗nRNP/Sm对SLE具有较高的特异性,与ANA联合检测可互相弥补其缺陷,有利于SLE的诊断和治疗。     

化疗期间发生骨髓抑制小鼠模型的代谢组学分析

目的分析化疗期间发生骨髓抑制小鼠模型的代谢组学。方法取24只健康雄性BALB/c小鼠,分为正常对照组(正常小鼠)和实验组(经腹腔注射环磷酰胺制备骨髓抑制小鼠模型),两组各12只。于建模2周后,行血常规检测,比较两组小鼠血红蛋白含量、血小板计数、红细胞计数和白细胞计数的差异。采用气相色谱-质谱分析两组小鼠血液代谢产物的指纹图谱,收集代谢组学数据,行多维统计分析,包括主成分分析与正交偏最小方差判别分析。结果通过测定两组小鼠血常规指标的水平,结果显示相比正常对照组,实验组血红蛋白含量、血小板计数、红细胞计数和白细胞计数均显著降低(P 0. 01)。相比正常对照组,实验组小鼠血浆中有21个潜在的差异表达代谢标志物,最终筛选出9种在两组小鼠中具有统计学意义的代谢标志物,包括油酸、亚油酸、咖啡酸、马钱苷、对硝基苯酚、葡萄糖-1-磷酸、烟酰胺、乙酰苯胺、可的松,这些代谢标志物在实验组中的含量明显高于正常对照组(P 0. 01)。结论血清小分子代谢产物有助于反映化疗所引起骨髓抑制的具体发病机制,有望成为研究骨髓抑制的潜在血清标志物,可为病症发生和进展及后续治疗效果的评估提供新的思路。