氟喹诺酮类药对人肝药酶活性的影响

目的 :观察氟喹诺酮类 (FQs)药物对人肝微粒体药物代谢酶 (细胞色素P 4 5 0 )活性影响的差异。方法 :反应体系中微粒体蛋白终浓度为 0 .33～2 .0 g·L- 1,药物终浓度为 4 0 0mg·L- 1,测定药物代谢酶的活性。对照不加药。并测定不同底物浓度和不同环丙沙星浓度时乙基吗啡N 脱甲基酶的Vm和Km 值 ,求抑制常数Ki。结果 :FQs对酶活性的抑制强度为 :培氟沙星 (PFLX) >环丙沙星 (CPLX)>氧氟沙星 (OFLX) >左氧氟沙星 (LVLX)。FQs对戊巴比妥侧链羟化酶 (PSCH )、苯并芘羟化酶(BPH)、氨基比林N 脱甲基酶 (ADM )、乙基吗啡N 脱甲基酶 (EDM )和NADPH 细胞色素C还原酶的平均被抑制率分别为 :2 9% ,2 6 % ,19% ,17%和2 .3%。CPLX对EDM的抑制为竞争性抑制为主的混合性抑制 ,抑制常数Ki=2 5 0mg·L- 1。结论 :4种FQs对多种肝药酶活性均有不同程度的抑制 ,LVLX的抑制作用相对较弱。 5种肝药酶对药物的敏感性也各不相同。CPLX对EDM的抑制是竞争性抑制为主的混合性抑制。     

子宫输卵管造影术对输卵管阻塞性不孕的临床应用价值

目的评价子宫输卵管造影术对输卵管阻塞性不孕症的临床应用价值。方法收集近年来经造影证实，且有临床追踪结果的输卵管性不孕症200例患者资料进行分析。结果200例共275支输卵管显示完全或部分梗阻，其中单侧梗阻125例（62．5％），双侧梗阻75例（37．5％）；造影术后有60例患者受孕，受孕率为30％。结论子宫输卵管造影术对输卵管阻塞性不孕症不仅能明确诊断，而且还具有一定的治疗作用。     

环丙沙星、氧氟沙星及左氧氟沙星对大鼠致痫作用的研究

目的　观察氧氟沙星 (OFL X)和左氧氟沙星 (L VL X)对大鼠中枢神经的毒性与环丙沙星 (CPL X)毒性的差异 ,及抗痫药物对环丙沙星引发的癫痫的阻断作用。方法　 Wistar大鼠 ,随机分为 3组 ,以用药前皮层脑电图 (ECOG)其脑电图功率谱作为自身对照。颈静脉注射药物 10 0 mg/kg,记录给药后 10、2 0、30、6 0、12 0 min时的 ECOG和脑电图 ,及大鼠的行为变化 ,并在癫痫发作后静脉注射抗痫药物 ,阻断癫痫发作。结果　CPL X组大鼠中 7只 ECOG出现棘波和慢棘波 ,其中 5只大鼠 ECOG出现频发棘波 ,频发棘波能被地西泮迅速阻断。用药后 10 min脑电功率谱 δ波功率和总功率较用药前明显降低 (P<0 .0 5 ) ,之后又逐渐升高。用药后θ、α、β波功率逐渐升高 ,12 0 min时明显高于给药前 (P<0 .0 5 ) ;OFL X、L VL X组大鼠 ECOG均无异常改变 ,脑电功率谱δ、θ、α、β波功率及总功率与用药前比较均无显著性差异 (P<0 .0 5 )。但 L VL X组的 ECOG,脑电功率谱δ、θ、α、β波功率及总功率均较 OFL X组变化小。结论　 CPL X对大鼠有明显的致痫作用 ,OFL X和 L VL X无致痫作用 ,且 L VL X组大鼠 ECOG、脑电功率谱变化最小。地西泮对 CPL X引发的大鼠癫痫有阻断作用。     

大剂量阿托伐他汀对急诊冠状动脉介入治疗患者对比剂肾病的影响

目的探讨单次大剂量阿托伐他汀（80mg）对急性心肌梗死患者直接经皮冠状动脉介入治疗后对比剂肾病（contrast induced nephropathy, CIN ）的影响。方法121例行直接经皮冠状动脉介入治疗的急性sT段抬高心肌梗死患者按数字表法随机分入阿托伐他汀组（60例）和对照组（61例）。阿托伐他汀组在入院后立即给予阿托伐他汀80mg口服,对照组术前不给予他汀类药物治疗。所有患者术后均给予阿托伐他汀20mg／d长期服用。术前及术后3天连续监测血清肌酐（ serum creatinine, Scr）、血浆胱抑素C （cystatin C, Cys C ）、超敏C反应蛋白浓度。根据Cockcroft—Gauh公式计算内生肌酐清除率（creatinine clearance rate, Ccr）。结果121例患者中21例发生CIN,CIN发生率为17．4％,阿托伐他汀组CIN发生率低于对照组,但差异无统计学意义（13．3％孤21．3％,P〉0．05）。阿托伐他汀组术后CysC峰值较对照组明显降低,差异有统计学意义[（0．94±0．33）mg／Lvs（1．06±0．30）mg／L,P〈0．05];术后Scr、CysC较基线增高的幅度以及术后Ccr较基线降低的幅度均显著低于对照组,差异有统计学意义[（8．2±10．8）μmol／Lvs（14．6±12．9）μmol／L,P〈0．01;（0．07±0．04）mg／Lvs（0．18±0．07）mg／L,P〈0．01;（6．1±3．7）mL／minvs（11．2±5．1）mL／min,P〈0．01]。阿托伐他汀组术后高敏C反应蛋白峰值及较基线增高的幅度均明显低于对照组,差异有统计学意义[（17．2±6．8）mg／dLvs（24．3±10．3）mg／dL,P〈0．05;（7．3±5．7）mg／dLm（14．1±7．5）mg／dL,P〈O．01]。结论急性心肌梗死患者直接经皮冠状动脉介入治疗前大剂量阿托伐他汀的预处理可以抑制炎症反应．减轻肾损害．对预防CIN可能有益。     

成人肝细胞微粒体乙基吗啡N-脱甲基酶活性及酶动力学研究

目的观察成人肝细胞微粒体乙基吗啡N-脱甲基酶(EDM)的活性水平、酶动力学特征及乙醇和头孢噻肟对酶动力学的影响。方法肝组织除去筋膜和血红蛋白,加磷酸盐缓冲液4℃下匀浆,12 000×g离心15 min,取上清100 000×g超速离心60 min,沉淀加PBS/甘油缓冲液制成微粒体悬液,终点法测EDM酶活性。观察不同浓度乙醇和头孢噻肟对EDM酶活性及酶动力学参数最大反应速度Vm和米氏常数Km的影响。结果48例成人肝细胞微粒体EDM活性为(0．89±0．18) U,女性组(0．96±0．22)U明显高于男性组(0．81±0．16)U(P＜0．05)。乙醇和头孢噻肟对EDM酶活性均有抑制作用,底物浓度为1．0 mmol/L时,抑制常数Ki分别为474 mg/L(1．04 mmol/L)和3．6%(0．62 mmol/L);头孢噻肟终浓度分别为0、200、400 mg/L时,米氏常数Km分别为0．80、0．86和0．96 mmol/L,Vm分别为1．46、1．39和1．35 mmol甲醛/g微粒体蛋白/min;乙醇终浓度分别为0%、2．0%、4．0%时,Km分别为0．80、0．94、和1．1 mmol/L,Vm分别为1．46、1．36和1．22 mmol甲醛/g微粒体蛋白/min。结论成人肝细胞微粒体EDM酶活性水平女性组高于男性组;乙醇和头孢噻肟对EDM酶活性的抑制作用是竞争性抑制为主的混合性抑制。     

卵巢癌患者组织中miR-135b的表达及临床意义

目的 探讨miR-135b在卵巢癌组织中的表达及意义。方法 选取2015年1月～2017年12月在解放军第一七四医院和南方医科大学深圳医院接受手术的卵巢病变患者的卵巢组织,包括28例卵巢癌组织和10例卵巢良性肿瘤组织,所有的组织均经过病理确认。运用荧光定量PCR(RT-PCR)的方法检测28例卵巢癌及10例卵巢良性肿瘤组织中miR-135b的表达水平,并分析其与卵巢癌患者年龄、组织学类型、分化程度、临床分期及淋巴结转移的关系。结果 ①28例卵巢癌组织中miR-135b 的表达量(1.90± 0.53)与10例卵巢良性肿瘤组织中miR-135b表达量(1.45±0.45)比较,差异有统计学意义(t=2.03,P<0.05); ②19例≥50岁卵巢癌患者组织中miR-135b的表达量(1.97±0.51)和20例浆液性囊腺癌组织中miR-135b的表达量(1.96±0.50)分别与9例<50岁卵巢癌患者组织中miR-135b的表达量(1.77±0.57)和8例黏液性腺癌组织中miR-135b的表达量(1.77±0.61)比较,差异均无统计学意义(t=0.743～0.846,均P<0.05)。20例中低分化组织中miR-135b的表达量(2.05±0.54),17例临床分期Ⅲ～Ⅳ期组织中miR-135b的表达量(2.10±0.46)和15例有淋巴结转移的组织中miR-135b的表达量(2.10±0.53)均分别高于8例高分化组织中miR-135b的表达量(1.55±0.25),11例临床分期I～II组织中miR-135b的表达量(1.60±0.49)和13例无淋巴结转移的组织中miR-135b的表达量(1.68±0.44)比较,差异均有统计学意义(t=5.036～7.517,均P<0.05)。结论 miR-135b在卵巢癌组织中高表达,miR-135b 的表达水平与卵巢癌的分化程度、临床分期和淋巴结转移有关。     

体检人群幽门螺杆菌感染者血清葡萄糖、脂类及同型半胱氨酸水平与Hp抗体分型的相关分析

目的 分析深圳地区体检人群幽门螺杆菌(Hp)感染及分型与血清葡萄糖、脂类及同型半胱氨酸异常水平的相关性。方法 选取2017年10～12月南方医科大学深圳医院健康体检者共2 256例作为研究对象,采用免疫印迹法检测Hp抗体,全自动生化分析仪检测血糖(GLU)、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)及同型半胱氨酸(HCY)。依据Hp抗体结果分析体检人群Hp感染的性别、年龄分布特点,同时把研究对象分为Hp抗体阴性组、II型Hp抗体阳性组、I型Hp抗体阳性组三组,并对这三组体检人群的血清GLU,TC,TG,HDL,LDL及HCY水平进行比较分析。结果 ①体检人群Hp感染率男性(55.9%,618/1 106)与女性(44.1%,488/1 106)比较,差异有统计学意义(χ2=31.10,P<0.05); 阳性组平均年龄47.04±12.68岁与阴性组43.86±11.05岁比较,差异有统计学意义(t=1.97,P=0.01<0.05)。②体检者Hp I型抗体阳性组与Hp抗体阴性组比,TG水平差异有统计学意义(F=6.22,P<0.05),GLU,TC,HDL,LDL及HCY水平差异均无统计学意义(F=0.04～0.44,均P>0.05); Hp II型抗体阳性组和Hp抗体阴性组以及Hp II型抗体阳性组和Hp I型抗体阳性组两两比较,GLU,TC,TG,HDL,LDL及HCY水平差异均无统计学意义(F=0.01～2.65,均P>0.05)。③体检者Hp I型抗体阳性组与Hp抗体阴性组比较,GLU,TC,TG和HDL异常率差异均有统计学意义(χ2=4.74～38.60,均P<0.05),LDL和HCY异常率差异均无统计学意义(χ2=0.17～0.30,均P>0.05)。Hp II型抗体阳性组与Hp抗体阴性组比较,TG和HDL异常率差异均有统计学意义(χ2=5.07～16.43,均P<0.05),GLU,TC,LDL及HCY异常率差异均无统计学意义(χ2=0.02～1.26,均P>0.05)。Hp I型抗体阳性组和Hp II型抗体阳性组各项目两两比较,GLU,TC,TG,HDL,LDL及HCY异常率差异均无统计学意义(χ2=0.01～2.89,均P>0.05)。结论 深圳地区体检者Hp感染男性高于女性,I型Hp感染与GLU,TC,TG和HDL异常有一定的相关性,II型Hp感染与TG和HDL异常相关,不同型Hp感染对血糖血脂的影响不同,Hp感染进行分型检测有重要的临床意义。     

免疫组织化学法检测三阴乳腺癌Ki-67抗原的改良方法研究

目的优化免疫组织化学法检测三阴乳腺癌(TNBC)组织中Ki-67抗原实验条件,实现检测技术标准化。方法 20例诊断为TNBC的组织标本,使用标准免疫组织化学检测Ki-67抗原。针对不理想的结果对实验条件进行调整,直至获得最佳结果。使用图像分析软件对阳性染色细胞计数分析。结果通过对脱蜡、孵一抗、分化时间控制等因素的优化,得到更为理想的免疫组织化学结果。阳性细胞数和总细胞数通过软件灰度值分析来获得。最终20例标本均为Ki-67阳性高表达。结论改良的免疫组织化学染色法对TNBC组织中Ki-67抗原检测结果较传统法更加精准、结果更为可靠。     

天然抗菌肽分离纯化方法的建立

目的寻找高效、广谱的新型天然抗菌肽，建立稳定、有效的分离纯化方法。方法家蝇免疫诱导后制成组织匀浆，经超速离心、分子筛过滤、SephadexG50层析、反相高效液相色谱法（RP-HPLC）、透析浓缩等技术进行分离纯化，用K-B法鉴定抗菌活性。结果组织提取液经超速离心后，用pH6．8Tris-HCI尿素缓冲液作流动相，SephadexG50层析，收集到有明显抗菌活性的成分。再用pH6．8磷酸盐缓冲液作流动相，经RP-HPLC半制备柱进一步纯化，各成分分离效果良好，保留时间为18．008min处的谱峰，有明显的抗菌活性。用RP-HPLC分析柱显示其为单一成分，达到了色谱纯。该抗菌肽对大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistantS．aureus，MRSA）均有抗菌活性。结论建立了有效的家蝇抗菌肽分离纯化方法，纯化的家蝇抗菌肽有广谱抗菌活性。     

家蝇抗菌肽的免疫诱导及抗菌活性研究

目的 诱导家蝇产生抗菌活性肽,鉴定其抗菌活性.方法 家蝇经针刺损伤感染大肠埃希菌,免疫诱导24h后制成组织匀浆,经低温盐析、超速离心、Sephadex G50层析、RP-HPLC等技术分离纯化抗菌肽.K-B法和稀释法测定抗菌活性.结果 家蝇体内含有抗菌活性成分,家蝇经损伤免疫诱导后分泌抗菌肽的量明显增加,经分离纯化得到了一个色谱纯的抗菌活性肽.该抗菌肽对标准菌株大肠埃希菌(ATCC 25922)、铜绿假单胞菌(ATCC 27853)和金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)均有抗菌活性,其MIC分别为2.4 μmol/L、3.6 μmol/L和4.8 μmol/L.结论 免疫诱导可促进家蝇抗菌肽的分泌,分泌的抗菌肽有广谱抗菌活性,对革兰阴性菌和革兰阳性菌均有抑制作用.