氘代替代物结合UPLC-MS/MS同步检测去卵巢大鼠血浆中22种内源性大麻素

该文旨在建立一种超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同步检测去卵巢大鼠血浆中22种内源性大麻素类物质的新方法。首先血浆样品经固相小柱(SPE柱)萃取,然后利用UPLC-MS/MS进行检测。采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以0.1%乙酸溶液为流动相A,乙腈-异丙醇(9∶1)溶液为流动相B,进行梯度洗脱,采用正离子多反应离子监测模式,以氘代试剂作为对照品的替代物计算回收率,同步定量22种内源性大麻素。其中,22种内源性大麻素类物质的线性相关系数均大于0.99,定量限(LOQs)为0.089 6~1.965 2 nmol·L~(-1);5个氘代替代物的相对回收率为11.40%~129.9%;重复性考察结果显示,RSD均小于8.0%。所建立的方法,可以用于去卵巢大鼠血浆样品中PGF2αEA,AEA等多种内源性大麻素类物质的定性与定量分析,验证了该方法的可行性及实用性。总之,该方法灵敏度高、重复性好、实用性强,可以用于大鼠血浆样品脂质代谢组学研究。     

硫磺熏蒸对亳菊化学成分的影响

该实验采用HPLC-ESI-MSⁿ对硫磺熏蒸与晒干的亳菊进行定性比较,共指认了32个化合物。同时,采用HPLC技术对绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A、木犀草素、芹菜素、香叶木素及金合欢素7个化合物进行定量比较,研究结果发现硫熏前后亳菊在化学组成上无较大差别,但是在含量上存在显著差异,硫熏后,黄酮苷类及奎宁酸类成分的含量降低,而黄酮苷元的含量升高;进一步对硫熏与晒干亳菊进行主成分分析(PCA)及偏小二乘聚类判别模式分析(PLS-DA),PCA分析结果显示,6批亳菊样品聚成2组,分别为晒干组和硫熏组;通过PLS-DA分析提取出对硫熏前后亳菊分组贡献率大于1(VIP> 1)的3个成分,分别为芹菜素、木犀草素和异绿原酸A。该实验结果表明硫熏对亳菊化学成分具有显著影响。     

基于NLRP3/CASP1/GSDMD通路探讨益肾通络方抑制糖尿病肾脏疾病小鼠足细胞焦亡的作用机制

目的 观察益肾通络方(熟地黄、黄芪、山萸肉、丹参、大黄、鬼箭羽、血竭)对db/db小鼠足细胞及小鼠肾足细胞MPC-5焦亡的影响，探讨其抑制糖尿病肾脏疾病足细胞焦亡改善足细胞损伤的可能作用机制。方法 (1)体内实验。以db/db小鼠(模型组及各给药组)及同窝对照db/m小鼠(对照组)为研究对象。db/db小鼠按体质量随机分为5组，除模型组外，其余4组分别按照每日1.0、2.5、5.0 g/kg剂量给予益肾通络方及10 mg/kg缬沙坦灌胃，模型组及对照组给予等量蒸馏水。治疗8周后，透射电子显微镜观察小鼠肾脏组织中足细胞数量与形态变化情况；对肾脏组织进行TUNEL染色，同时利用免疫荧光技术标记足细胞标志蛋白Wilms瘤基因1(WT-1);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)水平；利用实时荧光定量PCR、Western blotting检测小鼠肾脏组织中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(CASP1)、焦孔素D(GSDMD)mRNA及蛋白表达和激活情况。(2)体外实验。以糖基化终末期产物(AG...     

黄芪化学成分抗纤维化作用及分子机制研究进展

纤维化是指多类型的组织损伤，尤其是在慢性炎症反应性疾病过程中，组织修复平衡失调的终末结局。纤维化可发生于多种器官组织中，其持续进展可能导致器官功能障碍和衰竭，对人类健康构成了巨大的威胁。中药在预防和治疗纤维化方面有显著的治疗效果，具有多成分、多途径和多靶点的特点，已成为纤维化领域研究的热点。补气类中药黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的根，具有益气升阳、生津养血、托毒排脓、敛疮生肌的功效。黄芪含有多糖类、皂苷类和黄酮类等化学成分，具有较好的抗炎、抗氧化等作用，可有效干预心脏、肾脏、肝脏和肺脏等多脏器组织的纤维化进程。该文综述了黄芪及其化学成分的抗纤维化药效作用及其机制，可为黄芪的进一步研究和应用提供思路和参考。     

基于SREBPs通路的益肾通络方改善脂质代谢异常作用机制研究

目的 基于固醇调节元件结合蛋白（SREBPs）通路探究益肾通络方改善脂质代谢异常的作用机制。方法 以C57BLKS/J(db/db)小鼠为模型动物、 C57BLKS/J(db/m)小鼠为正常对照，通过测定小鼠肝脏系数及血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）含量，观察小鼠肝组织脂肪变性和脂质蓄积情况，测定小鼠肝组织中SREBP-1、SREBP-2蛋白和Srebp-1c、Srebp-2及其下游脂质代谢相关靶基因（Fasn、Acc1、Scd5、Fads1、Hmgcr、Dhcr24、Insig-1、Fdps）的mRNA转录水平，来考察1、2.5、5 g/kg益肾通络方改善db/db小鼠脂质代谢异常的作用机制。以低脂培养的人肝癌细胞HepG2为体外脂质代谢异常细胞模型，以25-HC(SREBPs抑制剂，10μmol/L)为抑制剂对照，考察125、250、500μg/mL益肾通络方干预24 h后对细胞中SREBP-1、SREBP-2蛋白和SREBP-1c、SREBP-2其下游脂质代谢相关靶基因mRNA转录水平的影响，进行体外机制验证。结果1、2.5...