蛋氨酸脑啡肽联合5-氟尿嘧啶对肝癌细胞HepG2的增殖和凋亡的影响

目的 探讨蛋氨酸脑啡肽(methionine enkephalin,MENK)及蛋氨酸脑啡肽联合5-氟尿嘧啶对肝癌细胞HepG2的增殖和凋亡的影响.方法 采用MTS法检测细胞生长的抑制作用;Hoechst33258荧光染色法观察用MENK及MENK联合5-氟尿嘧啶处理后的HepG2细胞的形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 MENK(5 mmol/L)及MENK联合5-氟尿嘧啶(5 mmol/L+0.05 mmol/L)在用药24h后,对肝癌HepG2细胞具有显著的生长抑制作用(t=14.58、40.37,P＜0.05),在用药48 h后,抑制作用也非常明显(t=13.14、29.85,P＜0.05);Hoechst33258荧光染色后,MENK及MENK联合5-氟尿嘧啶处理组的细胞出现典型的凋亡形态学变化;流式细胞仪检测结果显示,与空白组比较,MENK组细胞凋亡率为15.6％(t=3.942,P＜0.05),MENK联合5-氟尿嘧啶处理组的细胞凋亡率为47.7％(t=17.19,P＜0.05).结论 MENK及MENK联合5-氟尿嘧啶对人肝癌细胞HepG2的生长具有抑制作用,并诱导细胞凋亡,且联合用药组的抑制作用强于单独用药组.     

HPLC法测定蛋氨酸脑啡肽含量

目的建立高效液相色谱法测定蛋氨酸脑啡肽含量。方法采用RP-HPLC法。色谱柱为J.T.Baker C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A为含体积分数0.1%三氟乙酸的去离子水,流动相B为含体积分数0.1%三氟乙酸的体积分数为60%的乙腈水溶液;流速为1.0 mL.min-1;检测波长为210 nm。结果蛋氨酸脑啡肽质量浓度在7~280 mg.L-1内线性关系良好(r=0.9998),平均回收率为98.54%,RSD为0.89%。结论此方法快捷、精确、重复性好,可用于蛋氨酸脑啡肽的含量测定。     

反相高效液相色谱法测定接骨胶囊中阿魏酸的含量

目的建立接骨胶囊中阿魏酸的含量测定方法。方法采用反相高效液相色谱法,色谱柱：Hypersil C18（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为甲醇-1％冰乙酸（33：67）,检测波长为320nm,流速为1．0mL／min。结果阿魏酸在0．12～1．2μg范围内呈良好的线性关系（r=0．9999）,平均回收率为99．6％,RSD=1．8％。结论该方法简便、准确,可用于控制接骨胶囊制剂的质量。