肾损伤因子-1在脂多糖诱导的HK-2细胞炎症反应中的作用

目的：分析肾损伤因子-1（KIM-1）在脂多糖（LPS）诱导HK-2细胞炎症模型中的表达并探讨其可能参与的生物学进程。方法：LPS刺激人肾小管上皮HK-2细胞诱导细胞炎症模型,CCK-8比色法分析LPS对HK-2细胞株体外生长的抑制作用;RT-PCR和Western blot实验分析KIM-1在正常组和LPS诱导组中的表达差异;设计siRNA靶向干扰KIM-1基因的表达,分析其对LPS诱导下HK-2细胞生长抑制作用的影响;Hoechst33342/PI双染法分析LPS诱导下对照组和siRNA干扰组细胞凋亡的影响。结果：50、100 μg/mL终浓度的LPS处理24 h和48 h后能抑制HK-2细胞增殖,与对照组比差异有统计学意义（P＜0.05）;KIM-1和IL-6基因和蛋白表达水平在LPS处理组中较对照组明显上调,且具有浓度依赖性,差异有统计学意义（P＜0.05）;LPS处理组中Hoechst33342染色阳性细胞比例明显高于对照组;siRNA转染组中KIM-1和IL-6基因和蛋白表达水平均明显低于siRNA-NC组,在LPS作用下siRNA转染组HK-2细胞增殖率明显高于siRNA-NC组,差异有统计学意义（P＜0.05）;在siRNA转染组中,Hoechst33342染色强度均低于siRNA-NC组,提示靶向KIM-1基因siRNA转染可以抑制LPS诱导的细胞凋亡作用。结论：LPS可以诱导HK-2细胞增殖受抑和凋亡,并且上调KIM-1和IL-6基因表达;KIM-1可能通过调节细胞凋亡和生长抑制过程参与细胞炎症反应。     

沙利度胺对IL-1β介导的支气管上皮细胞炎症反应的影响

目的探讨沙利度胺干预对IL-1β介导的人支气管上皮细胞株HBE细胞炎症反应的影响和可能参与的信号分子。方法通过炎症因子IL-1β处理HBE细胞,体外建立支气管上皮细胞炎症模型。MTT法检测IL-1β处理对HBE细胞的活力;DAPI/PI荧光染色和荧光显微镜下观察IL-1β处理和沙利度胺干预后HBE细胞形态变化和细胞凋亡情况;RT-PCR和Westernblot法检测HBE细胞中血管内皮生长因子（VEGF）和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）mRNA和蛋白表达水平。结果不同浓度IL-1β处理后,HBE细胞的活力没有受到明显抑制,但发生形态变化并出现胞核聚集,PI染色发现50ng/mlIL-1β处理组阳性细胞数明显多于对照组和5滋g/ml沙利度胺干预组。5、10和50ng/mlIL-1β处理HBE细胞后VEGF和HMGB1mRNA表达水平较对照组均上调（均P＜0.05）;10滋g/ml沙利度胺干预组HMGB1mRNA表达水平较5、10和50ng/mlIL-1β处理组均下调,5、10滋g/ml沙利度胺干预组VEGFmRNA表达水平较5、10和50ng/mlIL-1β处理组均下调（均P＜0.05）。50ng/mlIL-1β处理组VEGF蛋白表达水平较对照组上调,5、10和50ng/mlIL-1β处理组HMGB1蛋白表达水平均较对照组上调（均P＜0.05）;5、10滋g/ml沙利度胺干预组VEGF和HMGB1蛋白表达水平较5、10和50ng/mlIL-1β对照组均上调（均P＜0.05）。结论IL-1β可以诱导HBE细胞发生炎症损伤以及相关炎症因子表达;沙利度胺可以抑制IL-1β诱导的HBE细胞炎症损伤,其机制可能与抑制VEGF和HMGB1的表达有关。     

基于万全“四不足”的儿童体质学说探讨小儿慢性咳嗽的证治规律

"四不足"是万全在钱乙"脏腑虚实辨证"和朱丹溪"阳有余,阴不足"的基础上,提出小儿"肺常不足、脾常不足、肾常虚、阴常不足"的临床特点。基于此观点可知,小儿慢性咳嗽的病因病机应为肺常不足、娇脏易伤;脾常不足,土不生金;肾阴不足,水不制火;阴常不足,肺津耗伤。临证时,若属肺常不足,应治以益气固表,补肺散邪之玉屏风散;若属脾常不足,应治以培土生金、健脾化痰之二陈汤;若属肾常虚,应治以滋阴降火之六味地黄丸合补肾温肺之核桃仁、蛤蚧等;若属阴常不足,应治以益气养阴,生津润燥之沙参麦冬汤。     

基于文献挖掘的过敏性紫癜动物模型应用特点分析及建模思考

目的 研究过敏性紫癜动物模型的造模特点,为其动物模型的规范化提供计量参考。方法 在中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库、PubMed及Web of Science数据库检索过敏性紫癜动物模型相关文献,归纳实验动物品系、年龄、性别、造模方法、成模周期、阳性对照药、检测指标等,构建数据库并进行规范整理、分析。结果 共纳入符合标准的46篇文献,包含动物模型实验研究52例。实验动物多选择6周龄、3～4周龄的SD大鼠或3～4周龄、8周龄的KM小鼠,性别多选择雄性或雌雄各半。模型以病证结合复合模型和模拟IgA肾病模型多见;常用造模方法为尾静脉注射印度墨水+灌胃和尾静脉注射麦胶蛋白溶液、灌胃/口服干姜、胡椒、荜茇+腹腔注射卵白蛋白和弗氏完全佐剂混合液+尾静脉/耳缘静脉和皮内注射卵白蛋白0.9%氯化钠溶液;造模周期以14、6、12周多见。阳性对照药应用最多的是西咪替丁、双嘧达莫、雷公藤多苷片。高频检测指标依次为血清相关生化指标、肾组织病理、24 h尿蛋白、肾组织免疫组化、表观指标、尿常规、皮肤组织病理等。结论 目前过敏性紫癜动物模型制备方法多样,病证结合复合模型与中西医临床特点吻合度较高,但缺...     

黄柏碱改善脓毒症大鼠急性肾损伤的作用及机制研究

目的：考察黄柏碱对脓毒症大鼠急性肾损伤的保护作用及其机制。方法：取 50 只 SD 大鼠随机分为假手术组、模型组、黄柏碱低剂量组（100 mg/kg）、黄柏碱高剂量组（200 mg/kg）及氨苄青霉素钠组（150 mg/kg）,每组 10 只。除假手术组外,各组采用盲肠结扎穿孔术（CLP）建立脓毒症大鼠模型。术后 24 h,试剂盒检测血清肌酐（Cr）和尿素氮（BUN）的水平,ELISA 法检测血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、肾损伤分子 1（KIM-1）、白细胞介素 -6（IL-6）、白细胞介素 -1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子 -α（TNF-α）,HE 染色法检测肾脏病变情况,免疫印迹法检测肾组织中 Toll样受体 4(TLR4) 及 Nod 样受体蛋白 3(NLRP3) 蛋白的表达。结果：与脓毒症大鼠比较,黄柏碱可明显降低大鼠血清中 Cr、BUN、NGAL 及 KIM-1 含量,抑制炎性因子（IL-6、IL-1β及 TNF-α）的释放,改善肾脏病理变化,同时可明显降低肾组织中 TLR4 及 NLRP3 的表达水平（P < 0.05）。结论：黄柏碱可通过调控 TLR4/NLRP3 信号通路降低体内炎症因子水平,从而对脓毒症所致急性肾损伤发挥保护作用。     

中医药治疗儿童过敏性紫癜的研究进展

过敏性紫癜( henoch-Sch?nlein purpura,HSP)又称IgA 血管炎,以非血小板减少性皮肤紫癜,腹痛、关节痛,呕血、便血等消化道黏膜出血及血尿、蛋白尿等肾脏损伤为主要临床表现[1].其中30％ ～50％ HSP患儿会出现肾脏损害,称为紫癜性肾炎(henoch-Sch?nlein purpura n...     

预测脓毒症急性肾损伤短期不良预后列线图的构建

目的建立个体化预测脓毒症急性肾损伤（SA-AKI）短期不良预后（30d病死）的列线图模型。方法以2016年3月至2019年5月入住急诊重症监护室的318例SA-AKI患者为研究对象,根据30d预后情况分为病死组225例和存活组93例。采用多因素logistic回归分析法筛选SA-AKI患者30d病死的影响因素,建立预测SA-AKI短期不良预后的列线图模型。结果年龄、真菌感染、APACHEⅡ评分、SOFA评分、抗凝血酶-Ⅲ、AKI分期是SA-AKI患者短期不良预后的独立危险因素（均P＜0.05）;以这些因素为变量建立SA-AKI短期不良预后列线图。对列线图模型进行验证,初始AUC为0.943,经1000次模型内部验证后为0.945,区分度良好;校正曲线提示观察值与预测值的一致性良好。结论基于6个影响因素（年龄、真菌感染、APACHEⅡ评分、SOFA评分、抗凝血酶-Ⅲ、AKI分期）构建的列线图,能较为准确地预测SA-AKI患者短期不良预后发生的风险,有助于尽早采取干预措施,从而改善患者的预后。     

基于DNA甲基化探究祛风消癜方治疗过敏性紫癜风热伤络证的作用机制

目的 探究祛风消癜方在DNA甲基化层面治疗过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura, HSP)风热伤络证的作用机制。方法 选取2018年5月至2019年12月河南中医药大学第一附属医院初发HSP风热伤络证患儿5例、健康志愿者5例，分别采集患儿治疗前后和健康儿的空腹静脉血，应用Illumina850K基因芯片对其进行检测，筛选甲基化差异位点、差异基因并对其进行分析。结果 风热伤络证患儿经祛风消癜方治疗前后共注释到90个差异基因，其中63个基因发生甲基化水平上调、27个基因甲基化水平下调。KEGG Pathway富集分析：差异基因富集于EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性、药物代谢-细胞色素P450、RNA转运、5-羟色胺能突触、FoxO信号通路等，其中FoxO信号通路富集的差异基因为BRAF、IL7R。结论 祛风消癜方可能通过调节FoxO信号通路，使IL7R基因表达上调、BRAF表达下调，双重调控异常的高甲基化和低甲基化状态，影响机体细胞分化/凋亡、白细胞活化与免疫应答等过程，抑制Th17/Treg细胞免疫失衡以发挥其对HSP风热伤络证的干预作用。     

基于肺肾相关探讨小儿肾病综合征感邪易发及防治

小儿肾病综合征之频复发与正气亏虚、易感外邪密切相关。肺肾两脏在生理病理上互资互传,从"肺肾相关"理论探讨其防治,应把握病因病机,注意补其肺气,固肾之阴阳,清咽之伏毒,使阴阳气血平衡。辨治上轻重兼顾,标本兼施,调其体质,增强机体调节能力,减少复发。     

慢性阻塞性肺疾病急性加重期外周血中NK细胞激活受体和抑制受体表达与肺功能的相关性分析

目的 探讨NK细胞激活受体与抑制受体在慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）患者外周血中的表达水平及与患者肺功能的相关性。方法 收集并分离慢性阻塞性肺疾病（COPD）和慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）患者以及健康志愿者外周血单个核细胞,运用荧光定量PCR分析NK细胞激活受体（NKG2D）和抑制受体（NKG2A）表达水平并分析与患者肺功能和动脉血气的相关性。结果NKG2D基因在COPD组和AECOPD组中表达上调,AECOPD组明显高于COPD组,差异有统计学意义（P<0.05）;NKG2A基因在COPD组和AECOPD组中表达下调,AECOPD组明显低于COPD组,差异有统计学意义（P<0.05）;NKG2D表达水平与患者的FEV1%、FEV1/FVC和PaO2呈负相关,NKG2A表达水平与患者的FEV1%、FEV1/FVC和PaO2呈正相关,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 AECOPD患者外周血NK细胞激活受体和抑制受体的表达可能与患者病情进展具有相关性。