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目的 基于肝糖异生抑制策略筛选2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的标志性靶标蛋白。方法 从NCBI数据库下载人类肝组织基因芯片数据集,使用GEO2R在线分析工具筛选T2DM易感性基因;利用GeneCards和OMIM数据库检索糖异生相关靶点;整合数据获取T2DM-肝糖异生交互靶点,并构建蛋白质间相互作用网络筛选标志性靶标蛋白;使用Metascape数据库对靶点进行基因本体论和通路富集分析;借助分子对接预测T2DM治疗药物与标志性靶标蛋白之间的相互作用能力;最后联合二甲双胍对标志性靶标蛋白在自发性T2DM KKAy小鼠肝组织中的影响进行验证。结果 共识别出1 143个T2DM易感性基因和958个糖异生相关靶点,获得56个T2DM-肝糖异生交互靶点,并经网络分析筛选出2个标志性靶标蛋白PTPRC和VCAM1;交互靶点主要富集在葡萄糖分解代谢、典型糖酵解、葡萄糖-6-磷酸糖酵解等生物过程,通过糖酵解/糖异生、糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、内分泌抵抗等通路调节发挥作用;26个降糖药物均与标志性靶点同时具有较好的空间匹配、能量匹配以及不同程度的结合能力;T2DM模型组小鼠血糖较正常组显著增高,且在治疗后显著降低;T2DM模型组小鼠肝组织中PTPRC、VCAM1的蛋白表达水平均较正常对照组显著增高,并且均在二甲双胍治疗后显著降低。结论 本研究系统筛选并验证了肝组织中可能影响T2DM肝糖异生的2个标志性靶标蛋白,揭示了T2DM中肝糖异生调控通路,为深入研究肝糖异生防治机制,寻找新的降糖药物作用靶点提供依据。 相似文献
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目的 建立HPLC法同时测定养血生发胶囊中阿魏酸、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、羌活醇、异欧前胡素和大黄素5种活性成分的方法。方法 安捷伦Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈–0.1%冰醋酸,采用梯度洗脱;检测波长:310 nm;体积流量:1 mL/min;柱温:30 ℃;进样量:20 μL。结果 5种成分均达到基线分离,各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系,其平均回收率分别为95.68%、100.02%、100.55%、103.03%、100.07%。结论 该方法简便、灵敏、准确,在同一色谱检测条件下实现多指标成分同时测定,为养血生发胶囊的质量评价和控制提供新的方法。 相似文献
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HPLC法测定养血生发胶囊中5种活性成分 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立HPLC法同时测定养血生发胶囊中阿魏酸、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、羌活醇、异欧前胡素和大黄素5种活性成分的方法.方法 安捷伦Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.1%冰醋酸,采用梯度洗脱;检测波长:310 nm;体积流量:1 mL/min;柱温:30℃;进样量:20 μL.结果 5种成分均达到基线分离,各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系,其平均回收率分别为95.68%、100.02%、100.55%、103.03%、100.07%.结论 该方法简便、灵敏、准确,在同一色谱检测条件下实现多指标成分同时测定,为养血生发胶囊的质量评价和控制提供新的方法. 相似文献
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目的:制备乙酰化苦豆子多糖,并对修饰后的乙酰化苦豆子多糖溶液的构象特征进行研究。方法:对苦豆子多糖进行乙酰化修饰,采用取代度测定、红外光谱分析手段对修饰结果进行验证,采用碘-碘化钾反应和刚果红试验研究乙酰化苦豆子多糖的构象特征,采用圆二色谱法(CD)对不同因素影响下乙酰化苦豆子多糖的溶液行为进行研究。结果:乙酰化苦豆子多糖修饰成功,取代度为0.84,其溶液行为显示乙酰化苦豆子多糖具有多股螺旋结构以及较长的侧链和较多的分支,并且溶液构象受浓度、温度以及添加金属离子的影响而变化。结论:成功修饰获得乙酰化苦豆子多糖,并对其溶液构象进行了全面研究,为其进一步研究提供了参考。 相似文献
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目的 采用UHPLC-ESI-MS/MS同时测定复方景川片中没食子酸、红景天苷、绿原酸、延胡索乙素、阿魏酸、欧当归内酯A的含量。方法 采用InertSustain® C18(3.0 mm×100 mm,3.0 μm)色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速0.4 mL·min-1,进样量10 μL;质谱采用电喷雾离子源(ESI源),正负离子扫描切换,多重反应监测模式进行定量分析。结果 复方景川片中6种成分的峰面积与质量浓度在一定范围内均呈良好的线性关系,仪器精密度RSD值<2.5%,加样回收率为98.56%~102.04%,RSD为0.97%~2.07%。在所设定的色谱条件下,复方景川片中6个成分(没食子酸、红景天苷、绿原酸、延胡索乙素、阿魏酸、欧当归内酯A)于11 min内完全分离。结论 建立的UHPLC-ESI-MS/MS方法快速简便、精密度好、灵敏度高,可用于复方景川片的质量控制。 相似文献
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目的 观察复方景川片对大鼠缺血性脑损伤的神经保护作用,并探讨其对小胶质细胞/巨噬细胞极化的影
响。方法 60只大鼠按照随机数字表法分为空白对照组,模型组,尼莫地平组(阳性对照)和复方景川片低、中、高剂
量组。除空白对照组外,其他各组采用线栓法构建大脑中动脉闭塞模型,复方景川片低、中、高剂量组于建模前7 d
按照复方景川片0.78、1.56、3.12 g/kg连续灌胃给药10 d。建模后48 h采用Longa神经功能评分和横木行走实验评价
大鼠神经行为改变,苏木素-伊红染色观察脑组织病理变化,免疫组化染色及Western blot检测大脑组织中细胞分化
簇86(CD86)、精氨酸酶1(Arg1)表达。结果 与空白对照组比较,模型组大鼠神经功能评分、横木行走评分显著增
高(P<0.05),缺血侧大脑皮质神经元明显坏死、缺失,小胶质细胞/巨噬细胞增生较明显,CD86、Arg1表达均明显增
加(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠神经功能评分和横木行走实验评分明显降低(P<0.05),缺血侧大脑皮
质病变减轻,神经元坏死数目减少,锥体细胞增多,仍可见小胶质细胞/巨噬细胞增生,大脑皮质及脑组织CD86表达
降低,Arg1表达增加,尤以高剂量变化更为明显(P<0.05)。结论 复方景川片能够减轻大鼠脑缺血后的神经损伤,
且高剂量效果更为明显,其神经保护机制可能与其调控小胶质细胞/巨噬细胞极化状态有关。 相似文献
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目的 研究复方红景天提取物对小鼠急性脑缺血和大鼠局灶性脑缺血模型的保护作用。方法 昆明小鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平阳性对照组及复方红景天提取物高、中、低剂量组(2.18,1.09,0.55 g·kg-1),灌胃给药7 d后结扎小鼠双侧颈总动脉合并迷走神经制备小鼠急性脑缺血模型,观察小鼠存活时间。SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平阳性对照组及复方红景天提取物高、中、低剂量组(1.45,0.73,0.36 g·kg-1),线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,复制模型前7 d开始灌胃给药,连续给药10 d。测定大鼠神经行为学及脑梗死比例,原位末端标记法检测神经细胞凋亡率,Western bolt检测caspase-3的表达水平。结果 复方红景天提取物高、中剂量组可延长小鼠存活时间,与模型组相比具有显著性差异(P<0.01或P<0.05)。与模型组相比,复方红景天提取物高、中剂量组能显著降低大鼠神经功能评分(P<0.01或P<0.05),复方红景天提取物各剂量组均能显著降低大鼠脑梗死比例并抑制皮质区神经细胞凋亡,下调caspase-3的表达(P<0.01或P<0.05)。结论 复方红景天提取物对大、小鼠脑缺血模型均具有保护作用,可明显延长急性脑缺血小鼠的存活时间,减轻局灶性脑缺血大鼠的神经功能损伤,缩小梗死灶,抑制神经细胞凋亡,其机制与下调caspase-3的表达有关。 相似文献