提高药学专业学生就业竞争力的思考

文章对高等教育大众化背景下药学类专业的教育现状与学生就业难的原因进行了分析,从教学改革和人才培养模式等方面对如何提升药学专业学生就业竞争力进行了探讨。     

垂序商陆PaAACT基因克隆和表达分析

目的:从垂序商陆根中克隆了商陆皂苷甲生物合成过程中关键酶乙酰乙酰辅酶A转移酶(acetoacetyl-CoA transferase,AACT)基因,进行生物信息学分析和原核表达。方法:提取垂序商陆根的总RNA,然后逆转录合成c DNA,在分析垂序商陆转录组数据的基础上,设计Pa AACT基因的特异性引物,聚合酶链式反应(PCR)扩增Pa AACT基因的c DNA序列,通过构建原核表达载体p ET-32a-PaAACT,诱导表达并且纯化目的蛋白。结果:Pa AACT基因开放阅读框为1 254 bp,编码417个氨基酸。生物信息学分析显示Pa AACT蛋白的分子式为C1 914H3 120N538O576S17,推测其相对分子质量为43. 43 k Da,理论等电点8. 90,不稳定系数32. 27,属于稳定蛋白质。根据生物信息学分析结果,Pa AACT蛋白属于硫解酶家族成员,在C末端含有硫解酶家族的1个保守位点和1个活性位点。Pa AACT蛋白可能位于细胞质中、不含信号肽、没有跨膜区。系统进化分析显示Pa AACT蛋白与甜菜等廖科植物AACT蛋白亲缘关系较近。经IPTG诱导,在大肠埃希菌BL21 (DE3)菌株中表达了Pa AACT重组蛋白,利用Ni2+亲和色谱获得了纯化的目的蛋白。结论:该研究从垂序商陆中克隆Pa AACT基因,为下一步测定Pa AACT酶催化活性、制备抗体奠定基础,也为研究其在商陆皂苷甲生物合成途径中的作用提供理论依据。     

丁香茄生物碱对人非小细胞肺癌体外作用及其机制研究

目的研究丁香茄生物碱对人非小细胞肺癌A549抗肿瘤转移作用及其机制。方法采用MTT法检测丁香茄生物碱对非小细胞肺癌A549细胞毒活性;划痕实验和Transwell细胞侵袭实验检测药物对肿瘤细胞体外迁移和侵袭作用的影响;ELISA法检测药物对细胞金属基质蛋白酶2(MMP-2)、金属基质蛋白酶9(MMP-9)表达的变化。结果丁香茄生物碱可显著抑制肿瘤细胞的增殖(P0.05);抑制A549细胞的迁移和侵袭,高剂量抑制率为63.4%;与对照组比较,丁香茄生物碱组MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低(P0.05,P0.01)。结论丁香茄生物碱可对人非小细胞肺癌A549增殖,抑制肿瘤细胞侵袭,其作用机制可能与抑制MMP-2、MMP-9蛋白表达有关。     

五味子中木脂素类成分闪式提取工艺研究

目的:研究五味子中木脂素类成分最佳闪式提取工艺。方法:以五味子中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的含量作为提取考察标准,采用闪式提取法提取五味子的木脂素类成分,考察因素为乙醇体积分数、料液比、提取时间,采用正交试验设计研究闪式提取的最佳工艺。结果:五味子中木脂素类成分使用闪式提取法提取的最佳工艺条件为体积分数70%乙醇,料液比110,闪式提取器的电压为140 V,提取时间90 s,提取2次。木脂素总提取量可达到22.1%。结论:闪式提取木脂素比回流提取法提取效率高,迅速,操作简单,具有较好的工业应用前景。     

微量马兜铃酸A检测方法的建立及其应用

目的:建立微量马兜铃酸A的标准检测方法,并对目前合法使用的含马兜铃酸A的药材、易与含马兜铃酸药材相混淆的中药材及其中成药进行检测。方法:采用高效液相色谱法,Alltima C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水-乙酸(68∶32∶1.5)为流动相,流速1.0 mL.min-1,检测波长390 nm。结果:马兜铃酸A在0.016~0.51μg线性关系良好,r=0.999 3,最低检测限为4 ng,平均加样回收率为101.2%。采用建立的标准限量检测方法,对11批市售细辛药材和15批中成药样品中马兜铃酸A进行分析;11批细辛中马兜铃酸A的质量分数在3.1~26.6μg.g-1,其中只有3批符合《中国药典》2010年版细辛药材项下的限量规定;15批中成药样品中只有1批检出了马兜铃酸A。结论:方法灵敏度高,重复性好,适合于含痕量马兜铃酸的药材及成药中马兜铃酸A的限量检测。     

第二代杂交捕获法检测人乳头状瘤病毒DNA在宫颈癌筛查中的应用

<正>宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,2008年诺贝尔医学奖研究成果证明:子宫颈癌是由高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)持续感染引起的恶性肿瘤,是唯一病因明确的肿瘤[1]。本文对我院开展第二代杂交捕获法(HC2)检测HPV DNA进行回顾性分析,探讨其在宫颈癌筛查中的作用及应用中的质量控制问题。     

胸腹联合伤的诊疗经验

目的：探讨胸腹联合伤患者的临床特点，提高诊断及治疗水平。方法回顾性分析本院10年来收治的40例胸腹联合伤患者的临床特点、诊断、抢救治疗与转归。结果开胸探查27例，胸腹联合探查4例，剖腹探查+胸腔闭式引流术6例，单纯行胸腔闭式引流3例；预后良好，无死亡。结论及时正确掌握以胸外伤为主的联合伤的早期开胸指征，是提高治愈率，降低死亡率的关键。     

改进丙氨酸转氨酶赖氏法基质液配方的探讨

丙氨酸转氨酶(ALT)的检测，在基层医院和在献血员的筛选上，都是不可缺少的项目之一。因此，也是实验室最常做的工作量最大的检测项目之一。对ALT的检测，方法很多，相比之下，赖氏法稳定可靠，一直被绝大多数(尤其是基层单位)实验室所采用。但笔在日常工作中发现，赖氏法检测ALT用的基质注人配方存在一定的缺陷(如配制工     

当归补血汤中4种成分在大鼠血浆中的药动学研究

目的考察当归补血汤中阿魏酸、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素、黄芪甲苷在大鼠血浆中的药动学。方法UPLC⁃MS/MS法测定4种成分含有量,分析采用Waters BHE C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸⁃乙腈,梯度洗脱;体积流量0.4 mL/min;柱温30℃。大鼠灌胃给予药物冻干粉溶液,于不同时间点采血,DAS 3.0软件拟合血药浓度⁃时间曲线,计算药动学参数。结果阿魏酸、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素、黄芪甲苷在各自范围内线性关系良好(r≥0.9951),提取回收率91.42%~124.83%。四者Cmax分别为312.30、799.39、149.19、120.46 ng/mL,Tmax分别为19.29、21.43、53.57、70.71 min,t1/2分别为192.37、173.95、185.34、408.77 min,AUC0~t分别为19220.97、111546.04、29073.89、18401.73μg/(L·min),AUC0~∞分别为20136.85、118807.61、34089.10、19921.64μg/(L·min)。结论该方法快速、灵敏、准确,可为当归补血汤临床应用和质量监控提供参考。