天香丹对动脉粥样硬化秽浊痰阻证 ApoE（－/－） 小鼠血清炎性细胞因子及NF-κB p65信号通路的影响

目的观察天香丹对动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）秽浊痰阻证载脂蛋白E基因敲除 ［apolipoprotein E gene knock-out,ApoE（－/－） ］ 小鼠血清中炎性细胞因子白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）以及主动脉组织中核因子-κB p65（NF-κB p65）信号通路的影响,探讨天香丹防治AS的可能机制。方法48只8周龄ApoE（－/－） 小鼠分为正常对照组（12只,给予普通饲料室温饲养）,高脂饲料复合气候箱干预组（36只）。喂养12周后,成功复制ApoE（－/－） 小鼠AS秽浊痰阻证模型后,分为3组：模型组、天香丹组、阿托伐他汀组。12周后处死各组小鼠,采用酶联免疫双抗夹心（ELISA）法检测血清中IL-1β和TNF-α含量;蛋白免疫印迹（Western blot）法检测主动脉组织中NF-κB p65蛋白表达水平。结果模型组IL-1β、TNF-α浓度高于正常对照组（P<0.01）,天香丹组、阿托伐他汀组IL-1β、TNF-α浓度低于模型组（P<0.01）;天香丹组与阿托伐他汀组比较,差异均无统计学意义（P>0.05）;此外,模型组主动脉组织中NF-κB p65蛋白磷酸化水平高于正常对照组（P<0.01）,天香丹组、阿托伐他汀组NF-κB p65蛋白磷酸化水平均低于模型组（P<0.01）;天香丹组与阿托伐他汀组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论天香丹能够防治AS,其机制可能与抑制NF-κB p65信号通路的活性,下调炎性细胞因子IL-1β、TNF-α表达水平,进而抑制炎症反应有关。     

动脉粥样硬化秽浊痰阻证动物模型的研究

目的:建立动脉粥样硬化秽浊痰阻证发病特点相符合的病证结合动物模型,为后续的临床研究提供载体.方法:将60只载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为4组,即高脂饲料复合寒燥环境的模型组、高脂饲料组、寒燥环境组和正常对照组.过程中记录小鼠体重、情绪、大小便、毛发及舌象等生物表征,12周时眼球取血,用酶比色法检测血清甘油三酯、总胆固醇,高密度脂蛋白,低密度脂蛋白;脱臼处死小鼠,分离主动脉瓣至髂肾动脉分支动脉组织,观察细胞形态学变化.用SPSS17.0对量化后指标进行统计分析.结果:高脂饮食复合寒燥环境组小鼠表现为行动迟缓,抑郁状态,进食进水较少,体重增长不明显,舌质多见暗红或暗紫色;模型组小鼠主动脉中膜明显增生,平滑肌细胞排列紊乱并向内膜突起,大量粥样斑块形成,管腔明显狭窄,可见少量泡沫细胞,大量胆固酵结晶形成;高胆固醇饲料和寒燥环境对ApoE基因敲除小鼠的血脂升高的促进作用不显著.结论:高脂饲料喂养复合寒燥环境干预建立动脉粥样硬化秽浊痰阻证的方法是可行的,可成功建立与动脉粥样硬化秽浊痰阻证生物表征和部分生物学基础相似的病证结合模型.