基于UPLC-Q-TOF-MS的林泽兰内酯C血清药物化学研究

目的:采用超高效液相色谱四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC-Q-TOF-MS)分析鉴定大鼠灌胃林泽兰内酯C后血清中的代谢产物,阐明林泽兰内酯C代谢转化过程.方法:灌胃给药后眼眶取血,制备血清样品,采用Agilent ZORBAXXDB-C8柱,流动相为乙腈-0.2％甲酸水,梯度洗脱,动态背景扣除触发信息关联采集进行...     

基于MAPK通路探讨蒿藤胶囊对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠的免疫抑制机制

目的：探讨蒿藤胶囊对Ⅱ型胶原诱导性关节炎模型（CIA）大鼠的免疫抑制机制。方法：采用弗氏完全佐剂与Ⅱ型胶原混合后乳剂诱导大鼠关节炎模型,每周检测大鼠右后足关节肿胀百分率;末次给药后,观察关节滑膜的病理变化,采用流式细胞术检测蒿藤胶囊对外周血中CD4⁺ T淋巴细胞的影响,酶联法检测蒿藤胶囊对血清中TNF-α、IL-17、IL-6、IL-21及IL-22的影响,PCR法测定蒿藤胶囊对脾脏组织中JNK、p38、ERK mRNA表达的影响,免疫组化测定蒿藤胶囊对脾脏组织中JNK、p38、ERK蛋白表达的影响,Western blot法测定关节滑膜中JNK、ERK蛋白表达。结果：蒿藤胶囊0.193 g·kg^-1在给药14 d时可显著缓解CIA大鼠的关节肿胀率,降低病理学评分及血清炎症因子IL-17、IL-6的水平,抑制CD4⁺ T淋巴细胞升高,下调脾脏组织JNK、p38、ERK mRNA及JNK、ERK蛋白的表达并下调关节滑膜中JNK、ERK蛋白表达。结论：蒿藤胶囊治疗CIA大鼠的免疫抑制机制可能与下调脾脏组织与关节滑膜中JNK、ERK表达,降低外周血中CD4⁺ T淋巴细胞的比例与血清炎症因子IL-17、IL-6的水平有关。     

网络药理学结合动物实验初步探究火把花根片的睾丸毒性

目的 通过网络药理寻找火把花根片(HBHGH)脱靶靶点,并进行动物实验验证火把花根片睾丸毒性分子机制。方法 运用维普网、中药系统药理疗数据库与分析平台和人类基因组注释数据库等数据库,采用网络药理学方法分析火把花根片脱靶靶点及通路;将雄性KM种小鼠随机分为2组,即药物组和溶媒对照组,分别灌胃火把花根片1.0 g/kg·bw及等体积纯化水(20 ml/kg·bw),6个月后,采集睾丸样本,分别称量睾丸重量、计算睾丸相对指数、定性观察睾丸组织病理学变化、RT-PCR检测NR4A1、Bax、Bcl-2、3β-HSD、INSL3、Cyp17a1和Star mRNA表达。结果 火把花根片脱靶靶点包括AR、NR4A1、ESR2,NR4A1因生物功能及作用通路与睾丸毒性相关成为实验验证的靶点;火把花根片持续6个月重复给药诱导了小鼠睾丸毒性;组织病理学检查可见药物组曲精管凋亡、萎缩、间距改变,腔内皮改变,精原细胞和精母细胞数量改变;在检测的mRNA中,NR4A1、Bax、3β-HSD和INSL3较溶媒对照组升高,Bcl-2低表达,Bax/Bcl-2比值升高,其余Cyp17a1和Star变化不明显。结论 ...     

昆明山海棠片对银屑病动物模型的影响

目的 观察昆明山海棠片对银屑病模型动物的治疗作用。方法 采用豚鼠银屑病皮损模型、小鼠阴道上皮细胞有丝分裂模型和小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成模型,观察昆明山海棠片对银屑病各实验动物模型的影响。结果 昆明山海棠片能够降低豚鼠皮损组织白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的含量,使豚鼠耳部皮肤角化过度减轻,颗粒层恢复,棘层变薄,表皮突延伸、乳突上伸减轻,炎症细胞浸润减少;能够抑制小鼠阴道上皮细胞的有丝分裂;促进小鼠尾部鳞片表皮颗粒层形成。结论 昆明山海棠片对银屑病模型动物有较好治疗作用。     

UPLC-MS/MS法测定犬血浆中的雷公藤次碱及体内药动学研究＊

目的 建立超高效液相-串联质谱（UPLC-MS/MS）法测定犬血浆中的雷公藤次碱的浓度，并用于雷公藤次碱的体内药代动力学研究。方法 色谱柱为ACE Super C18柱（2.1 × 100 mm id，5 μm，菲罗门），以2 mM醋酸铵（0.2%甲酸）-乙腈为流动相，梯度洗脱，流速为350 μL·mL^-1，柱温30℃，进样量2 μL。以雷公藤春碱为内标，血浆样本前处理后，采用ESI-Positive-MRM模式，进样检测。将Beagle犬分为高中低剂量组（400、200、100 μg·kg^-1），给药后测定不同时间点犬血浆中雷公藤次碱的浓度，采用DAS3.0软件对雷公藤次碱药时曲线进行拟合，并计算药代动力学参数。结果 建立的UHPLC-MS/MS法在5.0-250 ng·mL^-1范围内雷公藤次碱色谱响应与浓度相关性良好，定量限为4.94 ng·mL^-1，雷公藤次碱及内标的保留时间分别为2.99、2.73 min，该方法无明显的离子抑制或增强效应，批内批间精密度及准确度RSD均小于15%，提取回收率在82.86%-112.76%之间，稳定性各项数据显示中、高浓度RSD均小于15%，低浓度RSD均小于20%，均符合要求。雷公藤次碱吸收较快，在Beagle犬体内的系统暴露随剂量的增大而增加，有呈比例增加的趋势；其消除与性别有关，与剂量无关。结论 该检测方法灵敏度高、专属性强、准确度良好，适用于犬血浆中雷公藤次碱的浓度测定及其药动学研究。