象皮生肌膏预处理的骨髓间充质干细胞源外泌体对人脐静脉内皮细胞血管生成的影响

目的 探讨象皮生肌膏（Xiangpi Shengji Ointment, XPSJO）预处理的骨髓间充质干细胞源外泌体（XPSJO-Exos）对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell, HUVEC）血管生成的影响。方法 制备象皮生肌膏溶液,CCK-8法检测不同浓度象皮生肌膏（0、10、20、50、100、200μg/mL）对骨髓间充质干细胞活力的影响;提取骨髓间充质干细胞中的外泌体（exosomes, Exos）和XPSJO-Exos,分别设为Exos组和XPSJO-Exos组,另设对照组（HUVEC）,通过透射电子显微镜观察Exos的形态,采用粒径分析仪检测其粒径;Western blot检测Exos标志性蛋白TSG101、CD9和CD63的表达;采用PKH67标记Exos,观察其能否被HUVEC所摄取;采用CCK-8、划痕实验、小管形成实验、ELISA法检测Exos对HUVEC细胞增殖、迁移、小管形成和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）浓度的影响;采用RT-qPC...     

基于p38 MAPK通路探究参苓白术散对克罗恩病大鼠肠道炎症反应的影响

目的：观察参苓白术散对克罗恩病(CD)大鼠肠道炎症反应的影响及其与p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的关系,通过对各组间作用差异的对比,为该方在临床广泛应用提供一定的实验及理论依据。方法：SD大鼠共72只,随机被分作正常组(12只)、造模组(60只),雌雄各半。造模组大鼠应用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)(3 mL·kg^-1)造模,随后被平均分作模型组、美沙拉嗪组(0.21 g·kg^-1·d^-1)、参苓白术散低、中、高剂量组(5.88、11.76、23.59 g·kg^-1·d^-1)。药物组大鼠应用相应药物进行灌胃14 d,正常组与模型组则应用等体积的蒸馏水灌胃。灌胃结束后进行各组大鼠炎症性肠病(IBD)炎症活动指数(DAI)评分及结肠黏膜损伤指数(CMDI)评分;苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠结肠组织病理学改变;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)的含量;蛋...     

溃疡性结肠炎病证结合动物模型的制备与评价

溃疡性结肠炎（UC）是炎性肠病的主要表现疾病形式之一，由于其缠绵难愈，易复发的特性已成为全世界公共卫生的一大挑战。中医药在治疗UC中可有效缓解临床症状、缩短治疗周期、减少复发频率、提高生活质量、减少并发症产生等优势。寻求合适的病证结合UC动物模型是研究辨证指导下中医药治疗UC具体机制并筛选合适药物的重要方法。该文从模型动物种属选择，雌雄选择，UC常见证型病证结合动物模型制备方法，模型评价指标及中药干预UC病证结合动物模型主要机制5大方面对UC病证结合动物模型进行归纳比较。研究显示目前主要研究的UC证型有湿热证、脾虚证、脾肾阳虚证、脾虚湿盛证、肝郁脾虚证、寒热错杂证，在造模方法上主要选用病因模拟法先复制证型后选用化学制剂或免疫制剂诱导疾病模型的造模方法，常选用大鼠作为研究对象，复制周期在7~28 d。所选化学试剂以5%葡聚糖硫酸钠（DSS）自由饮、2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS） 100 mg·kg^-1加50%乙醇0.25 mL混合试剂灌肠为主。这种模型复制方法可同时兼顾UC的西医病理和中医的病机特征，对于阐释中医证型和西医病理变化联系及中医药治疗UC相关机制具有重大的意义，并有助于为建立最优的病证结合UC动物模型提供参考，为深入研究中医药防治UC具体作用机制奠定模型基础。     

基于Fas/Fas L通路探讨象皮生肌膏对肛瘘术后模型大鼠创面细胞凋亡的影响

目的 探究象皮生肌膏对肛瘘术后模型大鼠创面愈合及凋亡相关Fas/Fas L通路的影响。方法 36只SD大鼠采用钢丝挂线留置30天造模的方法构建肛瘘模型,造模成功后随机选取27只肛瘘大鼠行“瘘管切除术”构建肛瘘术后创面模型。术后创面模型大鼠随后被随机分为3组,每组9只,为象皮生肌膏组、凡士林组、模型组。剩余9只肛瘘大鼠则为假手术组。象皮生肌膏组采用象皮生肌膏纱条外敷、凡士林组采用凡士林纱条外敷,模型组仅消毒冲洗,假手术组无特殊处理。观察药物干预后第3、5、7、10天创面愈合情况,计算创面愈合率。连续干预10天后,从各组取创面组织,采用HE染色法、TUNEL染色法、免疫组化法分别观察创面组织病理学变化、创面组织中细胞凋亡数目、创面组织中Fas、Fas L、caspase-8、cyto-c的表达,RT-PCR法检测创面组织中Fas、Fas L、cyto-c的mRNA表达。结果 与模型组相比,象皮生肌膏组及凡士林组在干预后7、10天时显著促进创面愈合（P<0.01）,且象皮生肌膏组创面愈合率明显高于凡士林组（P<0.01）。药物干预10天后,与假手术组相比,象皮生肌膏组、凡士林组、...     

象皮生肌膏对肛瘘术后创面修复及PI3K/Akt通路的影响

目的 探究象皮生肌膏对大鼠肛瘘切除术后创面模型的治疗作用及其与磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(Phosphoinosi-tide 3-kinase/proteinkinase B,PI3K/Akt)信号通路的相关性。方法 将36只SPF级健康成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组,每组各9只。除假手术组外均采用0号钢丝(Aciflex)制成人造肛瘘,随后进行肛瘘切除术,创面不缝合,保持开放,使之形成一个“急性、开放、渗血”的类似临床肛瘘术后创面,并予以相应药物肛周换药10 d,模型组予以灭菌注射用水换药。利用常规面积检测法比较模型组、象皮生肌膏组、湿润烧伤膏组各组大鼠肛瘘术后创面的创面愈合率;苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining, HE)染色观察各组大鼠肛周组织病理情况;蛋白免疫印迹法(Western blot, WB)比较各组大鼠肛周肉芽组织中白介素17(Interleukin 17,IL-17)、磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphoinositide 3-kinase, PI3K)、蛋白激酶B(Proteinki...     

从“培土生金，肺合大肠”角度探析参苓白术散防治炎性肠病思路

炎性肠病（IBD）最常见的表现形式是克罗恩病和溃疡性结肠炎，IBD的全球发病率呈上升趋势，中医药在治疗本病上具有一定优势。中医将IBD多依据临床症状而命名，多归属“休息痢”“久痢”“泄泻”“痢疾”“肠澼”等范畴，认为IBD病机以脾虚湿盛贯穿疾病发展始终，肺与大肠相合，肺脾气机联动，肺脾气虚，湿热内蕴，瘀血阻络发为本病，从“肺合大肠”角度认为肺肠气机失衡，肺肠津液代谢失常，肺肠营阴受损是IBD发生的主要机制；结合IBD慢性、复发性、弥漫性的主要发病特点和主要临床表现进行分析认为IBD的发生均与“肺肠”密切相关，在治疗思路上可补脾益肺、从肺治肠，一方面补脾祛湿，另一方面补母益子而调肠。参苓白术散为治疗IBD常用经典用方，主为益气健脾，渗湿止泻，更有“培土生金”之功，通过“培土生金”增强肺的功能反过来达到调节肠道的作用，促进IBD恢复。该文重点阐述参苓白术散通过健脾益肺达到调节肠道机制，结合现代研究分析其可能作用机制与调节炎症因子水平、调节免疫、黏膜修复改善屏障功能、肠道菌群等多个环节发挥治疗IBD作用，为IBD的辨治过程中重视肺-脾-大肠轴调治和后续开展实验研究提供新的思路。