二精丸对去卵巢+D-半乳糖联合Aβ1-40 致肾阴虚AD 大鼠海马多巴胺神经功能的影响

目的探讨二精丸对去卵巢+D-半乳糖联合 β-淀粉样蛋白 1-4（0 Aβ1-40）致肾阴虚阿尔茨海默病（AD）大鼠 海马多巴胺神经功能的影响。方法将56 只雌性SD 大鼠随机分为假手术组、模型组、二精丸高剂量组 （9.0 g·kg-1）、二精丸中剂量组（4.5 g·kg-1）、二精丸低剂量组（2.25 g·kg-1）。造模大鼠在卵巢摘除手术1 周后, 腹腔注射D-半乳糖（100 mg·kg-1）,每日1 次,持续7 周;卵巢摘除手术4 周后,双侧海马注射Aβ1-40 建立肾阴 虚AD 大鼠模型。卵巢摘除手术5 周后,各组按照相应剂量开始灌胃给药,模型组与假手术组灌胃等量生理盐 水,给药容量为10 mL·kg-1,每日1 次,连续30 d。末次给药1 h 后断头取海马组织,采用ELISA 法检测大鼠 海马组织多巴胺（DA）水平,采用免疫组化法检测大鼠海马CA1 区多巴胺D1 受体、酪氨酸羟化酶（TH）的表达 情况。结果与假手术组比较,模型组大鼠的海马组织DA 水平显著降低（P＜0.01）,海马CA1 区多巴胺D1 受体及TH 表达明显下调（P＜0.01）。与模型组比较,二精丸高剂量组大鼠的海马组织DA 水平明显升高（P＜ 0.01）;二精丸各剂量组大鼠海马CA1 区的D1 受体表达明显上调（P＜0.05,P＜0.01）;二精丸高、中剂量组大 鼠海马CA1 区的TH 表达明显上调（P＜0.05,P＜0.01）。结论二精丸能够提高海马组织的DA 水平,上调海马 组织的多巴胺D1 受体及TH 表达,促进去卵巢+D-半乳糖联合Aβ1-40致肾阴虚AD 大鼠的海马多巴胺神经功能。     

宽筋藤有效部位对D-半乳糖联合Aβ2535所致AD大鼠海马蛋白组学的影响

目的探讨宽筋藤大孔树脂提取物大孔树脂提取物体积分数80%,100%乙醇洗脱部位对D-半乳糖联合Aβ2535,所致阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马蛋白组表达的影响。方法采用D-半乳糖联合Aβ2535复制AD大鼠模型,随机分成假手术组、模型组、多奈哌齐组(多奈哌齐,6.0 mg·kg^-1)、宽筋藤80%提取部位组(生药量6 g·kg^-1)。多奈哌齐组灌胃多奈哌齐0.1mL·10 g^-1,给药宽筋藤有效部位组灌胃0.1 mL·10 g^-1,模型组与假手术组灌胃等容量的生理盐水,每日1次,连续给药15 d后分离大鼠海马提取蛋白,Nanol-ESI液相-质谱联用系统检测,Protein Discovery软件进行蛋白鉴定,SIEVE软件对海马蛋白进行相对定量定性分析PANTHER Classification System软件对差异蛋白进行GO分析,运用IPAD软件进行信号通路富集。结果后得结果与模型组相比,给药组大鼠共有66个差异蛋白包含微管蛋白、热休克蛋白、能量代谢相关蛋白、囊泡生成/转运相关蛋白和脑保护相关蛋白等与AD密切相关的蛋白以上差异蛋白共涉及21条信号通路。结论宽筋藤可能通过上调网格蛋白等与囊泡生成转运及神经递质释放相关蛋白,促进了神经递质的合成与释放,改善了脑内胆碱能功能来达到干预AD病理进程的作用。     

二精丸对去卵巢+D-半乳糖联合Aβ1-40所致肾阴虚AD大鼠海马蛋白质组学的影响

目的:探究二精丸对去卵巢+D-半乳糖联合β-淀粉样蛋白1-40(Aβ_(1-40))所致肾阴虚阿尔茨海默病(AD)大鼠生物学基础的影响。方法:大鼠去卵巢后随机分为5组,即模型组、多奈哌齐组、二精丸高、中、低剂量组,每组11只,另设11只为假手术组,术后1周,连续腹腔注射D-半乳糖7周,术后4周,单侧海马注射Aβ_(1-40)。术后3周开始灌胃给药,模型组与假手术组灌胃生理盐水,二精丸高、中、低剂量组分别用对应浓度灌胃给药(9. 0,4. 5,2. 25 g·kg~(-1)),多奈哌齐组灌胃1. 0 mg·kg~(-1)多奈哌齐,给药体积为10 mL·kg~(-1),每日1次,连续给药35 d。给药第31天,Y迷宫检测大鼠学习能力。末次给药后麻醉大鼠,分离大鼠海马,尼氏染色观察形态学。提取海马蛋白,Nanol-ESI液相-质谱联用系统检测蛋白,Protein Discovery软件鉴定蛋白,SIEVE软件对海马蛋白进行相对定量定性分析,PANTHER Classification System数据库对差异蛋白进行基因本体(GO)分析,String分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集信号通路。结果:与模型组大鼠比较,二精丸高、中剂量组大鼠Y迷宫正确交替率明显提高(P 0. 05),海马CA1区神经元数量明显提高(P 0. 01);二精丸高剂量组的差异蛋白(Ratio 1. 5或Ratio 0. 5)有胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)等115个,中剂量组差异蛋白有突触素等94个,多奈哌齐组差异蛋白有乙酰辅酶A乙酰转移酶等87个。GO分析发现这些蛋白主要分为微管相关蛋白、热休克蛋白、能量代谢相关蛋白等与AD相关蛋白;KEGG分析发现上述差异蛋白共涉及Dopaminergic synaps等93条信号通路。结论:二精丸可能是通过磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路、胰岛素信号通路、酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路、雌激素信号通路,Dopaminergic synapse等多条通路相关蛋白的表达,从而达到防治肾阴虚AD的目的。     

二至丸对去卵巢所致AD小鼠海马蛋白质组学的影响

目的:应用蛋白质组学方法探究二至丸对去卵巢所致阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)小鼠的生物学基础的影响。方法:小鼠去卵巢后随机分为4组,分别为模型组、阳性药组、二至丸高、低剂量组,每组14只小鼠,另设14只为假手术组,术后6周开始给药,二至丸高、低剂量组分别用对应药物灌胃给药(2,1 g·kg-1);阳性药组隔天皮下注射苯甲酸雌二醇0.02 mg;假手术组与模型组灌胃等容量的蒸馏水,每日1次,持续给药32 d。取小鼠海马组织,提取蛋白,Nanol-ESI液相-质谱联用系统检测蛋白,Protein Discovery软件鉴定蛋白,SIEVE软件对海马蛋白进行相对定量定性分析。PANTHER Classification System对差异蛋白进行基因本体(GO)分析,京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集信号通路。结果:与模型组相比较,正常组、二至丸高、低剂量组小鼠共有80多个差异表达蛋白,通过GO分析分析发现这些蛋白可分为微管蛋白、热休克蛋白、能量代谢相关蛋白和脑保护相关蛋白等与AD相关的蛋白;KEGG分析发现以上差异蛋白共涉及20条信号通路,以上差异蛋白可能是二至丸防治AD的靶点蛋白。结论:二至丸可能通过促进能量代谢与囊泡运输,同时减少Aβ的生成与神经细胞的氧化损伤来达到治疗AD的作用。     

基于网络药理学挖掘巴西人参的核心功效＊

目的 基于网络药理学方法挖掘巴西人参核心药效，结合动物实验验证其抗疲劳作用。方法 通过文献检索方法收集巴西人参的化学成分，运用Discovery studio软件筛选类药性成分，通过Swiss target Prediction数据库对类药性成分预测分析关键靶点，并对预测靶点进行蛋白质相互作用关系分析，采用Cytoscape 3.6.1软件中的MCODE插件筛选出PPI网络中的核心靶点，通过DAVID数据库对核心靶点进行生物信息学分析。将小鼠随机分为空白对照组、阳性对照组、巴西人参高、低剂量组，各组小鼠给药15天后进行转棒实验及负重游泳实验，检测小鼠血清乳酸、肝糖原含量，考察各组小鼠抗疲劳能力。结果 网络药理学结果提示巴西人参主要有调节甾体类激素以及物质代谢的作用；巴西人参高剂量组能够显著延长小鼠的转棒疲劳时间以及力竭游泳时间（P < 0.05或P < 0.01）；巴西人参高、低剂量组均能够显著降低血清中乳酸堆积、增加肝糖原的含量（P < 0.05或P < 0.01）。结论 巴西人参具有多成分、多靶点、多途径的作用特点，其核心功效可能为抗疲劳以及增强性功能作用；动物实验结果表明巴西人参具有良好抗疲劳效果，其机制可能为促进机体内乳酸的转化，增加体内储能物质即肝糖原的储备。     

基于网络药理学的牛膝防治阿尔茨海默病的物质基础与作用机制研究

目的基于网络药理学及分子对接技术预测牛膝防治阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的主要活性成分及作用靶点,探讨其"多成分-多靶点-多通路"的作用机制。方法收集DrugBank和文献报道中AD的治疗靶点,依据中药系统药理学技术平台(TCMSP)构建牛膝的化学成分库;运用DiscoveryStudio3.5软件进行分子对接,虚拟筛选牛膝中与AD的靶点结合的化学成分集;通过KEGG数据库对虚拟筛选到的关键靶点进行通路富集分析,采用Cytoscape 3.2.1软件构建牛膝的"成分-靶点-通路"网络。结果从牛膝中筛选出58个化合物,多为小分子烷烃、酯类和羧酸类化合物,其次为黄酮类、蒽醌类等。这些有效成分可能通过调节Ca MK-IIα、Ca MK-IIβ、Ca MK-IIγ、Akt1和TNF-α等36个AD发病机制的潜在靶蛋白而发挥作用,涉及MAPK signaling pathway、Wnt signaling pathway等12条通路。结论牛膝中黄酮类、蒽醌类等活性成分可能是其治疗AD的物质基础,其作用机制涉及抗炎、抗细胞凋亡等。     

网络药理学探究二至丸防治阿尔茨海默病的物质基础与作用机制

该研究采用网络药理学的方法,将阿尔茨海默病的关键靶点与二至丸化合物进行分子对接,通过Cytoscape 3.2.1软件,建立成分-靶点、靶点-信号通路网络模型进行网络分析,探讨二至丸防治阿尔茨海默病的物质基础与作用机制。模拟筛选出来的30个化合物与阿尔茨海默病关键靶点及靶点集中所在的Wnt,MAPK,PI3K-Akt-mTOR 3条信号通路均有很强的相互作用,其中有槲皮素、香叶醇、β-谷甾醇、橙花醇、圣草酚5个成分可通过文献验证,初步揭示了二至丸防治阿尔茨海默病的物质基础及其在3条信号通路上的作用机制。通过网络药理学方法发现,二至丸防治阿尔茨海默病的活性成分可能是槲皮素、香叶醇、β-谷甾醇、橙花醇、圣草酚,其作用机制可能与Wnt,MAPK,PI3K-Akt-mTOR 3条信号通路有关。