鹿鞭对肾阴虚及肾阳虚小鼠抗疲劳作用及PI3K-Akt通路机制研究

研究鹿鞭对肾阴虚及肾阳虚小鼠抗疲劳作用及机制。将健康雄性昆明小鼠88只适应性喂养1周后随机分为空白组、肾阴虚模型组、肾阴虚西洋参组、肾阴虚各给药组、肾阳虚模型组、肾阳虚人参组、肾阳虚各给药组,每组8只,合计11组。每日定时分别灌胃醋酸地塞米松、氢化可的松制备肾阴虚模型、肾阳虚模型,并给予相应药物,空白组给予空白溶剂,连续14 d。于第14天给药后30 min测定各组小鼠力竭游泳时间;于第15天摘眼球取血分离血清测定血清中乳酸(lactic acid, LD)、尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)、环腺苷酸(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)、环鸟苷酸(cyclic guanosine monophosphatec, cGMP)含量,剖取肝脏测定肝糖原含量、肝组织中磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase, PI3K)和蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)蛋白表达情况。与肾阳虚模型组相比,鹿鞭给药组体质量显著升高(...     

高效液相色谱法测定鹿胎丹参白芍颗粒中葛根素、芍药苷及丹酚酸B含量

目的：完善鹿胎丹参白芍颗粒质量标准,提高其质量控制水平。方法：建立高效液相色谱法（HPLC）同时测定鹿胎丹参白芍颗粒中葛根素、芍药苷及丹酚酸B含量,并进行方法学考察。结果:鹿胎丹参白芍颗粒工艺验证得出其出膏率为33.39%;HPLC确定了葛根素、芍药苷及丹酚酸B的液相色谱条件,其含量分别为18.94、10.15、9.25 mg/g;并对该方法的稳定性、重复性、精密度、线性及加样回收等方法学考察,其中葛根素、芍药苷及丹酚酸B的平均加样回收率相对标准偏差（RSD）值分别为1.63%、1.01%、1.38%。结论：本研究在现行质量标准的基础上,增加葛根素、芍药苷及丹酚酸B作为质量标准提升控制成分,运用HPLC测定其含量并进行方法学考察,提高了产品的可控性,建立的方法准确可靠,可为完善和提高鹿胎丹参白芍颗粒的质量标准提供科学依据。     

基于证效相关研究清利湿热方中医功效及降血尿酸作用机制

目的：建立湿热内蕴证候大鼠模型,研究具有降血尿酸作用的清利湿热方的中医功效,以证测效揭示清利湿热降血尿酸作用机制。方法：将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组、四妙丸组以及清利湿热方低、中、高剂量组,每组8只。采用饲喂高脂高糖饲料,自由饮用蜂蜜水,并隔天灌胃猪油脂或酒,建立湿热内蕴证候大鼠模型,观察清利湿热方对大鼠一般状态的影响。采用酶联免疫吸附试验检测血清热激蛋白70（HSP70）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）,促胃液素（GAS）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）含量以及血浆胃动素（MTL）、肝脏组织Na+-K+-ATP酶含量,免疫组织化学法检测胃肠组织水孔蛋白3（AQP3）、水孔蛋白4（AQP4）含量,采用蛋白质印迹法检测结肠组织中TOLL样受体4(TLR4)、核因子κBp65表达量。结果：模型组体质量下降（P<0.05,P<0.01）,HSP70、TNF-α、IL-1β升高（P<0.05,P<0.01,P<0.001）,胃肠组织中AQP3表达量下降（P<0.05）,AQP4表达量上升（P<0.01,P<0.001）,GAS含量下降（P<0.01）,IgM含量升高（P<0.01）,结肠组织TLR4表达量增加（P<0.01）。清利湿热方能增加大鼠体质量,降低HSP70、TNF-α、IL-1β含量（P<0.05,P<0.01,P<0.001）,升高胃肠组织AQP3表达量（P<0.05,P<0.01,P<0.001）,降低AQP4表达量（P<0.05）,升高GAS、Na+-K+-ATP酶含量（P<0.05,P<0.001）,降低IgM含量（P<0.05,P<0.01）。结论：饲喂高脂高糖饲料,自由饮用蜂蜜水,并隔天灌胃油脂/酒,可以成功建立高尿酸血症湿热内蕴证候模型,清利湿热方可以从大鼠一般状态、体质量、热激蛋白以及炎症介质、水孔蛋白、胃肠激素、免疫等多方面改善大鼠湿热状态,发挥清利湿热功效。清利湿热方具有降血尿酸作用,其作用机制可能与下调TLR4,核因子κBp65有关。     

对清利湿热方降低高尿酸血症湿热内蕴证大鼠血尿酸的作用及机制研究

目的 通过观察清利湿热方(土茯苓、车前子、茯苓、菊苣、葛根、川牛膝)降低高尿酸血症湿热内蕴证大鼠血尿酸的作用,探讨其作用机制。方法 采用灌胃氧嗪酸钾,饲喂高脂高糖饲料,并复合隔天灌胃油脂或酒,自由饮用蜂蜜水(100 g/L)复制高尿酸血症大鼠模型。将SD大鼠按体质量分为正常组、模型组、四妙丸组(1.2 g/kg)、清利湿热方低剂量组(1.25 g/kg)、清利湿热方中剂量组(2.5 g/kg)、清利湿热方高剂量组(5.0 g/kg),每天上午造模,下午给药,连续30 d。分离血清,取肝、肾,检测各组大鼠血清尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、IgG、IgM、NO、内皮素-1(ET-1)、血栓素(TX)-B2、6-酮前列素F1α(6-keto-PGF1α)含量,肝脏组织Na⁺-K⁺-ATP酶含量,肾脏组织中三磷酸腺苷结合转运蛋白2(ABCG2)及尿酸盐转运蛋白1(URAT1)蛋白表达量,肾脏组织ABCG2、URAT1及葡萄糖转运体9(GLUT9)mRNA表达量,胃组织水通道蛋白...     

肾虚血瘀证大鼠模型的建立及补肾活血方补肾益精活血化瘀功效研究

目的：通过建立肾虚血瘀证大鼠模型并基于方证相应研究补肾活血方的补肾益精、活血化瘀功效。方法：将48只雌性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药组、补肾活血方低剂量组（0.72 g/kg）、补肾活血方中剂量组（1.44 g/kg）、补肾活血方高剂量组（2.89 g/kg）,每组8只。除正常对照组外,各组从第1天开始,上午灌胃造模药羟基脲溶液（450 mg/kg）,连续14 d,从第4天上午开始加用肾上腺素0.3 mg/(kg·d)皮下注射至第14天,制备大鼠肾虚血瘀模型。观察大鼠的一般状态,检测子宫和卵巢脏器指数、卵泡数目、黄体数量,血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、抑制素B（INHB）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞比容（HCT）、血栓素（TXB-2）、内皮素（ET-1）的水平,血浆红细胞压积、红细胞聚集指数、红细胞变形指数。结果：与正常对照组比较,模型组子宫指数和卵巢指数均下降（P<0.001）,卵泡数目下降（P<0.05）,黄体数目上升（P<0.05）,血清E2、FSH含量均降低,INHB含量升高（P<0.001）,RBC、HGB、HCT含量均降低（P<0.001）,血浆红细胞压积、红细胞聚集指数、红细胞变形指数均升高（P<0.01,P<0.001）,血清ET-1、TXB-2含量均升高（P<0.001）。与模型组比较,给药组卵巢指数均上升（P<0.01,P<0.001）,而子宫指数除补肾活血方高剂量组,其他给药组均上升（P<0.05）;给药组卵泡数目均上升（P<0.05,P<0.01,P<0.001）,补肾活血方各剂量组黄体数量降低（P<0.05）;给药组血清E2、FSH均升高（P<0.01,P<0.001）、INHB含量均降低（P<0.001）,补肾活血方各剂量组RBC、HGB、HCT含量均升高,差异有统计学意义;给药组血清ET-1、TXB-2含量均降低（P<0.001）,血浆红细胞压积和红细胞聚集指数均降低（P<0.001）,红细胞变形指数除了补肾活血方高剂量组,其余给药组均降低（P<0.05）。结论：首次通过灌胃羟基脲结合皮下注射肾上腺素建立大鼠肾虚血瘀证模型,补肾活血方可以改善卵巢功能和激素水平,具有补肾益精、补血功效,且通过改变血液流变学的异常,改善内皮细胞功能,降低血栓素,从而达到活血化瘀之功。     

王伟明教授治疗肝郁脾虚型慢性胆囊炎经验

慢性胆囊炎病位在胆,与肝脾胃密切相关,主要病因病机为肝胆郁滞、胆腑不通,常见的证型有:肝胆湿热、肝胆气郁、气滞血瘀、肝郁脾虚、肝阴不足、肝胆实热、肝脾阳虚等,其中临床以肝郁脾虚型为常见。治疗以疏肝利胆,健脾和胃为主。