氮磷钾对马蓝营养生长与叶片有效成分含量的影响

马蓝Baphicacanthus cusia(Nees)Bremek.为爵床科板蓝属植物.马蓝是福建的道地药材之一,其加工制得的粉末或团块为青黛,称"建青黛"~([1]).青黛的有效成分为靛蓝和靛玉红.     

蝼蛄化学成分研究(Ⅰ)

蝼蛄是一味药用历史悠久的动物药。蝼蛄性寒，味咸，入大、小肠，膀胱经，主治各种水肿，大、小便不利，尿潴留，泌尿系统结石等杂症。东方蝼蛄Gryllotalpa orientalis Burmeister为我国的广布种，也是蝼蛄药材的主要商品品种，对于它的化学成分除氨基酸、微量元素外，其他成分尚未见报道。为了对其进行品质评价和进一步的开发利用，笔者对其化学成分进行了初步分离研究，首次从中分得脂肪酸和甾醇两大类13种化合物及苯乙酸。     

马蓝等79种植物分支酸合成酶的生物信息学分析北大核心CSCD

分支酸合成酶（ehorismate synthase,CS,EC：4．2．3．5）催化5-烯醇式莽草酸-3-磷酸生成分支酸,是生物体内分支酸合成所必须的酶。目前,Genbank报道了79种高等植物cS的氨基酸序列。该研究采用生物信息学方法对马蓝等79种植物共125条cs氨基酸序列的组成成分、信号肽、导肽、疏水性／亲水性、跨膜结构、卷曲螺旋结构、蛋白二级结构、三级结构及其功能域等进行预测和分析,并构建了cs蛋白家族的系统进化树。进化分析结果表明这79种植物的cs被分为8个类群;而氨基酸序列同源性比对结果显示,马蓝cs的氨基酸序列与芝麻、烟草、马铃薯等植物的同源性比较高。所有植物cs的开放阅读框在1300bp左右,相对分子质量为50kDa左右,等电点（pI）在5．0-8．0,呈微碱性。该研究克隆得到的马蓝cs的开放阅读框为1326bp,氨基酸残基数为442个,相对分子质量47kDa,等电点（pI）为8．11。CS氨基酸肽链表现出明显的疏水区和亲水区,不存在信号肽,可能存在跨膜结构域。蛋白质二级结构中最主要的结构元件是无规则卷曲和d．螺旋,并含有活性结构域、PLN02754保守域和FMN结合位点3个主要的组成结构域。研究所获得的结构信息,可为今后进一步深入研究植物cs的构效关系和结构改造提供一定的科学依据。     

马蓝等79种植物分支酸合成酶的生物信息学分析

分支酸合成酶(chorismate synthase,CS,EC:4.2.3.5)催化5-烯醇式莽草酸-3-磷酸生成分支酸,是生物体内分支酸合成所必须的酶。目前,Genbank报道了79种高等植物CS的氨基酸序列。该研究采用生物信息学方法对马蓝等79种植物共125条CS氨基酸序列的组成成分、信号肽、导肽、疏水性/亲水性、跨膜结构、卷曲螺旋结构、蛋白二级结构、三级结构及其功能域等进行预测和分析,并构建了CS蛋白家族的系统进化树。进化分析结果表明这79种植物的CS被分为8个类群;而氨基酸序列同源性比对结果显示,马蓝CS的氨基酸序列与芝麻、烟草、马铃薯等植物的同源性比较高。所有植物CS的开放阅读框在1 300 bp左右,相对分子质量为50 k Da左右,等电点(p I)在5.0~8.0,呈微碱性。该研究克隆得到的马蓝CS的开放阅读框为1 326 bp,氨基酸残基数为442个,相对分子质量47 k Da,等电点(p I)为8.11。CS氨基酸肽链表现出明显的疏水区和亲水区,不存在信号肽,可能存在跨膜结构域。蛋白质二级结构中最主要的结构元件是无规则卷曲和α-螺旋,并含有活性结构域、PLN02754保守域和FMN结合位点3个主要的组成结构域。研究所获得的结构信息,可为今后进一步深入研究植物CS的构效关系和结构改造提供一定的科学依据。     

蝼蛄化学成分研究(Ⅰ)

蝼蛄是一味药用历史悠久的动物药。蝼蛄性寒，味咸，入大、小肠，膀胱经，主治各种水肿，大、小便不利，尿潴留，泌尿系统结石等杂症。东方蝼蛄Gryllotalpa orientalis Burmeister为我国的广布种，也是蝼蛄药材的主要商品品种，对于它的化学成分除氨基酸、微量元素外，其他成分尚未见报道。为了对其进行品质评价和进一步的开发利用，笔者对其化学成分进行了初步分离研究，首次从中分得脂肪酸和甾醇两大类13种化合物及苯乙酸。     

佩兰的研究进展

佩兰,性辛、平,入脾胃经,具有芳香化湿和中、醒脾开胃、发表解暑之功效,是一种常用的化湿、解表中药。其用药历史悠久药用品种复杂。随着对其药用功效研究的深入,新的药用机理和功效不断发现。对于近来有关佩兰的研究作一概述,将有利于佩兰的进一步研究和临床应用。1佩兰名考及     

马蓝色氨酸合成酶基因的克隆及表达分析

目的 克隆马蓝Baphicacanthus cusia吲哚类生物碱合成途径的色氨酸合成酶（tryptophan synthase,TSB）基因,命名为BcTSB（GenBank登录号AYM45644.1）,对其生物信息学和表达进行分析。方法 基于前期马蓝转录组数据库,获得BcTSB基因开放阅读框（ORF）,运用生物信息学手段对基因功能做出初步预测,构建pET32a-BcTSB原核表达载体,并转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE检测。通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测马蓝不同组织（根、茎、叶）中TSB表达水平。结果 克隆的BcTSB基因ORF长度为1 452 bp,编码483个氨基酸,生物信息学预测为亲水性蛋白,定位于叶绿体,该蛋白相对分子质量为51 665.89,pET-32a载体包含18 000的标签。SDS-PAGE分析在70 000处出现目的蛋白条带,与理论预期值大小一致。qRT-PCR分析显示BcTSB基因在马蓝不同组织中均有表达,且在茎中的表达量最高。结论 通过对BcTSB基因的克隆及表达分析,为进一步研究该基因功能及调控奠定了实验基础。     

马蓝BcASB基因的克隆、生物信息学及表达分析

目的克隆马蓝邻氨基苯甲酸合成酶(anthranilate synthase,AS)BcASB基因(GenBank登录号QCF61930.1),并对其进行生物信息学分析、时空表达分析以及检测马蓝有效成分靛蓝、靛玉红积累量随时间的变化。方法通过RT-PCR和RACE技术,克隆BcASB基因全长,应用生物信息学的方法对该基因编码的蛋白进行各种理化性质测定,二级结构和三级结构预测分析以及对核苷酸和氨基酸序列进行比对;利用qRT-PCR技术检测BcASB基因在马蓝不同器官(根、茎、叶)中的表达模式以及在外源诱导子茉莉酸甲酯(methyl-jasmonate,MeJA)、脱落酸(abscisic acid,ABA)、水杨酸(salicylic acid,SA)和乙烯利(ethylene,ETH)诱导下的表达情况;同时运用HPLC测定吲哚类生物碱靛蓝、靛玉红含量的变化情况。结果克隆获得BcASB基因,开放阅读框(open reading frame,ORF)长度为765 bp,编码256个氨基酸,生物信息学表明,该蛋白不含信号肽且无跨膜区,亚细胞结构定位于叶绿体;qRT-PCR检测结果表明,BcASB基因在马蓝叶和茎中的表达量较高,在根中表达较低;BcASB基因可响应不同外源诱导处理,而影响其转录;HPLC检测结果显示靛蓝、靛玉红含量有着明显的变化。结论成功克隆马蓝邻氨基苯甲酸合成酶BcASB基因,为进一步阐释该基因在马蓝吲哚类生物碱合成途径的作用及表达调控研究奠定基础。