核酸杂交反应中影响因素分析

以光敏生物素标记的R3 cDNA克隆为模型,采用正交设计的方法,对影响核酸杂交反应的主要因素:杂交反应温度,反应时间,探针浓度及甲酰胺浓度作了综合性分析。当探针浓度为800μg/L,甲酰胺浓度为10mol/L,50℃杂交反应6h,可获得最高灵敏度(10pg)。     

聚合酶链反应（PCR）对单纯疱疹病毒性脑炎的临床诊断价值

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测技术对１１８例颅内感染性疾病患者及３７例无神神经系统疾病患者脑脊液（ＣＳＦ）中的单纯疱疹病毒ＤＮＡ（ＨＳＶ－ＤＮＡ）进行了检测及分型。结果提示：“散发性脑炎”组的阳性率为３８．４６％（２０／５２），细菌、真菌性脑膜炎、其它病毒性脑炎组以及无神经系统疾病组均为阴性。作者认为：①本检测是目前单纯疹病毒性脑炎（ＨＳＥ）较为简便而准确的早期诊断方法之一；②ＨＳＶ分型检测，对病原诊断更具有全面性；③两型单纯疱疹病毒均可引起ＨＳＥ。     

人类细胞表面糖蛋白HuLy-m5、补体系统的膜辅因子蛋白和滋养层白细胞共同抗原属CD_(46)

本文作者曾用3种单克隆抗体(McAb)包括抗人类细胞表面糖蛋白HuLy-m5的McAb E4.3,识别了非谱系限制性人类CD_(46)抗原,并已知CD_(46)抗原是由分子量为56000和66000MW 的两个糖蛋白组成。作者进一步用McAbE4.3证明了两种人类细胞表面分子—补体系统的膜辅因子蛋白(MCP)和滋养层白细胞共同抗原(TLX)与HuLy-m5一样,均属CD_(46)抗原。     

单克隆抗体间接荧光法分型检测单纯疱疹病毒的实验研究

本文选择３株抗单纯疱疹病毒型共同性和型特异性单克隆抗体，建立了分型检测单纯疱疹病毒的单克隆抗体间接荧光法（ＭｃＡｂ－１ＦＡ）．特异性试验和重复性试验证实，ＭｃＡｂ－ＩＦＡ特异性强、重复性好．用此法检测了不同部位来源的５１份临床分离株，分型检测结果与ＥＬＩＳＡ法检测结果一致．提示ＭｃＡｂ－ＩＦＡ有可能成为实验室分型检测单纯疱疹病毒可靠的方法．     

用抗细胞壁半乳糖—N—乙酰葡萄糖胺多糖的单克隆抗体鉴定炭疽杆菌(文摘)

本文报道了炭疽杆菌半乳糖—N—乙酰葡萄糖胺(Ga1-NAG)多糖单克隆抗体(McAbs)的制备及其特性鉴定,并用筛选的McAbs快速鉴定炭疽杆菌株。 作者用盐酸胍裂解法从粗制炭疽杆菌细胞壁中提取Ga1-NAG多糖,免疫BALB/c小鼠。从融合细胞中,筛选出对Ga1-NAG多糖特异性高的McAbs 5G4和6G6,荧光素异硫氰酸标记,分析其特性。发现McAb5G4和6G6能与纯化的细胞壁、O-脂多糖和荚膜内完整生长细胞特异性结合,证明其为抗炭疽杆菌Ga1-NAG多糖的McAbs,为IgM类(入链)。ELISA发现,0.5mol半乳糖和乳糖分别能强烈抑制McAbs 5G_4和6G6与Ga1-NAG多糖结合,而N-乙酰葡     

成人跖疣人乳头瘤病毒分型及与临床特征的关系

目的 检测成人跖疣乳头瘤病毒(HPV)型别,并探讨HPV分型与临床特征的关系.方法 采用PCR扩增、基因测序和TA克隆技术检测221例跖疣患者疣体的HPV型,记录患者的年龄、病程、症状和疣体数.结果 221例标本中,HPV阳性率为97％(215/221).单一HPV型占96％(206/215),HPV 27、2、57和7(Alpha属)分别占44.7％ (92/206)、12.1％(25/206)、7.3％(15/206)和0.5％(1/206);HPV 65(Gamma属)占0.5％(1/206);HPV 1、63(Mu属)占33.5％ (69/206)和1.5％ (3/206).HPV 27、2和57三型感染者之间年龄、病程、疣体个数、疼痛发生率和性别比较,差异均无统计学意义.与HPV 27感染者相比,HPV 1感染者与年龄≤30岁、病程≤1年、疣体数≤2个和疼痛高发生率相关.结论 HPV 27、2、57和1是感染成人跖疣患者的主要HPV型.HPV型与患者的临床特征间存在相关性.     

抗原捕获聚合酶链反应分型检测妇女生殖器单纯疱疹病毒

目的 :　建立直接分型检测妇女生殖器单纯疱疹病毒 (HSV)的抗原捕获聚合酶链反应 (AC -PCR)。方法 :　用抗HSV型共同性糖蛋白单克隆抗体 ,包被聚苯乙烯离心管 ,捕获HSV ,同时加入 3个引物 :HSV - 1 HSV - 2型共同性上游引物及HSV - 1和HSV - 2型特异性下游引物 ,进行PCR扩增。结果 :HSV - 1和HSV - 2标准病毒株均分别扩增出与设计大小相符的 4 77bp和 399bpDNA条带。AC -PCR可检测到 10PFUHSV - 1和 1PFUHSV - 2。用AC -PCR检测了 36 5份妇女生殖器拭子标本 ,阳性 10 1例(2 7.7% ) ,2 3例为HSV - 1(占 2 2 .8% ) ,78例为HSV - 2 (占 77.2 % ) ;其中 112份标本同时用AC -PCR和分离培养法检测 ,AC -PCR的阳性率为 2 6 .8% (30 112 ) ,分离培养法的阳性率为 2 0 .5 % (2 3 112 ) ,两者差异有显著性 (χ2 =4 .5 ,P <0 .0 5 )。结论 :　AC -PCR是特异、敏感、快速分型检测妇女生殖器HSV感染的方法     

抗HSV－糖蛋白（gp30）单克隆抗体重链可变区基因的克隆及序列分析

目的：获得鼠抗ＨＳＶ－２型特异性糖蛋白（ｇｐ３０）单抗重链可变区基因，为基因工程改建及表达奠定基础。方法：从分泌高中和活性的鼠抗ＨＳＶ－２型特异性单抗杂交瘤细胞系中提取ＲＮＡ，逆转录成ｃＤＮＡ，用ＰＣＲ法扩增出抗体重链可变区基因，并克隆入质粒，随机挑选阳性克隆进行核酸序列分析．结果：基因全长３５７ｂｐ，编码１１９个氨基酸，含有维持抗体结构的半胱氨酸，序列内无终止码．结论：所克隆基因具备小鼠抗体重链可变区基因结构特征，与已确认的小鼠抗体ＶＨ基因有较高的同源性，隶属于Ｋａｂａｔ分类体系中的小鼠抗体重链（Ａ）亚组．     

人疱疹病毒6型感染与口腔鳞癌关系的初步研究

目的研究人疱疹病毒6型(HHV-6)感染与口腔鳞癌的关系。方法用间接免疫荧光试验及聚合酶链反应,分别检测口腔鳞癌和对照组患者血清中抗HHV-6 IgG及外周血单个核细胞中HHV-6 DNA序列;用免疫组化染色法检测口腔鳞癌组织标本中HHV-6抗原。结果16例口腔鳞癌患者和16例其他口腔疾病患者血清中抗HHV-6 IgG的阳性数分别为16例和12例,几何平均滴度分别为1:118和1:64,差异有显著意义(P<0.05)。上述两组患者HHV-6 DNA的检出数分别为10例和2例(P<0.05)。其中12例口腔鳞癌组织标本经免疫组化染色检测,9例(9/12)HHV-6抗原阳性,而8例对应癌旁组织中,阳性者仅有2例(2/8),两者间差异有显著意义(P<0.05)。结论HHV-6可能是口腔鳞癌发生的诱因,在肿瘤发生发展中起一定作用。