三叶崖爬藤查耳酮异构酶基因克隆与外源诱导表达及酶活性分析

目的 克隆三叶崖爬藤Tetrastigma hemsleyanum查耳酮异构酶（chalcone isomerase,CHI）基因,探究CHI基因对三叶崖爬藤黄酮合成途径的调控作用。方法 分析三叶崖爬藤转录组,获得三叶崖爬藤CHI基因序列,并进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定三叶崖爬藤根、茎、块茎、老叶、幼叶及吲哚-3-乙酸（3-indoleacetic acid,IAA）、茉莉酸甲酯（methyl jasmonate,MeJA）、脱落酸（abscisic acid,ABA）、水杨酸（salicylic acid,SA）和酵母提取物（yeast extract,YE）等诱导条件下CHI基因的表达量,利用分光光度法测定黄酮含量和CHI酶活性变化,并对其进行相关性分析。结果 转录组数据分析结果表明,三叶崖爬藤CHI基因全长为1 096 bp(GenBank序号：OQ588006),含有1个长为714 bp的开放阅读框,编码237个氨基酸。三叶崖爬藤CHI蛋白分子式为C1148H1819N285O348S5,等电点（PI）为5.28,相对分子质量为25 340,...