当药苷调节兴奋-收缩耦联改善心肌缺血再灌注损伤的机制

目的 探索当药苷通过兴奋-收缩耦联信号通路对缺血再灌注损伤后心脏收缩/舒张功能的影响。方法 24只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、10 μmol·L^-1当药苷给药组与1 μmol·L^-1地高辛给药组，并采用Langendorff系统结合左前降支冠状动脉结扎建立缺血再灌注损伤模型（I/R），2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色检测各组心脏梗死面积，Powerlab生理记录仪检测血流动力学参数，如左心室舒张压（LVDP）、左心室终末舒张压（LVEDP）、左心室终末收缩压（LVESP）、左心室内压最大上升速率（+dp/dt_max）和左心室内压最大下降速率（-dp/dt_max）；提取分离乳鼠原代心肌细胞（NRCMs），建立缺氧/复氧（H/R）损伤模型，随机分为正常组、模型组、1 μmol·L^-1当药苷给药组和10 μmol·L^-1当药苷给药组，多功能成像细胞分析仪和激光共聚焦显微镜测定各组心肌细胞活力、心率、收缩幅度、收缩时程、达峰时程和舒张时程及钙瞬变峰值。根据前期转录组学测序结果及文献调研，利用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测L型钙通道相关基因（Cacnb2），细胞色素C氧化酶相关基因（Cox6a2），肌钙蛋白（Tnnc1、Tnni3、Tnnt2）、肌动蛋白（Actc1）、肌球蛋白（Myh6、Myl2、Myl4）等兴奋-收缩耦联通路基因的mRNA表达并对差异基因进行聚类分析。结果 与正常组比较，模型组心肌梗死面积显著增加（P<0.01）、LVDP显著降低（P<0.01）、LVEDP显著上升（P<0.01）、LVESP明显下降（P<0.05）、+dp/dt_max有下降趋势和-dp/dt_max上升趋势及心肌细胞活力降低、心率降低、收缩幅度降低、收缩时程升高、达峰时程升高和舒张时程升高（P<0.01），而当药苷可以逆转上述指标（P<0.05）。此外，心肌细胞经H/R损伤后，Cacnb2、Cox6a2、Tnnc1、Tnni3、Tnnt2、Actc1、Myh6、Myl2、Myl4等兴奋-收缩耦联通路的基因表达下降（P<0.05、P<0.01）。而使用当药苷预处理后，可以增强上述基因的表达（P<0.05）。结论 当药苷通过调节兴奋-收缩耦联信号通路，从而调节原代乳鼠心肌细胞内钙离子水平，增强心肌收缩功能，对抗I/R损伤。     

缺血性脑卒中气虚证动物模型的建立

目的:建立缺血性脑卒中动物模型后,动态观察动物模型疾病发生后不同时间窗的证候,明确模型动物气虚证出现的时间窗.方法:首先依据临床意义相似性,将临床脑卒中及气虚证的诊断指标进行等效转化,建立动物模型诊断指标,再采用线栓法建立缺血性脑卒中动物模型后,动态采集动物气虚证诊断相关指标,对各阶段模型的气虚证特征数据进行分析、聚类...     

心力衰竭气虚证动物模型的建立与评价

目的 建立心力衰竭气虚证的病证结合小鼠模型,并对其进行评价。方法 将44只昆明种（KM）小鼠随机分为假手术组、模型组、四君子汤加减组（12.89 g·kg^-1）。模型组及四君子汤加减组给予主动脉弓缩窄术（TAC）处理,假手术组只穿线不缩窄。采用超声心动图、病理学检测对心力衰竭进行疾病模型判断及药效学评估;从宏观表征、微观生物学、方剂反证3个层面分别对小鼠的一般性体征、体质量、旷场、抓力、线粒体超微结构等宏、微观表征进行采集,并测定线粒体分裂、融合蛋白表达,以判断证候类型。结果 TAC术后8周,相较于假手术组,模型组心脏左室射血分数（LVEF）显著降低（P<0.01）,四君子汤加减可显著改善小鼠LVEF（P<0.05）。心脏苏木素-伊红（HE）染色结果显示,模型组出现炎性细胞浸润及血管壁增厚,四君子加减可显著改善炎性细胞浸润。在6~8周,相较于假手术组及四君子汤加减组,模型组小鼠出现显著的毛发不齐,毛发枯黄、活跃度降低及精神萎靡的情况。同时与假手术组比较,模型组体质量增长值明显降低（P<0.05）;与模型组比较,四君子汤加减组体质量增长值明显上升（P<0.05）。在6~8周,与假手术组比较,模型组旷场距离及旷场速度均明显下降（P<0.05）,而四君子汤加减组在第8周明显改善旷场距离及旷场速度（P<0.05）。在6~8周,与假手术组比较,模型组抓力最大值明显下降（P<0.05）,而四君子汤加减组TAC术后8周抓力最大值明显增加（P<0.05）。腓肠肌透射电镜显示,模型组肌组织基质不均匀,线粒体肿胀,体积变大,基质溶解,嵴缺失,空泡化;四君子汤加减组可改善线粒体肿胀,嵴断裂,基质空化。蛋白免疫印迹法（Western blot）结果显示,与假手术组比较,模型组小鼠腓肠肌分裂蛋白动力相关蛋白1（DRP1）表达显著增高（P<0.01）,线粒体融合素1（MFN1）表达明显降低（P<0.05）。同时与模型组比较,四君子汤加减组小鼠腓肠肌分裂蛋白DRP1表达明显降低（P<0.05）,MFN1表达显著升高（P<0.01）。结论 TAC术后小鼠6~8周出现显著的气虚证候表现,同时伴随腓肠肌线粒体形态功能异常,而四君子汤加减可显著改善这一过程。     

基于代谢组学探究鸡鸣散改善射血分数保留的心力衰竭的作用机制

该研究采用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术，进行非靶向代谢组学研究，分析了鸡鸣散干预高脂饮食(high-fat diet, HFD)和一氧化氮合成酶抑制剂(Nω-nitro-L-arginine methyl ester hydrochloride, L-NAME)诱导的射血分数保留的心力衰竭(heart failure with preserved ejection fraction, HFpEF)小鼠血浆中的潜在生物标志物，探究鸡鸣散改善HFpEF的药效和作用机制。随机将8周龄雄性C57BL/6N小鼠分为对照组、模型组、恩格列净组(10 mg·kg^-1·d^-1)、鸡鸣散高剂量组(14.3 g·kg^-1·d^-1)和鸡鸣散低剂量组(7.15 g·kg^-1·d^-1),对照组予以低脂饲料，模型组和各给药组予以高脂饲料，各组小鼠均自由饮水，模型组和给药组的小鼠饮水中加入一氧化氮合酶抑制剂(0.5 g·L^-1),从造模第1天开始给药...     

巨噬细胞在心力衰竭中的作用及中医药干预研究进展

心力衰竭作为世界上高发病率和高病死率的疾病之一，严重影响人类社会的健康发展，目前，针对心力衰竭的治疗手段有限，迫切需要发现新的疾病治疗靶点，开发新的治疗策略。巨噬细胞作为伴随心力衰竭发生发展的先天免疫细胞，在维持心脏稳态，调控心脏应激等方面发挥着重要作用。近年来，巨噬细胞在心脏中的作用受到了越来越多的关注，成为干预心力衰竭的潜在靶点，随着技术手段的提高，巨噬细胞参与心力衰竭的研究取得了重要进展。中医药在调节炎症反应、防治心力衰竭、维持机体稳态方面具有显著疗效。该文从心脏巨噬细胞来源及分类、巨噬细胞与心脏炎症、巨噬细胞与心肌纤维化、巨噬细胞与心脏血管生成和巨噬细胞与心脏电传导等5个方面将近年来心脏巨噬细胞在心力衰竭的作用及中医药的应用进行归纳总结，为后续的基础研究和临床应用提供思路。