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采用以种子培养基为选育培养基的单菌落抑菌圈法对乳链菌肽生产菌Lactococcus lactis subsp.1actis W28(2583 IU/ml)进行自然选育,做出了效价同抑菌圈直径与菌落直径之比的关系图(图略)。由图可知当直径比大于5.3时,该菌的效价大于2800 IU/ml。直接挑取直径比大于5.3的单菌落5株,得到4号菌(2903 IU/ml)。用传统的选育法与之对比:随机挑出20株菌只有两株效价在2600 IU/ml以上。可见单菌落抑菌圈法大大提高了筛选效率。然后用加有5%乳链菌肽(nisin)产品的梯度平板对4号菌进行抗性筛选,得到对乳链菌肽抗性更强、效价更高的4H1号菌(3016 IU/ml),最后对4H1进行紫外诱变,并利用单菌落抑菌圈法直接挑取3株菌,得到菌株4H1Y2(3499 IU/ml),经稳定性考察后其效价较为稳定(3482 IU/ml)。由此可见单菌落抑菌圈法及抗性筛选法是筛选乳链菌肽高产菌株的快速、有效方法。 相似文献
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紫外分光光度法快速测定庆大霉素发酵液中庆大霉素浓度及其机理 总被引:8,自引:1,他引:7
发酵液中的庆大霉素主要采用微生物测定法测定 ,但其测定方法复杂 ,难以掌握 ,且测定时间长。本文根据磷钨酸钠与庆大霉素反应生成相对稳定的沉淀 ,其滤液吸光度与庆大霉素浓度呈线性关系 ,从而建立了简便 ,快速的分光光度法测定发酵液中的庆大霉素浓度 ,系统研究了提高测定准确性的影响因素与规律。结果表明合适的测定条件 :波长为 2 49nm ,pH为 5~ 7,常温 ,庆大霉素与磷钨酸钠的反应时间为 30min ,对应的磷钨酸钠浓度为 1.5× 10 -4 g/ml。与微生物测定法比较 ,本方法测定庆大霉素针剂和庆大霉素发酵液产生的误差分别小于 3%和 6 % ,庆大霉素在 8~ 2 0u/ml范围内与滤液吸光度呈线性关系。 相似文献