音乐干预对慢性情绪应激大鼠免疫功能的影响

①目的 探讨音乐干预对情绪应激大鼠血浆皮质酮和IL-1β含量的影响.②方法 经过4天适应期后,对大鼠进行定时喂水训练1周,随后进入以空瓶刺激作为应激源的为期2周的情绪应激期,测定大鼠血浆中皮质酮和IL-1β含量.③结果 模型组皮质酮含量显著高于对照组(P<0.01),音乐组显著低于对照组(P<0.01),音乐模型组显著低于模型组(P<0.01).IL-1β含量变化:对照组高于模型组,但差异无显著性意义(P>0.05),音乐组和音乐模型组显著高于模型组(P<0.01/P<0.01),音乐组显著高于音乐模型组(P<0.05).④结论 音乐干预可能降低情绪应激状态下大鼠血浆皮质酮的含量,增加内源性IL-1β的释放,对抗应激引发的免疫抑制效应.     

五倍子的体外抑菌作用研究

目的探讨五倍子的体外抑菌作用。方法用K—B纸片扩散法。100％五倍子浸出液滤纸片对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、甲型链球菌、乙型链球菌抑菌作用进行了研究。结果五倍子对以上细菌均有明显的抑菌作用。结论五倍子在体外有明显抑菌作用。     

孕期弓形虫感染对小鼠胎盘补体调节蛋白表达水平的影响

目的 通过检测弓形虫感染对C57BL/6孕鼠胎盘补体调节蛋白的表达水平,探索孕期弓形虫感染致不良妊娠结局的分子免疫机制.方法 将C57BL/6孕鼠随机分为感染组和正常对照组,每组12只,感染组每只孕鼠于孕8 d腹腔注射200个弓形虫强毒株(RH株)速殖子,对照组于相应时间注射等量生理盐水.所有孕鼠均于孕14 d无菌分离胚胎组织,观察胎鼠发育情况.采用实时荧光定量PCR检测胎盘补体调节蛋白Crry、GPI-DAF及CD59a的mRNA的表达水平;采用流式细胞术检测胎盘单细胞悬液中Crry、GPI-DAF阳性细胞率.结果 弓形虫感染导致感染组死胎率显著升高(感染组死胎率为80.95%,对照组为4.41%),两组之间差异有统计学意义(P＜0.01);弓形虫感染组及对照组Crry、GPI-DAF和CD59a的mRNA表达水平分别为0.786±0.199、0.594±0.096、0.880±0.179和0.550±0.077、0.221±0.074、0.591±0.075,3类补体调节蛋白感染组与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01);感染组和对照组Crry、GPI-DAF的阳性细胞百分率分别为(10.03±2.11)%、(2.95±1.04)%和(3.15±1.32)%、(0.66±0.26)%,两类补体调节蛋白感染组与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 弓形虫感染导致孕鼠胎盘3种补体凋节蛋白Crry、GPI-DAF及CD59a表达水平均升高,打破了母胎界面维持正常妊娠所需的免疫微环境,这可能是孕期弓形虫感染致不良妊娠结局的分子免疫机制之一.

Abstract：

Objective To investigate the expression of complement regulatory proteins on placentas of pregnant C57BL/6 mice infected with Toxoplasma gondii in order to explore the molecular immunological mechanism for abnormal pregnancy induced by T. gondii infection. Methods Twenty-four pregnant C57BL/6 mice were randomly divided into two groups equally. The infection group was intraperitoneally injected with 200 of living T, gondii RH strain tachyzoites on the 8th day of gestation, and the normal group of mice was injected with physiological saline. All mice were killed on day 14 after gestation and placentas were collected. The expression levels of Crry, GPI-DAF and CD59a mRNA were analyzed by real-time quantitative PCR, and the positive rates of Crry and GPI-DAF were measured with flow cytometry. Results The died fetus rates of infected group and control were 80. 95% and 4. 41% , respectively. The infected group was significantly higher than of that the control group (P＜0.01). The expression levels of Crry, GPT-DAF and CD59a mRNA in the infected and control group were 0.786 ±0. 199, 0.594 ±0.096, 0.880 ±0. 179 and 0.550 ±0.077, 0.221 ±0.074, 0.591 ± 0.075 , respectively, and the difference of three kind of complement regulation proteins between two groups was all significant (P＜0.01). The positive percentages of Crry and GPI-DAF cells of infected and control group were (10. 03 ± 2. 11) % , (2.95 ±1.04)% and (3. 15 ± 1. 32) % , (0. 66 ±0. 26) % , respectively, and the difference of the two kind complement regulation proteins between two groups was also significant ( P ＜ 0. 01). Conclusion The expression level of mouse placental complement regulatory proteins was increased after infection with T. gondii, and then immunological microenvironment at the fetomaternal interface was destroyed. It may be one of important immunological mechanism for abnormal pregnancy induced by T. gondii infection.     

刚地弓形虫感染对小鼠外周血和脾淋巴细胞Crry和CD55表达的影响

目的 探讨刚地弓形虫急性感染对小鼠外周血细胞和脾淋巴细胞表面补体调节蛋白Crry和CD55表达的影响.方法 将30只雄性C57BL/6小鼠按完全随机分组法分为感染组(20只)和对照组(10只).感染组小鼠每只腹腔注射1.0×104个RH株刚地弓形虫速殖子,对照组注射等量生理盐水.感染组依次于感染后2d和5d采集标本,同时对对照组取材.采用流式细胞仪检测小鼠外周血红细胞、白细胞及脾淋巴细胞Crry与CD55的表达情况.结果 ①感染后2d小鼠外周血红细胞Crry和CD55阳性表达率依次为(96.17±2.86)％和(65.23±4.99)％,对照组依次为(98.24±0.83)％和(68.57±5.31)％,组间差异均无有统计学意义；感染后5d,其红细胞Crry和CD55阳性率依次为(81.77±4.51)％、(51.72±8.29)％,对照组依次为(97.94±0.95)％、(70.57±6.44)％,感染组较对照组降低(t=7.786,t=4.433,P＜0.01).②感染后2d,白细胞Crry和CD55阳性率依次为(96.74±3.76)％、(71.80±6.74)％,对照组依次为(97.25±1.16)％、(74.84±3.87)％,两组比较均无有统计学意义的差异；感染后5d,其阳性率依次为(93.46±4.38)％、(59.67±6.37)％,对照组依次为(97.47±1.56)％、(75.10±4.58)％,感染组比对照组降低(t=2.585,t=4.792,P＜0.05,P＜0.01).③感染后2d,脾淋巴细胞Crry和CD55阳性率依次为(97.74±1.55)％和(66.58±2.67)％,对照组依次为(98.20±1.19)％和(69.98±4.62)％,两组比较均无有统计学意义的差异；感染5d后,其阳性率依次为(94.71±3.59)％、(56.86±6.98)％,对照组依次为(98.24±1.63)％、(71.18±4.09)％,其中,感染组CD55阳性率较对照组降低(t=4.195,P＜0.01),而Crry阳性率较对照组无有统计学意义的差异.结论 小鼠感染刚地弓形虫RH株后,不会立刻影响外周血和脾淋巴细胞补体调节蛋白Crry、CD55表达水平；随着病情发展,刚地弓形虫感染可导致机体免疫细胞补体调节蛋白的表达水平降低,但对不同免疫细胞各补体调节蛋白影响程度并不相同.     

阻断足三里穴对大鼠淋巴细胞增殖反应的影响

目的：本项目研究阻断足三里穴对大鼠淋巴细胞增殖反应的影响。方法：穴位注射钙离子络合剂羧甲基壳聚糖溶液，使Ca^2＋失去其生物活性从而阻断足三里穴，并测定大鼠的淋巴细胞增值反应。结果：穴位注射羧甲基壳聚糖组脾淋巴细胞反应降低。结论：通过络合穴位处钙离子可以阻断穴位及穴位所在经络，降低大鼠的免疫功能。     

紫草体外抑菌作用研究

目的探讨紫草的体外抑菌作用。方法用K-B纸片扩散法。100%紫草浸出液滤纸片时金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、甲型链球菌、乙型链球菌抑菌作用进行了研究。结果紫草对以上细菌均有明显抑菌作用。结论紫草在体外有明显的抑菌作用。     

IL-2I、L-21诱导人外周血单个核细胞及其抗肿瘤作用

目的探讨IL-2I、L-21对人外周血单个核细胞（PBMC）的诱导增殖和表型改变的影响及其体外抗瘤作用。方法取PBMC细胞,调整浓度为1×10^6个/ml,分为四组I,L-2组加入IL-2 100 IU/mlI,L-21组加入IL-21 100IU/ml,联合组加入IL-2 50 IU/ml和IL-21 50 IU/ml,对照组加入0.1 ml生理盐水,台盼蓝染色法计数各组活细胞,流式细胞仪检测各组PBMC表型;以上述四组为效应细胞（E）,以对数生长期的4种肿瘤细胞（人胃癌细胞系M85,胃癌细胞系BGC823,结肠癌细胞系HCT116,结直肠腺癌细胞系HCT8）为靶细胞（T）,稀释靶细胞5×10^3个/孔,E∶T为1∶1和2∶1,MTT法测定细胞毒性（杀伤率）。结果联合组活细胞计数高于IL-2组I、L-21组、对照组,P均〈0.05;联合组I、L-2组和IL-21组CD3^-/CD56^＋、CD3^＋/CD56^＋水平高于对照组,P〈0.05或0.01;联合组对4种肿瘤细胞的杀伤率均高于其余三组I,L-2组I、L-21组高于对照组,P均〈0.05。结论 IL-2联合IL-21的协同刺激作用,可有效地刺激PBMC的增殖和表型改变,对4种消化道肿瘤细胞株均有较强的杀伤力。     

人骨髓源和胎盘源间充质干细胞对T细胞增殖抑制作用的比较

目的:比较研究人骨髓源和胎盘源间充质干细胞介导的T细胞增殖抑制作用机制。方法:应用流式细胞术(FCM)分别检测B7H4和PDL1在人骨髓源间充质干细胞(HBMSCs)和胎盘源间充质干细胞(HPMSCs)上的表达;应用抗体阻断试验分析B7H4、PDL1分别在HBMSCs和HPMSCs对T细胞增殖及周期影响中的作用。结果:HBMSCs上高表达免疫负性调控分子B7H4,而HPMSCs上高表达免疫负性调控分子PDL1。分别应用B7H4mAb和PDL1mAb阻断,可使HBMSCs和HPMSCs对PHA激发的T细胞增殖抑制作用明显减弱;下调T细胞周期中G0/G1期细胞数量,上调S期细胞数量,明显减弱HBMSCs和HPMSCs对T细胞周期的影响。结论:HBMSCs和HPMSCs可通过表达不同的免疫负性调控分子介导T细胞的增殖抑制作用。     

改革免疫学实验教学 培养创新能力

目的:以培养学生创新能力为目的。方法:进行免疫学实验教学改革,包括增加虚拟性和综合性实验,尝试探索性实验。结果:实践证明,这种实验教学体系激发了学生的学习热情,锻炼了学生的实践能力,培养了学生的科研思维和创新能力,提高了免疫学实验教学效果。结论:通过改革免疫学实验教学,可培养学生的创新能力。     

原发性免疫缺陷病患者B淋巴母细胞系的建立及其核型检测

目的体外建立原发性免疫缺陷病(PIDD)患者永生化B淋巴母细胞系(B-LCL),为进一步开展PIDD相关研究提供资源。方法自PIDD患者外周血中分离单个核细胞,采用EB病毒感染并加入环胞菌素A抑制T淋巴细胞活性的方法建立B-LCL,7 d左右倒置显微镜下观察转化细胞的形态,并进行染色体核型分析。结果转化后的B淋巴母细胞体积增大,增生的淋巴细胞多聚集成团;已建立的永生化细胞能够成功冻存、复苏及传代;转化前后细胞染色体核型无明显改变。结论本实验成功建立了PIDD患者永生化的B-LCL,为进一步开展PIDD的病因学研究及诊断、治疗奠定了基础。