抗人内皮细胞生长抑制素单克隆抗体的制备和鉴定

研制抗内皮细胞生长抑制素（Endostatin，ES）单克隆抗体，为ES制剂提供更有效的质量控制手段和为内皮细胞抑制素介入基因治疗肿瘤提供临床评价工具。将重组的人ES蛋白纯化，免疫BALB／c小鼠，取ES蛋白免疫的小鼠脾细胞与小鼠骨髓细胞Ag8．653进行细胞融合，对杂交瘤细胞进行筛选，阳性孔经3次有限稀释法亚克隆，获得4株鼠抗人ES蛋白的杂交瘤细胞株，分别命名为：1C2、6C4、6134、6C5，以间接ELISA、Western免疫印迹等方法进行抗体鉴定。结果表明4株杂交瘤细胞分泌的单抗具有效价高，特异性好的特点，且免疫球蛋白亚型均为IgG1。其中1C2亲和力强，具有较高的应用价值。所得单克隆体具有一定的特异性和敏感性，可为ES的深入研究提供更好的条件。     

NO供体型呋咱类1-位氧代冬凌草甲素衍生物的合成及抗增殖活性

目的：为寻找新型一氧化氮（N0）供体型抗肿瘤候选药物,设计合成了一系列新型呋咱类1-位氧代冬凌草甲素衍生物。方法：首先合成不同呋咱类NO供体中间体（9a-i）,再将它们与1-位氧代冬凌草甲素（2）的14-位羟基进行缩合,得到一系列NO供体型呋咱类1,位氧代冬凌草甲素衍生物;用Griess实验测试硝酸盐／亚硝酸盐的含量,从而间接测试了NO释放量;同时采用MTT法测定了目标化合物对4种人肿瘤细胞株增殖的抑制活性。结果：所有呋咱类N0供体衍生物在体外60min时间点上都能释放大于19μmol·L-1的NO。活性最好的目标化合物10h对Bel-7402细胞的增殖抑制活性IC50值达到0．74μmol·L-1,优于阳性对照药紫杉醇;获得了初步构效关系信息。结论：利用NO供体和活性天然产物形成孪药分子有望成为发现新型抗肿瘤药物的途径之一。