急性肺损伤时Ⅱ型肺泡上皮细胞相关基因的生物信息学分析

目的探索多种因素致急性肺损伤(acute lung injury, ALI)/急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome, ARDS)时Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar type Ⅱ, ATⅡ)损伤的相关分子标志物, 为ALI/ARDS的疾病认知及治疗提供新依据。方法从美国国立生物技术信息中心公共数据GEO获得RNA-Seq数据集, 应用R语言包筛选差异表达基因(DEGs), 进行GO功能注释和KEGG富集分析。通过STRING数据库和Cytoscape软件计算蛋白互作网络分析中节点度排名前10及MCODE得分最高模块, 取交集为核心基因, 通过DGIdb数据库预测其潜在治疗药物。结果最终在不同的数据集中筛选出了78个共表达DEGs。GO分析发现其产物主要作为宿主细胞成分及蛋白酶体核心复合体等参与粒细胞迁移、细菌源性分子反应及细胞因子介导的信号通路等生物学过程, 具有细胞因子活性、趋化因子活性及受体-配体活性等。KEGG分析发现其相关通路主要为TNF信号通路、NF-κB信号通路及细胞因子-细胞因子受体作用信号通路等;蛋白网络分析最终确定...     

麻杏二陈止咳颗粒质量标准研究

目的：建立麻杏二陈止咳颗粒（麻黄,陈皮,甘草）的质量标准并进行颗粒剂型的常规检查。方法：对麻杏二陈止咳颗粒进行粒度、水分、干燥失重、溶化性、装量差异、微生物限度检查。薄层色谱法（TLC）对陈皮和甘草进行定性鉴别;高效液相色谱法（HPLC）对马兜铃酸Ⅰ（C17H11NO7）进行限量检查,对盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱进行含量测定。结果：麻杏二陈止咳颗粒的粒度、水分、干燥失重、溶化性、装量差异、微生物限度检查均符合《中华人民共和国药典》2015年版的相关规定;确定每克该颗粒中马兜铃酸Ⅰ（C17H11NO7）不得超过0.66 μg;陈皮和甘草的TLC斑点清晰,阴性无干扰;HPLC色谱中阴性对照无干扰;盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱分别在10.04~100.4 μg、5.14~61.68 μg/mL范围内线性关系良好（r=0.999 9）,平均加样回收率分别为101.50%（RSD=1.15%）、100.68%（RSD=1.97%）。结论：该方法准确、稳定、可行,可用于麻杏二陈止咳颗粒的质量控制。     

急性百草枯中毒小鼠肺损伤机制的蛋白组学分析

目的:探索百草枯（paraquat，PQ）肺损伤的分子机制。方法:6至8周龄的C57BL/6雄鼠按照完全随机化分组的方法分为四组，实验组（共3组，每组9只）经腹腔注射40 mg/kg PQ建立染毒模型，对照组（9只）小鼠腹腔注射同等剂量生理盐水。PQ注射后2 d、7 d和14 d，分别麻醉后处死小鼠取出肺组织，苏木精-伊红染色法（HE）观察肺组织的病理变化，并应用串联质谱标记技术(tandem mass spectrometry tag technology, TMT)分析各时间点实验组与对照组比较，肺组织中差异蛋白表达情况，并进行功能性分析。结果:与对照组比较，PQ-2 d、7 d、14 d分别有91个（69升高，22降低）、160个（103升高，57降低）和78个（45升高，33降低）蛋白的差异表达有统计学意义；亚细胞定位结果显示，与对照组相比，PQ-2 d和PQ-7 d组差异蛋白均以细胞外分布最多，而PQ-14d组中差异蛋白位于细胞核内最多；GO分析显示，与对照组相比，PQ-2d和7 d以体液免疫和凝血相关的反应为主，PQ-14d以中性粒细胞聚集等趋化和调控反应为主；KEGG分析显示，补体-凝血级联在PQ-2 d和7 d组中占据首要地位，而PQ-14 d组中以细胞色素P450对异生物的代谢途径为首。结论:本研究应用TMT技术对PQ中毒小鼠不同时间点的肺脏进行蛋白组学分析，从蛋白分子角度揭示了PQ肺损伤的分子机制，发现并提出体液免疫和补体-凝血途径是PQ肺损伤的关键，为后续临床研究和治疗方向提供了重要的理论基础。     

青天葵ISSR-PCR体系优化及引物筛选

目的:建立适合青天葵遗传差异分析的简单重复序列区间(ISSR)-聚合酶链式(PCR)反应体系。方法:采用正交试验设计对影响青天葵ISSR-PCR反应体系的5种因素(dNTP、模板DNA、引物、Mg2+和Taq DNA聚合酶)4个水平进行优化,并结合新复极差法,对试验中各单因素进行分析。结果:确立了青天葵最佳反应体系,即在20μL的总反应体积中含有10×PCR buffer 2μL,dNTP 225μmol·L-1,Mg2+2.5 mmol·L-1,引物0.4μmol·L-1,Taq DNA聚合酶1.0 U,模板DNA60 ng;从100条引物中筛选出16条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物。结论:建立的青天葵ISSR-PCR反应体系,经过24份青天葵样品检验,得出该体系稳定可靠,可用于青天葵遗传差异分析。     

类风湿关节炎血清miR-410-3p表达与膝关节软组织病变的关系

目的 探究类风湿关节炎（RA）患者血清miR-410-3p的表达及其与膝关节软组织病变的关系。方法 选取我院收治的RA患者89例,根据28个关节疾病活动度评分（DAS28）将其分为活动组（42例）、缓解组（47例）;另选取同期体检健康志愿者52例为健康组。RT-PCR法检测血清miR-410-3p的表达水平;超声检查膝关节软组织病变情况;采用Pearson法分析血清miR-410-3p表达与膝关节软组织病变的关系。结果 活动组和缓解组患者血清miR-410-3p表达水平均低于健康组（P<0.05）,活动组患者血清miR-410-3p表达水平低于缓解组（P<0.05）。活动组和缓解组患者股骨内、外侧踝软骨厚度均小于健康组（P<0.05）,且活动组患者上述指标小于缓解组（P<0.05）;活动组和缓解组患者髌上囊液体深度、滑膜厚度大于健康组（P<0.05）,且活动组患者髌上囊液体深度、滑膜厚度大于缓解组（P<0.05）。RA患者血清miR-410-3p水平与髌上囊液体深度和滑膜厚度呈正相关（P<0.05）,与股骨内、外侧踝软骨厚度呈负相关（P<...     

RP-HPLC法同时测定壮药清解雾化液4种成分含量

目的:建立RP-HPLC同时测定壮药清解雾化液中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷4种指标成分的含量测定方法。方法:应用日本岛津LC-20A高效液相色谱仪,SPD-20A检测器,WondaCract ODS-2 (4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈溶液(A)-0.2%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL/min,检测波长355 nm,柱温35℃。结果:绿原酸、芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷的进样量分别在2.22～5.55μg、0.330～0.825μg、0.208～0.52μg、0.3485～0.8713μg范围内线性关系良好(R~2≥0.9997);加样回收率为97.5%～102.35%,RSD值为1.15%～2.14%。结论:该方法专属性、稳定性、重复性高,灵敏、简便,可应用于壮药清解雾化液制备工艺质量控制。     

广西产3种地钱叶状体的扫描电镜观察

目的:对广西产的3种地钱叶状体进行鉴别。方法:利用扫描电镜观察广西产3种地钱的亚显微结构。结果:地钱细胞的网格比较明显,略呈条纹状,气孔数较少,表皮细胞密布,波状纹理,气孔类固定式椭圆形,组成气孔的细胞不向气孔腔集中;拳卷地钱细胞的网格不明显,略呈明显的条纹状,气孔数较多,表皮细胞无明显的纹路,颗粒状附属物多见,气孔类固定式,常见气孔内部5个细胞向气孔腔中部集中成结构;粗裂地钱细胞的网格不明显,表皮有较多的附属物,表皮细胞略呈纹理结构,网格间距较大,气孔类固定式,常见气孔内部4个细胞。结论:上述特征明显,可作为广西产地钱的生药学鉴别依据。     

综合干预对预防妇科肿瘤术后深静脉血栓的效果分析

目的:探讨综合干预措施在预防妇科肿瘤患者术后深静脉血栓中的效果。方法:回顾性分析妇科肿瘤患者术后的临床资料,对深静脉血栓形成进行相关因素分析,根据对应的因素采取干预措施。将干预前的200例患者设为对照组,进行常规护理,观察组为实施干预措施的180例患者,比较两组患者深静脉血栓形成发生率以及患者对护理工作的满意度。结果:实施干预前200例患者中有9例患者出现深静脉血栓,发生率为4.50%,术后长时间卧床、多种合并症(≥2种)、肿瘤病理类型等均是深静脉血栓形成的危险因素(P<0.03),与年龄、手术时间、手术方式、下肢静脉曲张等因素无关(P>0.05);观察组有4例患者出现深静脉血栓,发生率为2.22%,两组间深静脉血栓发生率比较有显著性差异(P<0.01)。结论:综合干预措施可降低妇科肿瘤手术后深静脉血栓的发生率,并提升护理工作质量。     

秦皮素通过下调p70S6K抑制人黑色素瘤细胞增殖、迁移和侵袭研究

目的研究秦皮素对人黑色素瘤A375细胞的增殖、迁移、侵袭的影响及其作用机制。方法 A375细胞给予秦皮素和核糖体S6蛋白激酶(ribosome S6 protein kinase,P70S6K)抑制剂PF-4708671进行干预,采用细胞计数法考察秦皮素和PF-4708671对A375细胞增殖能力的影响;采用Western blotting法检测秦皮素和PF-4708671对m TORC1/p70S6K/S6通路关键蛋白及上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白表达的影响;采用细胞划痕实验和Transwell实验考察秦皮素和PF-4708671对A375细胞迁移和侵袭的影响。结果秦皮素与PF-4708671均可显著抑制A375细胞的增殖、迁移和侵袭(P0.05、0.01)。秦皮素与PF-4708671均显著抑制p70S6K/S6通路活性,下调间质细胞标志蛋白和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMP)表达水平(P0.05、0.01)。结论秦皮素可能通过下调p70S6K抑制A375细胞的增殖、迁移与侵袭。     

乳腺癌TGF-β信号通路相关转录因子研究进展

目的 总结与转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)信号通路相关的转录因子在乳腺癌发生发展过程中的作用,分析它们与TGF-β信号通路之间的网络调控机制.方法 应用PubMed及CNKI期刊全文数据库检索系统,以“乳腺癌、转录因子和TGF-β”等为关键词,检索2011-01-01-2015-12 31的相关文献.纳入标准:(1)乳腺癌侵袭转移;(2)转录因子与TGF-β信号通路存在联系.剔除标准:(1)未阐明转录因子与TGF-β信号通路作用的具体机制;(2)实验设计不严谨.符合纳入标准的英文文献146篇,中文文献35篇,根据剔除标准剔除英文文献50篇,中文文献34篇,最后纳入分析文献88篇.结果 TGF-β信号通路是一条极为重要的细胞内信号转导途径,能调控细胞增殖、分化、迁移、粘附及凋亡等生理活动.在乳腺癌中,TGF-β信号通路起着双重作用,即在肿瘤发生的早期阶段,TGF-β信号通路起着一种预防性或肿瘤抑制的作用,但随着肿瘤的发展,TGF-β能够通过影响肿瘤微环境、增强侵袭性及抑制免疫细胞功能来促进肿瘤细胞的转移.多个转录因子c-Myc、p53、C/EBPβ、14-3-3ξ、Blimp-1、Oct-4和Nanog、Foxq1、TBX3、FOXM1、GATA3、HOXB9、Six1、Pokemon、Snail、Slug和SOX4已证实与TGF-β信号通路发生相互作用,共同参与调控乳腺癌发生发展过程.结论 乳腺癌发生过程中转录因子与TGF-β信号通路形成复杂的调控网络,对乳腺癌的进程起着双向调节作用.