天麻素生物合成的研究进展

天麻素是我国名贵中药材天麻中的一种主要活性成分,具有降血压、抗癫痫、抑制肿瘤、保护神经等多方面的药理活性。随着市场对天麻素需求的不断增长以及传统获取方法固有的问题,导致急需新的方法来解决天麻素生产实际中面临的各项困难。生物合成法是一种有别于传统获取法的新方法,已在天麻素获取上取得了较大进展和成果,故现阶段有必要从天麻素生物合成途径、植物转化法和微生物转化法3个方面,对天麻素生物合成进行系统地阐述,从而为进一步改进和完善天麻素生产方法,以满足人们对其不断增长的需求提供有价值的参考。     

忽地笑加兰他敏生物合成代谢途径中COMT酶基因克隆及序列分析

目的克隆忽地笑加兰他敏合成代谢途径中COMT酶基因及序列分析。方法通过比较数据库中四种植物烟草、唐松草、玉米和罂粟的儿茶酚氧位甲基转移酶（COMT）基因的同源序列,设计简并引物,克隆出忽地笑COMT酶基因（LaCOMT）的部分序列,然后通过RACE技术获得LaCOMT的全长序列。结果该序列开放读码框长度为1101bp,编码366个氨基酸,且此氨基酸序列具有依赖S-腺苷-L-甲硫胺酸（SAM）的甲基转移酶蛋白的三个保守序列,并与高等植物COMT氨基酸序列（CAA52462.1、AAQ01670.1、AAD29844.1和NP₀01106047.1）的同源性大于74%。LaCOMT蛋白的预测分子量为40 501.9,等电点pI为5.95。结论此研究所获得的碱基序列为COMT酶基因的全长序列,且其预测的三级结构与咖啡酸-3-氧位甲基转移酶单体三级结构的1kyzE模型相似,均为依赖S-腺苷-L-甲硫胺酸（SAM）的甲基转移酶。     

茯芩菌液态发酵合成茯芩三萜的实验研究

目的:探索茯苓菌液态发酵合成茯苓三萜的工艺条件.方法:从碳源、氮源、金属离子、辅助因子及初始pH角度对茯苓菌液态发酵合成茯苓三萜的过程进行系统分析,以确定高效发酵工艺.结果:最佳碳源为葡萄糖、氮源为玉米浆粉、添加金属离子ZnSO4、MnSO4、CuSO4或FeSO4以及辅助因子2-硫代巴比妥、初始pH范围为5～6.结论:通过培养基和发酵条件优化设计可显著提高茯苓三萜的合成效率.     

超声波辅助提取缬草素的工艺优化

目的 研究缬草中缬草素的提取工艺条件.方法 以缬草为原料,采用二次回归通用旋转组合实验设计,探讨超声波辅助提取缬草素的最佳工艺参数.结果 确定最优工艺条件为:甲醇浓度80%,超声功率250 W,萃取时间5.5 min,液料比22∶1,缬草素得率达1.66%±0.02%.结论 实验中所选参试因子对超声波辅助缬草素得率影响显著,其顺序为甲醇浓度＞超声波功率＞提取时间＞液料比.     

蛹虫草菌丝体多糖与子实体多糖体外免疫调节活性的研究

目的 分析蛹虫草菌丝体多糖（mycelia polysaccharides of Cordyceps militaris,MPS）与蛹虫草子实体多糖（polysaccharides from fruiting body of Cordyceps militaris,FPS）的体外免疫活性。方法 以RAW264.7细胞株为受试对象,从细胞增殖、中性红吞噬能力、NO释放水平角度系统考察不同浓度的MPS与FPS的免疫调节活性,并分析其量化关系。结果 MPS与FPS均可明显促进RAW264.7细胞株的增殖、对中性红的吞噬能力和NO释放水平,且均呈现出浓度依赖性的特征。二者对RAW264.7细胞株增殖的促进作用无显著性差异,但在免疫调节最佳作用浓度方面却存在一定差异,MPS在100μg·mL^-1时表现出最好的细胞吞噬能力,而FPS在200μg·mL^-1时表现出最高的细胞吞噬能力。结论 MPS与FPS均具有显著的体外免疫活性。     

栀子过氧化物酶、酯酶同工酶的遗传多样性分析

目的 应用同工酶技术研究不同种及居群栀子的亲缘关系和遗传多样性.方法 采用聚丙烯酰胺凝胶不连续垂直板电泳系统,测定了12份不同居群栀子的过氧化氢酶(POD)、酯酶(EST)同工酶酶谱.结果 12份供试材料在2个同工酶系统中均有栀子物种的共同特征谱带,同时又蕴涵着丰富的多态性.结论 栀子居群间的遗传变异较大,而居群内部的分化程度很低.不同居群的栀子与种的特性和地理分布具有一定相关性.该结果为栀子的品种鉴定和合理利用提供了实验依据.     

宽叶缬草醚酯提取物体外抗氧化活性研究

目的 探讨缬草醚酯提取物体外抗氧化活性.方法 采用DPPH法、邻苯三酚自氧化法、水杨酸法,分别测定缬草醚酯提取物清除DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基的能力.结果 样品中活性物质对于DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基等自由基半清除率浓度(IC50)分别为1.36,1.46和2.14 mg/ml.结论 在实验条件下,缬草醚酯提取物对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子有较好的抑制作用.     

黄芥子中芥子酶活性的测定及炮制对其活性的影响

目的:观察不同炮制条件下黄芥子中芥子酶活性的变化。方法:采用高效液相色谱法测定酶促反应后底物黑芥子硫苷酸钾的剩余量,Kromasil C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为5mmol/L四甲基溴化铵溶液∶乙腈=1∶0.02,检测波长227nm。结果:芥子酶的活性可准确测定。结论:随着炮制温度的提高和炮制时间的延长,黄芥子中芥子酶活性急剧降低,芥子酶灭活的炮制条件应不低于140℃。     

植物药-茯苓菌双向发酵代谢特征初探

目的对植物药-茯苓菌共发酵体系进行初步研究。方法通过菌株筛选、碳源初筛、氮源初筛等确定茯苓菌发酵培养基,并将12种常见植物药粉末添加到茯苓菌发酵体系,观察其对茯苓胞外多糖合成和菌丝体生长的影响。结果茯苓菌ZK表现出较强的胞外多糖合成能力和细胞生长能力,2%葡萄糖+1%玉米粉为最佳碳源,0.5%酵母膏为最佳氮源;黄芪、茶叶、麦芽、三七、葛根、穿心莲表现出极强的胞外多糖合成促进能力;黄芪、茶叶、穿心莲、鹿衔草可显著促进茯苓菌丝体的生长,鹿衔草却抑制茯苓胞外多糖的合成或分泌,枸杞、山楂、丹参、茜草、连翘则抑制茯苓菌丝的生长。结论植物药因子对茯苓菌的胞外多糖合成和菌丝体生长具有明显的调控作用。     

栀子叶绿体DNA条形码的研究

目的评价3个叶绿体DNA(cpDNA)条形码候选序列对茜草科植物栀子属的鉴别能力,探索栀子属植物鉴定的新方法。方法使用matK、rbcL和psbA候选序列的通用引物对栀子属植物cpDNA进行PCR扩增和测序,比较各序列的扩增成功率、长度、种内和种间变异、barcoding gap,并采用BLAST和DNA MAN进行分析评价。结果 matK、rbcL、psbA序列对栀子属3个物种、5个样本的扩增成功率均为100%,其中通用引物matK扩增的序列种内种间变异差异、barcoding gap较psbA、rbcL序列具有更明显的优势,其鉴定成功率相对较高。结论 matK是适合栀子属植物鉴别的较好cpDNA条形码。