非甾体抗炎药与皮质类固醇抑制角膜上皮细胞增殖的实验研究

目的 探讨非甾体抗炎药对角膜上皮细胞体外增殖的抑制作用。方法 选用原代及传代兔角膜上皮细胞，实验组中加入含不同浓度双氯芬酸钠、安贺拉(酮咯酸氨丁三醇)、地塞米松及洁霉素的培养液，对照组加入等量空白培养液，采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测其对细胞增殖的抑制，计算出抑制率并进行比较。结果 双氯芬酸钠、安贺拉(酮咯酸氨丁三醇)、地塞米松及洁霉素对角膜上皮细胞增殖均有抑制作用。双氯芬酸钠与安贺拉3个对应浓度的比较中，24h时双氯芬酸钠抑制率分别为61．4％、42．1％及0，安贺拉组均为0；48h时双氯芬酸钠抑制率分别为81．0％、70．2％、47．6％，安贺拉抑制率分别为38．1％、31．0％和0；72h时双氯芬酸钠抑制率分别为95．0％、95．0％、54．0％，安贺拉抑制率分别为59．1％、47．2％和33．2％．在双氯芬酸钠与地塞米松及洁霉素的原液浓度比较中，24、48、72h时双氯芬酸钠抑制率分别为93．0％、94．0％、96．0％，洁霉素为24．6％、51．2％、79．1％，地塞米松为45．6％、69．0％、80．0％．在双氯芬酸钠与地塞米松及洁霉素的二分之一原液浓度比较中，24、48、72h时双氯芬酸钠抑制率分别为68．4％、91．7％、95．0％，洁霉素为12．3％、26．2％、49．0％，地塞米松为12．3％、54．6％、55．0％．结论 非甾体抗炎药双氯芬酸钠与安贺拉对角膜上皮细胞增殖均有抑制作用，以双氯芬酸钠抑制作用最强，强于传统抗增殖药地塞米松，在抑制LASIK术后上皮植入方面有广泛的应用前景。     

门诊假性近视青少年患者中医干预及护理

目的：探讨青少年假性近视中医护理干预效果。方法将98例青少年假性近视门诊患者,按随机数字表法分为对照组46例,观察组52例。对照组进行常规用眼健康教育;观察组在健康教育的基础上进行电梅花针及耳穴压豆治疗、辨证施护等干预,上述治疗以10次为1个疗程,4个疗程结束时进行两组疗效比较。结果青少年假性近视患者中医护理干预4个疗程时,观察组总体疗效明显优于对照组,差异有统计学意义（P＜0.01）。结论采用电梅花针及耳穴压豆治疗,同时配合中医辨证施护,利于青少年视力恢复,能有效控制青少年假性近视的发展。     

双氯芬酸钠对角膜上皮细胞抑制作用的实验研究

目的探讨双氯芬酸钠对角膜上皮细胞体外增殖的抑制作用并初步探讨其机理.方法选用原代及传代兔角膜上皮细胞,实验组中加入含不同浓度双氯芬酸钠的培养液,对照组加入等量空白培养液,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl thiazolium,MTT)比色法检测其对细胞增殖的抑制,光学显微镜和透射电子显微镜进行形态学观察.结果双氯芬酸钠浓度为27.27μg/ml～54.55 μg/ml时,作用24、48、72 h均明显抑制角膜上皮细胞的增殖(P＜0.01),并具有剂量依赖性.结论双氯芬酸钠对角膜上皮细胞的增殖具有明显抑制作用,呈现剂量-效应关系.双氯芬酸钠可能是通过诱导凋亡而发挥其抗增殖作用.     

腺病毒与慢病毒载体转染离体兔角膜基质细胞的有效性对比研究

目的观察比较腺病毒载体(adenovirus vector,AV)与慢病毒载体(lentivirus vector,LV)分别介导增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent proteins,EGFP)对体外培养的兔角膜基质细胞(rabbit corneal stroma cells,RCSC)的转染效率,探讨较优一种病毒载体作为角膜基因治疗载体的可行性。方法行离体RCSC原代、传代培养及鉴定;实验分为转染组(AV-EGFP转染组和LV-EGFP转染组)和对照组,观察转染组在不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)及感染后24h、48h、72h在倒置荧光显微镜下EGFP的表达情况,流式细胞技术检测转染效率。结果 AV-EGFP转染组感染RCSC后从24～48h就开始可见明显的绿色荧光,起始时间早于LV-EGFP转染组(48h)。LV-EGFP转染组在MOI≤1000时,随着MOI值增大,检测到的细胞转染率逐渐增大,两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05);AV-EGFP转染组在MOI>10时,随着MOI值增大,检测到的细胞转染率逐渐增大,两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05);而在同一MOI值下(MOI>1),LV-EGFP较AV-EGFP转染效率更高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 AV与LV均可有效转染离体RCSCs同一MOI值下(MOI>1),LV转染效率更高。     

葛根素对体外培养的视网膜血管内皮细胞增殖的影响

目的观察不同浓度葛根素对体外培养的视网膜血管内皮细胞增殖的影响。方法取第7代牛视网膜血管内皮细胞用于实验。葛根素组中加入含不同浓度葛根素的培养液,对照组加入等量空白培养液。24h及48h后采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测视网膜血管内皮细胞的增殖情况。结果与空白对照组比较,0.05mg·L-1、0.50mg·L-1、5.00mg·L-1、50.00mg·L-1和500.00mg·L-1葛根素组作用24h及48h后视网膜血管内皮细胞增殖明显。24h葛根素组OD值(按照葛根素浓度由低到高分别为:0.283±0.060、0.337±0.030、0.349±0.030、0.405±0.030、0.352±0.020)明显高于对照组(0.161±0.060),差异均有统计学意义(均为P<0.01);48h葛根素组OD值(按照葛根素浓度由低到高分别为:0.371±0.030、0.377±0.040、0.410±0.040、0.400±0.020、0.310±0.040)也明显高于对照组(0.279±0.050),差异均有统计学意义(均为P<0.01)。结论葛根素对体外培养的视网膜血管内皮细胞有明显的促增殖作用,其作用与葛根素的剂量有关。     

高度近视眼巩膜细胞外基质中相关胶原分子机制的研究进展

高度近视眼是目前为止全球范围内主要的不可逆性致盲性眼部疾病之一。高度近视眼在发生和发展的过程中,眼球后部巩膜可能异常薄变或扩展。巩膜薄变、脉络膜萎缩性薄变及不同程度的眼轴延长,且伴有巩膜细胞外基质(ECM)的过度降解是高度近视眼不断发展的根本原因。近年来,随着相关研究的不断深入,国内外学者发现巩膜ECM生化特性的改变与近视眼的发展有着十分密切的关系,而胶原作为巩膜ECM的重要组成部分,其表达和积聚的改变与病理性近视眼的发展呈显著正相关的关系。目前,临床医学领域对此尚无有效的治疗方法,常用的药物及手术疗法的疗效尚未确定且毒副作用较大,并不适合在临床上进行大范围的推广和使用。本文就目前高度近视眼巩膜ECM中胶原分子机制的研究进展进行综述。     

养血补肾方对高度近视血流动力学的影响

目的研究益气活血、补肾明目法对高度近视眼血流动力学及中医证候的影响。方法应用彩色多谱勒血流仪检测58例113眼高度近视眼的视网膜中央动脉的血流参数,测定收缩期血流峰值速度(PSV)、舒张末期血流速度(EDV)、阻力指数(RI),以及中医证候积分。治疗1个月后复查上述指标。结果高度近视眼的视网膜中央动脉PSV治疗后较治疗前明显增加,且治疗前后差异有统计学意义(P0.05),EDV治疗后较治疗前增加,但治疗前后差异无统计学意义(P0.05),RI治疗后较治疗前降低,但治疗前后差异无统计学意义(P0.05)。各项证候均有不同程度的改善(P0.05)。结论眼部供血不足可能是引起高度近视眼视网膜、脉络膜退行性病变的原因,养血补肾方可以有效改善高度近视患者的视网膜血流及中医证候,对高度近视视网膜、脉络膜有一定保护作用。     

川芎嗪注射液对缺氧状态下视网膜血管内皮细胞增殖作用的影响

目的观察川芎嗪注射液对缺氧状态下视网膜血管内皮细胞生长、增殖的影响。方法体外培养牛视网膜血管内皮细胞(RVEC),将传代的细胞分成3组,即正常细胞对照组(DMEM常规培养基培养)、缺氧模型组、缺氧+不同浓度川芎嗪组(含0.002、0.02、0.2和2μg/ml川芎嗪的培养基)。培养24、48 h后在倒置相差显微镜下观察细胞形态学改变;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组血管内皮细胞的增殖情况。结果缺氧组及各药物组各时间点的光密度值明显低于正常细胞对照组(P0.01);川芎嗪0.002μg/ml组的光密度值与缺氧组比较无统计学差异(P0.05),0.02、0.2μg/ml组的光密度值与缺氧组比较有统计学差异(P0.01),其中0.2μg/ml组的数值最高,但仍低于正常细胞对照组;而川芎嗪2μg/ml组的光密度值有下降趋势。结论川芎嗪可抑制缺氧引起的视网膜血管内皮细胞活性降低,对细胞的增殖有一定的促进作用。     

青光眼合并白内障超声乳化人工晶状体植入联合小梁切除术的效果

目的探讨青光眼合并白内障行超声乳化吸出、人工晶状体植入联合小梁切除术的效果。方法青光眼合并白内障44例（47眼）,行超声乳化吸出及折叠式人工晶体植入联合全巩膜隧道内小梁切除术,术后观察眼压、视力、滤过情况等,随访1～36个月。结果47眼术后眼压均可控制在正常范围,长期随访眼压未升高,术后矫正视力：数指2眼（4．26％）,0．1～0．633眼（70．21％）,0．8-1．212眼（25．53％）,术后并发症主要是虹膜反应、角膜水肿及瞳孔散大。结论白内障行超声乳化及折叠式人工晶状体植入联合巩膜隧道内小梁切除术可有效控制眼压,提高视力。     

川芎嗪对缺氧状态下视网膜血管舒缩因子表达影响的实验研究

目的:体外培养牛视网膜血管内皮细胞,观察不同浓度川芎嗪组对缺氧状态下细胞增殖及其舒缩因子表达的影响。方法:选取第6代牛视网膜血管内皮细胞进行培养。将正常培育的细胞加入100 μmol/L的CoCl₂诱导缺氧12 h后,将细胞随机分为三组。缺氧对照组(不含药物、无生长因子及血清的培养液组)、含川芎嗪0.02 μg/ml培养液组、含川芎嗪0.2 μg/ml培养液组。培养24 h后用MTT比色法检测各组视网膜内皮细胞的吸光度值,观察川芎嗪对血管内皮细胞的增殖情况。Western blot法检测各组细胞eNOS及ET-1的表达。结果:川芎嗪0.02 μg/ml组、0.2 μg/ml组的吸光度值明显高于缺氧对照组,差异有统计学意义(P<0.01),并且随浓度的增高吸光度值也增高 0.02 μg/ml组与0.2 μg/ml组间比较,差异有统计学意义(P<0.01)。与缺氧对照组比较,川芎嗪各组eNOS蛋白表达升高(P<0.01),且药物浓度与蛋白表达呈正相关 川芎嗪各组ET-1的蛋白表达均降低(P<0.01),但药物组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:川芎嗪能保护在缺氧环境下受损的视网膜血管内皮细胞,对细胞增殖有一定的促进作用,通过上调eNOS表达,下调ET-1表达,调节其分泌功能和血管舒缩功能,从而维持血管外周阻力和局部舒缩状态。