走马胎中三萜皂苷成分H1对6株肿瘤细胞增殖及对A549肺癌细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:研究紫金牛科紫金牛属植物走马胎Ardisia gigantifolia中的三萜皂苷成分H1对不同肿瘤细胞株增殖的影响,并检测H1对A549肺癌细胞凋亡及细胞周期的影响。方法:以细胞密度为3×107/L细胞悬液每孔90μL接种于96孔板中,培养24 h后,各组分别加入不同浓度(终浓度分别为0,1.25,2.5,5,10,20μmol·L-1)的H1药液分别作用于MCF-7,HepG2,HeLa,A549,Bel-7402,BGC-823肿瘤细胞株24,48,72 h,并设阴性对照组。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT比色法)检测H1对肿瘤细胞株增殖的影响,筛选对H1敏感的细胞株,用荧光倒置生物显微镜观察细胞形态学变化、采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果:H1作用于MCF-7,HepG2,HeLa等6株肿瘤细胞24,48,72 h后的IC50为4.26~6.45μmol·L-1,其中A549细胞株对H1最为敏感。终浓度为0,1.25,2.5,5μmol·L-1的H1干预A549细胞24 h后,中、高剂量组的细胞凋亡形态明显,发生早期凋亡;总凋亡率分别为2.2%,7.0%,14.2%,56.4%,各剂量组与正常组比较均有统计学意义;细胞阻滞发生在G2期,使S期急剧增加。结论:H1对6种肿瘤细胞株有一定程度的抑制作用,对A549细胞增殖的抑制作用较显著,其诱导A549细胞的凋亡机制可能与对细胞周期阻滞有关。     

乌司他丁治疗重症脓毒症患者的临床效果观察

目的 探讨乌司他丁治疗重症脓毒症患者的临床效果。方法 90例重症脓毒症患者,基于随机数字表法分为对照组和研究组,各45例。对照组给予常规治疗,研究组在对照组基础上给予乌司他丁治疗。比较两组患者治疗前后降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平。结果 治疗后,两组患者PCT、CRP、LDH、CK-MB、Cr、BUN水平均低于治疗前,且研究组患者PCT(0.83±0.18)μg/L、CRP(6.43±1.25)mg/L、LDH(135.23±15.05)U/L、CK-MB(11.23±1.25)U/L、Cr(105.41±10.08)μmol/L、BUN(5.34±0.23)mmol/L均低于对照组的(1.35±0.13)μg/L、(10.32±1.56)mg/L、(180.35±20.43)U/L、(15.32±1.36)U/L、(153.25±13.43)μmol/L、(7.85±0.36)mmol/L,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 乌司他丁可减轻重症脓毒症患者机体的炎性损伤,改...     

HPLC-ELSD同时测定走马胎中3种三萜皂苷含量

目的建立同时测定走马胎中3种三萜皂苷类成分的RP-HPLC-ELSD方法。方法选用HPLC Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:甲醇55%CH3OH⁹0%CH3OH梯度洗脱40 min,流速0.8 mL·min-1。Althche 2000ES ELSD检测器,漂移管温度:100。C,空气流速2.8 L·min-1。结果结果表明3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(a),3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-6-O-乙酰基吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(b),3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)--D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-16-羟基-13,28-环氧-齐墩果烷(c)的检测分别在3.00090%CH3OH梯度洗脱40 min,流速0.8 mL·min-1。Althche 2000ES ELSD检测器,漂移管温度:100。C,空气流速2.8 L·min-1。结果结果表明3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(a),3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-6-O-乙酰基吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-西克拉敏A(b),3-O-{-L-吡喃鼠李糖基-(1→3)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→3)--D-吡喃木糖基-(1→2)]--D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-[-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)]--L-吡喃阿拉伯糖基}-16-羟基-13,28-环氧-齐墩果烷(c)的检测分别在3.000⁹.000μg,8.6859.000μg,8.685³7.635μg,3.30037.635μg,3.300¹0.450μg线性关系良好。药材中三种成分的平均回收率(n=9)为99.64%(RSD 0.78%),99.93%(RSD 0.65%),100.07%(RSD 1.37%)。结论该方法操做简单、结果准确具有较好的重复性和稳定性,为走马胎药材质量控制提供了一个很好的依据。