猪肾碱性磷酸酶的提纯及性质研究

目的：从猪肾中提取碱性磷酸酶(ALP)，并对其能否作为参考品进行研究。方法：从猪肾皮质中分离刷状缘微绒毛膜，用正丁醇溶解膜结合的酶，经硫酸铵沉淀，DEAE-Sephacel、ConA-Sepharose、Sephadex G-200及抗γ-谷酰基转移酶(GGT)免疫亲和层析提纯ALP。结果：提纯的ALP比活达402kU／g蛋白，几乎不含杂酶(未检出ALT、AST、ChE、AMY、CK、LDH，GGT仅含2U／780U ALP)。其对底物4-硝基磷酸酚(4-NPP)的Km值为1．35mmol／L，最适pH值为10．40。结论：提纯的猪肾ALP与人血清中的ALP酶动力学特性非常相似，为进一步研制ALP参考品奠定了基础。     

新生儿胆红素微量直接分光光度测定法

新生儿高胆红素血症在临床上受到高度重视,其血清胆红素浓度在高胆红素血症治疗中是必不可少的指标.鉴于新生儿高胆红素主要危害是间接胆红素增高,本文介绍一种微量、准确,适合于新生儿胆红素特点的直接分光光度测定方法。     

适用于各种标本的快速、准确的乳酸测定方法

我们对四唑盐显色法测定乳酸的反应机制及最适条件进行了研究。在相同条件下,单四唑盐INT 反应产物较不稳定,双四唑盐NBT 反应产物比较稳定。用本文设计的NBT浓度,克服了吸收峰随乳酸浓度增加转移的现象。用凝胶过滤法制成无乳酸的蛋白质溶液,合并使用Triton X-100,作促进剂及稳定剂,反应产物十分稳定。本法适用于各种生物液体,标本用量少(25μl),操作简单、快速,结果准确。此外,用自制的LDH,结果与Baker 制品一致。     

不受高脂血症影响的双缩脲试剂

历来所用的双缩脲试剂(BR),在遇到某些高脂血清时,因脂血增加540nm 处的内源性吸光度而产生正干扰.而这种干扰常用Chromy 报道的用丙酮处理脂血标本.鉴于处理脂血标本手续较烦,我们通过实验用KOH 代替NaOH,按Doumas 配方配制     

肝和骨ALP同工酶电泳分离的实验研究

本文用神经氨酸酶处理血清后,行聚丙烯酰胺垂直板电泳。肝ALP同工酶平均迁移率0.938,减低约6%;骨ALP同工酶平均迁移率0.793,减低的20％,两酶区带显著分离。实验结果证实了关于肝和骨ALP同工酶分子糖侧链结构和氨基酸末端唾液酸残基差异的学说,为临床提供一种鉴别肝和骨ALP同工酶的可靠方法。本法操作简单,节省试剂,图谱清楚,结果可靠,适宜临床实验室应用。     

国外无基质血红蛋白类血液代用品的研究现状和展望

无基质血红蛋白(Stroma free hem oglobin,SFH)类制品是当前国际上正在研究的三大血液代用品之一(见图1)。因为血红蛋白(Hb)取自血库过期的红细胞,它本身具有转输氧、排除二氧化碳、发挥胶性渗透压等效应,而且无血型,无乙型肝炎等感染因子,大量输注无体内积蓄毒,其冻干制品可长期保存。故而一般认为它比其它类型的血液代用品有独到的优点。至今已有十多个国家从事这项研究,或将此列为军事医学的重点研究项目。现将国外研究的现状和发展趋势概述如下。     

邻苯三酚红-钼酸钠法测定尿蛋白含量及随意尿蛋白质/肌酐比值的测定

据文献报道,随意尿中蛋白质和肌酐比值(Pr/Cr)与24小时尿蛋白含量有很好的相关性.我们参考有关文献,用邻苯三酚红—钼酸钠络合物比色法测定尿液蛋白含量,对尿蛋白测定中所用标准     

酶活性测定中4种K值的计算方法与应用价值

酶活性测定的计算及校正所用的Ｋ值 ,可分为 4种。其计算方法与应用价值不同 ,现讨论如下。1　理论Ｋ值 (设为ＫＴ)这是根椐带色原底物经酶促反应后游离的色原 ,或偶联氧化 (还原 )型辅酶Ⅰ (Ⅱ )系统中生成的还原型辅酶Ⅰ (Ⅱ )等指示物质 ,在一定波长下的理论摩尔吸光度 (ε) ,及酶测定计算公式中除所测△Ａ/ｍｉｎ外的各项数值计算得到的常数值。各试剂生产厂家给出的Ｋ值都属于此。其ε是文献记载的 ,如ＮＡＤＨ3 40ｎｍ,各家均用 6 .2 2× 10 3 。同一测定项目的同一方法 ,各厂家试剂盒Ｋ值的差别 ,是由于设置的样本与试剂体积比不同产…     

血液酸碱状态简易化学测定法(续)

血浆总二氧化碳(TCO)_2简易气量测测定法一、原理血浆中结合的CO_2(HCO_3、CO_3(?)及RNHCOO~-)经乳酸作用,释放出游离的CO_2(溶解的CO_2及H_2CO_3);连同血浆中原有游离的CO_2,用自行研制的简易气量装置测定。与同样处理的标准NaHCO_3比较,计算血浆TCO_2浓度。加入NH_4OH 溶液碱化血浆,使pH 在8.6～8.8,防止CO_2逸出。     

酶法分析非酶物质的基本理论及应用举例

１原理酶法分析即酶作为分析试剂，具有特异性高，不需先将测定的物质分离和提纯，反应条件温和，反应速度快等优点。必须了解酶对底物的特异性，从而预料可能发生的干扰反应并设法纠正。在以酶作分析试剂测定非酶物质时，也可用偶联反应；而且偶联反应的特异性，可以增加...