保肾通络方对KK-Ay小鼠及高糖培养下足细胞凋亡及p53通路的作用研究

目的:探讨保肾通络方对KK-Ay小鼠及高糖培养下足细胞凋亡及p53通路的影响。方法:将KK-Ay小鼠高脂饲料喂养建立糖尿病模型,造模成功后随机分为模型组(10只)与保肾通络方组(10只),另设10只C57BL/6J小鼠作为对照组;根据培养条件不同将体外小鼠肾小球足细胞(MPC5)分为正常对照组、高糖组、保肾通络方含药血清组。测定小鼠24 h尿蛋白定量(24 h-UTP)水平并进行肾组织病理学检查,CCK-8法检测足细胞活力,Western blot检测足细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved-caspase3及p53、p-p53的表达,TUNEL染色观察各组足细胞凋亡情况。结果:与对照组相比,模型组小鼠24 h-UTP显著升高(P<0.01),肾小球系膜细胞增生,细胞外基质增多,肾小球凋亡细胞比例及cleaved-caspase3蛋白表达增加(P<0.05),肾组织抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低,促凋亡蛋白Bax表达增加,p53磷酸化水平增加(P<0.01);保肾通络方干预使KK-Ay小鼠24 h-UTP显著降低(P<0.01),肾脏病理改善,肾小球凋...     

保肾通络方对KK-Ay小鼠足细胞p38通路及凋亡的作用机制研究

目的探讨保肾通络方对KK-Ay小鼠肾脏足细胞p38通路及凋亡的影响,进而阐明保肾通络方防治DN的分子机制。方法 30只KK-Ay小鼠随机分为模型组、保肾通络方组及缬沙坦组,另选取10只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。保肾通络方组和缬沙坦组分别给予保肾通络方和缬沙坦灌胃,正常对照组和模型组予等剂量蒸馏水灌胃,实验周期为12周。结果与正常对照组相比,模型组足细胞p38通路显著激活,足细胞凋亡数目明显增加(P0.05);与模型组相比,保肾通络方组及缬沙坦组小鼠足细胞p38通路激活被抑制,足细胞凋亡数目明显减少(P0.05)。结论保肾通络方可以抑制DN小鼠足细胞p38通路激活,减轻足细胞凋亡,可能是其降低DN蛋白尿,延缓疾病进展的分子机制。     

王悦芬教授运用中药减毒增效治疗免疫性肾脏病经验

免疫性肾脏病是多种病因引发的具有相同免疫病理学特征的一组疾病。糖皮质激素的使用为治疗免疫性肾脏病及延缓肾衰竭进程起到巨大作用,但存在一系列毒副作用。中医药可以通过辨证治疗及中药本身对免疫系统的调节而发挥减毒增效作用。王悦芬教授认为,免疫性肾脏病发病机制是“阴阳失调,正虚邪伏”,结合糖皮质激素使用过程中证候的变化规律及毒副作用,以“调和阴阳,扶正祛邪”为中药减毒增效治疗法则,提出四阶段治疗及常用方剂,并附验案3例进行佐证。     

高彦彬教授从络病论治IgA肾病经验拾萃

IgA肾病是引起原发性肾小球肾炎的最常见病因。高彦彬教授认为IgA肾病属中医“络病”范畴,病性本虚标实,辨证分型主张“以虚定型,以实定候”,本虚分为肝肾亏虚、气阴两虚、脾肾两虚、阴阳两虚4个证型,标实分为热毒伤络、风伏肾络、湿热壅络、肾络瘀阻、浊毒闭络5个证候;治疗上主张分期论治,以通络为主;急性发作期以邪实为主,治以祛邪通络;慢性缓解期,以正虚为主,虚实夹杂,治以扶正通络;辨证施治,随证加减,疗效满意。     

糖肾宁对KK-Ay小鼠足细胞上皮间质转分化的作用研究

目的探讨糖肾宁对KK-Ay小鼠足细胞上皮间质转分化的影响。方法采用KK-Ay小鼠建立糖尿病肾病小鼠模型,随机分为模型组、糖肾宁组及缬沙坦组,每组10只,并将10只C57BL/6J小鼠作为正常对照组。各组小鼠干预给药12周后处死,心尖取血、摘取双侧肾脏,进行相应指标检测。使用酶联免疫法检测血清肌酐及尿素氮水平,PAS染色观察各组小鼠肾组织细胞外基质增生情况,免疫组化检测各组小鼠肾组织Collagen I及FN蛋白表达,WB及RT-PCR检测各组小鼠足细胞P-cadherin和FSP-1的蛋白及mRNA表达。结果 (1)与正常对照组相比,模型组小鼠血清肌酐、尿素氮水平明显升高(P0.05);与模型组相比,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠血清肌酐、尿素氮水平明显降低(P0.05)。(2)与正常对照组相比,模型组小鼠肾小球细胞外基质明显增生,基质蛋白Collagen I及FN表达上调(P0.05);与模型组相比,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠肾小球细胞外基质增生减轻,基质蛋白Collagen I及FN表达明显下调(P0.05)。(3)与正常对照组相比,模型组小鼠足细胞P-cadherin蛋白及mRNA表达明显下调(P0.05),FSP-1蛋白及mRNA表达明显上调(P0.05);与模型组相比,糖肾宁组及缬沙坦组小鼠足细胞P-cadherin蛋白及mRNA表达明显上调(P0.05),FSP-1蛋白及mRNA表达明显下调(P0.05)。结论糖肾宁能够抑制糖尿病肾病小鼠足细胞上皮间质转分化,可能是其减轻肾小球细胞外基质增生、延缓疾病进展的分子机制。     

保肾通络方治疗糖尿病肾脏病（G3期）的前瞻性非随机对照研究＊

目的 采用非随机对照研究评价保肾通络方治疗糖尿病肾脏病（DKD）患者（G3期）的安全性与有效性。方法 选取规律口服双倍剂量肾素血管紧张素系统阻断剂（RASI）符合纳入标准的115例DKD（G3期）患者，其中对照组57例予基础治疗，试验组58例加服保肾通络方；观察12个月，主要比较治疗前及治疗6、12个月后两组24h尿蛋白定量（24-h UP）、血肌酐（SCr）、肾小球滤过率估算值（eGFR）、血清白蛋白（ALB）、血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、甘油三酯（TG）、血尿酸（UA）及中医证候积分的变化。结果 两组患者24-h UP、SCr各时间点的差异有统计学意义（P < 0.05），TC、TG各时间点的差异有显著统计学意义（P < 0.01），试验组优于对照组（P < 0.01）。试验组经治疗中医证候积分明显下降（P < 0.01）；对照组无明显变化（P > 0.05）。结论 保肾通络方能够延缓DKD（G3期）患者肾脏病进展，降低蛋白尿，降低血脂水平，减轻临床症状，且安全稳定。     

通心络对2型糖尿病大鼠肾脏血管紧张素Ⅱ表达的影响

目的:观察2型糖尿病（T2DM）大鼠肾损伤过程中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的表达,探讨通心络对糖尿病早期肾小球高滤过的影响及其作用机制。方法:8周龄SD雄性大鼠40只,采用高脂饲料+低剂量链脲佐菌素建立T2DM大鼠模型,随机分为空白组、模型组、缬沙坦组（10 mg·kg-1·d-1）和通心络组（0.4 mg·kg-1·d-1）,分别于4周和8周观察T2DM大鼠血糖（FBG）、尿白蛋白排泄率（UAER）及肾功能（Scr,BUN,Ccr）的变化;8周末次给药后取肾组织,计算肾重指数（KW/BW）,采用western blot及real time-PCR技术检测AngⅡ和AngⅡ1型受体（AT1R）蛋白和基因的表达。结果:T2DM大鼠的FBG、UAER、Scr、BUN、Ccr及KW/BW较空白组有不同程度的升高（P<0.05）,通心络组FBG无明显变化（P>0.05）,其他各指标水平较模型组均显著降低（P<0.05）;WB及RT-PCR结果显示通心络可以降低肾组织中AngⅡ和AT1R基因蛋白的过度表达(P<0.05)。结论:通心络可以改善T2DM大鼠早期的高滤过状态,抑制尿白蛋白的排泄及肾脏肥大,保护肾功能;通心络可能是通过下调肾组织中AngⅡ的表达,抑制异常活化的RAS来延缓糖尿病肾病的发生发展。     

"保肾通络方"联合基础治疗方案干预糖尿病肾病气阴两虚兼血瘀证44例临床研究

目的:观察保肾通络方联合基础治疗方案对糖尿病肾病(DN)气阴两虚兼血瘀证患者临床疗效、肾功能指标、血液流变学指标及微循环障碍指标的影响.方法:92例DN气阴两虚兼血瘀证患者随机分为治疗组与对照组,治疗组最终完成44例,对照组最终完成43例.2组患者均予糖尿病饮食及降糖、降压、降脂等基础治疗方案,治疗组加予中药汤剂保肾通络方口服,2组疗程均为3个月.比较2组患者治疗前后尿白蛋白排泄率(UAER)、24 h尿蛋白定量、血清肌酐、血清尿素氮、血液流变学指标(全血黏度、全血还原黏度、血小板聚集率、血浆黏度水平)、微循环障碍指标[一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)]的变化情况,并评估临床疗效.结果:治疗组总有效率为84.1％,明显高于对照组的67.4(P<0.05).治疗后2组患者24 h尿蛋白定量组内与组间比较差异均无统计学意义(P>0.05).治疗后2组患者UAER均较治疗前明显降低(P<0.05),治疗组明显低于对照组(P<0.05).治疗后对照组患者血清肌酐、尿素氮水平均较治疗前明显升高(P<0.05);治疗组上述指标与治疗前比较无显著性差异(P>0.05),且明显低于对照组治疗后(P<0.05).治疗后2组患者血液流标学指标均较治疗前明显降低(P<0.05),治疗组明显低于对照组(P<0.05).治疗后2组患者ET-1、TXB2水平较治疗前明显降低(P<0.05),NO、6-Keto-PGF1α水平较治疗前明显升高(P<0.05),治疗组上述指标改善程度均显著优于对照组(P<0.05).结论:在基础治疗方案干预的同时加用保肾通络方可明显降低DN患者尿白蛋白排泄率、血液黏稠度,保护肾功能,提高临床疗效,其作用机制可能与其改善微循环障碍有关.