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目的:以月华胶囊含药血清对耐多药结核分支杆菌感染小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)进行干预,探讨其对耐多药结核分支杆菌感染巨噬细胞自噬的作用及其机制。方法:低温冷冻干燥法制备月华胶囊,大鼠按3.02 g·kg^-1灌胃给药7 d,制备月华胶囊含药血清。体外培养RAW264.7,耐多药结核分子杆菌。以细胞增殖毒性检测试剂盒(CCK-8)检测含药血清对RAW264.7的增殖能力并选定其有效浓度。细胞分为模型组(10%胎牛血清);月华胶囊含药血清组(10%月华胶囊);自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)+月华胶囊含药血清组(5 mg·L^-1的3-MA+10%月华胶囊含药血清);雷帕霉素(Rap)组(200 mg·L^-1的Rap+10%胎牛血清);正常组(10%胎牛血清)。除正常组外,各组细胞培养24 h后,按细胞-细菌1∶10感染4 h。透射电镜观察细胞自噬体的出现和形成;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中I型微管相关蛋白轻链3(LC-3Ⅰ),Ⅱ型微管相关蛋白轻链3/I型微管相关蛋白1轻链3(LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ),Beclin-1蛋白的表达;间接免疫荧光染色法观察细胞中LC3B荧光颗粒、斑点及亮度;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞中LC3,Beclin-1 mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组细胞未见自噬体,细胞中LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量均无显著变化,细胞无荧光颗粒、斑点,无荧光亮度。与模型组比较,月华胶囊含药血清组及Rap组细胞,均可观察到自噬体的形成,细胞LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量值均明显升高(P<0.05),月华胶囊含药血清组细胞荧光颗粒和荧光斑点明显增多,Rap组细胞荧光颗粒和荧光斑点增多非常明显,荧光闪亮,可判定细胞荧光呈现为阳性;自噬抑制剂3-MA+月华胶囊含药血清组细胞未见自噬体,细胞中LC-3Ⅱ,LC-3Ⅱ/LC-3Ⅰ,Beclin-1蛋白及LC3,Beclin-1 mRNA的相对表达量值均无明显升高。结论:月华胶囊含药血清能使耐多药结核分支杆菌感染细胞产生自噬而发挥抗结核的免疫效应,其机制是通过调控自噬相关蛋白LC3,Beclin-1蛋白及其mRNA的表达水平,促使LC3-I趋向LC3-Ⅱ的转化加快而实现的。 相似文献
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赵国荣教授治疗病毒性肝病临床经验述要 总被引:2,自引:1,他引:1
文章对赵国荣教授治疗病毒性肝病经验作了较为系统的总结。赵氏认为病毒性肝炎的中医病因病机是湿热蕴毒,流注全身;根据病情轻重缓急采取相应的中西医治疗原则;在治疗上突出中医治疗肝病的特色,从清热、解毒、化浊入手,用方遵《伤寒论》、《温病条辨》之方化裁,强调用药少而精,治疗肝病有方有守,剂型上丸散汤等不拘一格。 相似文献
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基于筋膜理论,探讨筋膜理论在男科生理、病理及临床诊治的发挥和运用,阐述在筋膜理论指导下尹周安老师以“柔韧宗筋”为总则,运用疏肝法、清肝法、温肝法、补肝法诊治男科疾病的临床经验,为男科诊疗拓展新的思路。 相似文献
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《方剂学》与《中医妇科学》各有其研究范围、教学目的和教学重点.妇科方剂是目前中医教学的薄弱环节.为此编写并出版了全国高等中医药院校创新教材《中医妇科方剂选讲》,并开设了选修课程.该教材在遵循女性生理、病理、用药特点及临床实用性的同时,注重方剂学理论的独特性、系统性,将妇科学与方剂学有机结合。选修课讲授时侧重于妇科方证的辨识,以及站在妇科角度,从妇女解剖、病理、生理特点来分析方证病机和制方原理、配伍特点、变化规律.课程开设4个学期,选修人数占同年级同专业学生的85%。其教学特色多次获学校、省级成果奖。 相似文献
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目的:探讨理脾护肝调脂丸防治脂肪肝的作用机制。方法:采用高脂饲料造模法建立脂肪肝模型。将60只雄性SD大鼠按体质量随机分为正常对照组、模型对照组、东宝肝泰组和理脾护肝调脂丸低、中、高剂量组6组,每组10只。喂养8周后处死大鼠,取肝组织,观察肝组织病理变化,检测肝组织SOD的含量。结果:与模型对照组对比,理脾护肝调脂丸各组大鼠肝脏脂变程度明显减轻,肝组织SOD含量增高,差别有统计学意义(P〈0.01);高剂量组效果优于东宝肝泰组,差别有统计学意义(P〈0.05)。结论:理脾护肝调脂丸对于高脂血症性脂肪肝大鼠有明显的治疗作用,且高剂量组效果优于东宝肝泰组。推测其机制与提高机体抗氧化能力、减轻脂质过氧化反应对肝脏的损伤、保护肝细胞有关。 相似文献