巴弗洛霉素A1抑制卵巢癌细胞SKOV3自噬并增强化疗敏感性的作用机制

目的:研究巴弗洛霉素A1(bafilomycin A1)对5-氟尿嘧啶(5-FU)作用下的卵巢癌细胞SKOV3自噬的抑制作用及其增强化疗敏感性的可能机制。方法:将SKOV3细胞随机分为3组,A组:50μmol/L5-氟尿嘧啶(5-FU)处理48h;B组:100nmol/L巴弗洛霉素A1给药1h后加入50μmol/L5-FU处理48 h;C组(阴性对照):不作任何处理。3组细胞均应用吖啶橙染色、间接免疫荧光技术检测卵巢癌细胞SKOV3自噬形态学变化;并通过Western blotting检测巴弗洛霉素A1对SKOV3细胞中微管相关蛋白轻链3(LC3)及自噬相关蛋白Beclin1表达的影响。结果:B组产生的红色酸性区域明显减少,LC3定位的荧光亮度减弱,细胞内LC3、Beclin1蛋白表达量显著降低。结论:巴弗洛霉素A1可能通过减少SKOV3细胞酸性区域的数量,抑制LC3产生从而抑制SKOV3细胞的自噬。     

let-7g对子宫内膜癌RL-95-2细胞中RB1表达的调控

目的:探讨子宫内膜癌RL-95-2细胞中let-7g对其靶基因视网膜母细胞瘤相关蛋白1(retinoblastoma-associated protein 1,RB1)表达的调控作用。方法:运用生物信息学方法对let-7g进行靶基因预测并分析其靶基因RB1;let-7g模拟物(let-7g mimic)、模拟物对照组(mimic control)、let-7g抑制物(let-7g inhibitor)、抑制物对照组(inhibitor control)分别转染至RL-95-2细胞,采用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;实时荧光定量PCR(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测转染后RB1 mRNA的表达差异;Western blotting检测RB1蛋白的表达。结果:RB13'非编码区(3'UTR)含有一个let-7g结合位点,而且该结合位点在多个物种中高度保守;与未转染组相比,转染let-7g mimic可促进细胞增殖,且使RB1蛋白的表达显著降低,而转染let-7g抑制物则抑制细胞增殖,使RB1蛋白的表达显著增高,其余各组无明显变化;而各转染组RB1 mRNA表达无明显差异。结论:子宫内膜癌RL-95-2细胞中let-7g可以结合到RB1的3'UTR,负性调控RB1的表达,从而促进细胞生长。     

microRNA-145对卵巢癌SKOV3细胞抑癌基因p53表达调控研究

目的 探讨microRNA -145（miR-145）对卵巢癌SKOV3细胞抑癌基因p53表达的调控。 方法 选取2012年2月至2013年4月在重庆医科大学,通过慢病毒转染技术将含miR-145的质粒转入SKOV3细胞中,经嘌呤霉素筛选建立稳定表达miR-145的SKOV3细胞株。实时定量荧光RT-PCR验证miR-145的表达情况,western-blot检测过表达miR-145后SKOV3细胞中p53蛋白表达量的变化。 结果　过表达miR-145的SKOV3细胞p53蛋白相对表达量实验组0.714±0.18,对照组0.333±0.07,增高1.14倍（P＜0.05）。 结论　miR-145可能通过增强卵巢癌SKOV3细胞中抑癌基因p53的表达来降低细胞的肿瘤恶性程度。     

急救穴刺血对实验性脑缺血大鼠大脑皮层、海马区c-fos mRNA表达的影响

目的观察急救穴刺血疗法对实验性脑缺血再灌流大鼠大脑皮层和海马c-fos mRNA的影响。方法结扎双侧颈总动脉复制大鼠全脑缺血再灌注模型,在再灌注不同时间点取相应穴位刺血治疗,以RT-PCR法检测相关脑区c-fos mRNA含量。结果 大鼠全脑缺血后缺血+刺血组不同时间点大脑皮层和海马区c-fosmRNA表达明显增加。结论刺血可促进脑内c-fos mRNA表达,它可能通过与DNA的结合而调节其他基因的表达,从而成为对外界各种刺激的第三信使,影响细胞的生长、分化及再生等控制而达到神经保护作用。     

针刺治疗儿童精神发育迟滞临床研究

目的:观察针刺治疗对精神发育迟滞(MR)儿童智力结构、社会适应能力及fMRI脑功能成像的影响.方法:将符合诊断标准的60例MR患儿,随机分为针刺组和药物组各30例,针刺组以四神针(百会前、后、左、右各旁开1.5寸,共4针)、智三针(神庭穴及双侧本神穴)、颞三针(耳尖直上2寸为第1针,左右各开1寸为第2、3针)、脑三针(脑户穴及双侧脑空穴)为治疗主穴;药物组口服西药吡拉西坦片,两组均治疗4个月为1个疗程,疗程结束后比较其综合疗效.采用《中国韦氏儿童智力量表》评定智力的改善程度,《婴儿-初中学生社会生活能力量表》评定社会适应能力的改善程度,针刺组选取5例病例运用功能性磁共振成像技术对比针刺治疗前后脑功能成像的变化.结果:针刺组治疗后总智商(FIQ)、社会适应能力评分均高于治疗前(P＜0.05),其中操作智商(PIQ)提高显著,差异具有统计学意义(P＜0.05),但言语智商(VIQ)变化不明显(P＞0.05);而药物组治疗前后各指标变化不明显(均P＞0.05).两组治疗后比较,针刺组总智商和操作智商以及社会适应能力评分与药物组相比提高显著(均P＜0.05);针刺组5例病例治疗前后fMRI脑功能成像没有明显变化.结论:针刺可以促进MR患儿的智力恢复,提高患儿的社会适应能力,具有较好的临床疗效.但对比治疗前后fMRI脑功能成像并没有明显变化.