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桔青霉素简介及其免疫学检测方法研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
桔青霉素是能引起肾脏毒性的真菌毒素 ,并有致癌性。本文综述了桔青霉素的物理、化学和生物学特性及其免疫学检测方法研究进展。 相似文献
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目的建立牛奶中双酚A(bisphenol A,BPA)的间接竞争化学发光酶免疫分析检测方法。方法通过优化抗原包被浓度、甲醇浓度、酶标二抗的稀释比例、缓冲液的pH、离子强度(以Na~+计)等建立竞争抑制曲线,确定线性范围和检出限,并对牛奶样品进行加标回收实验。结果在最佳实验条件下,半抑制浓度(IC_(50))为3.95 ng/mL,检出限(IC_(10))为0.66 ng/m L,牛奶样品中双酚A加标回收率为95.0%~112.9%,相对标准偏差为0.93%~3.96%。结论该方法具有较高的灵敏度和良好的特异性,适用于牛奶样品中双酚A的测定。 相似文献
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噬菌体展示肽库筛选赭曲霉毒素A模拟表位的研究 总被引:4,自引:1,他引:4
目的从噬菌体随机肽库中筛选模拟赭曲霉毒素A表位的噬菌体粒子,并以其替代毒素建立免疫学检测方法。方法以抗赭曲霉毒素A的单克隆抗体为配基,免疫亲和筛选以融合蛋白形式表达在丝状噬菌体M13外壳蛋白Ⅲ上的随机七肽库,以ELISA方法鉴定阳性克隆,同时进行DNA测序确定插入七肽的氨基酸序列。结果经过4轮淘选,共筛选到11株能与该抗体特异性结合的阳性克隆,且该结合能被赭曲霉毒素A阻断,模拟表位的共有序列为IRPMVXX,X为任意氨基酸。以其中的P2号克隆建立了竞争ELISA检测方法,线性范围为200~8000pgml,检测下限为150pgml。结论噬菌体展示技术可成功筛选到赭曲霉毒素A模拟表位,筛选到的噬菌体粒子可作为毒素的替代品建立免疫学分析方法。 相似文献
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抗桔青霉素单克隆抗体的研制与鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
目的制备抗桔青霉素的单克隆抗体。方法采用活性酯法、甲醛加成法和羰基二咪唑法制备了4种桔青霉素与载体蛋白的偶联物(A、B、C和D),免疫小鼠制备抗桔青霉素单克隆抗体。结果免疫原性鉴定证明偶联物C可刺激BALB/c小鼠产生抗桔青霉素的抗体,细胞融合后筛选到一株抗桔青霉素的单克隆抗体,单抗与赭曲霉毒素A、黄曲霉毒素B1和展青霉素等毒素交叉反应低于0.01%,在此基础上建立了竞争ELISA检测方法,线性范围为20~10,00ng/ml,检测下限为10ng/ml。在小麦样品中的加标回收率为95%~112%,变异系数为9.1%~18.6%。结论本研究成功筛选到抗桔青霉素单克隆抗体。 相似文献
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目的 探究免疫印迹法检测过敏原用于过敏性皮肤病诊断的价值。方法 选择2020年1月至2022年10月来永新县皮肤病防治所就诊的过敏性皮肤病患者120例,入院后均进行免疫印迹法检测,记录吸入性过敏原及食入性过敏原特异度IgE抗体阳性率,并分析不同性别及不同季节的过敏原特异度IgE抗体阳性率情况。结果 本研究中吸入性过敏原排名前三的是:尘螨组合(屋尘螨/粉尘螨)31.7%、树花粉(柳树/杨树/榆树)19.2%、猫毛皮屑17.5%;食入性过敏原排名前三的是:牛奶20.0%,鸡蛋白16.7%,鱼虾蟹15.0%;男性与女性患者的尘螨组合(屋尘螨/粉尘螨)、树花粉(柳树/杨树/榆树)、艾蒿的阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=5.393、6.009、5.428,P=0.020、0.014、0.020),而两者在猫毛皮屑、狗毛皮屑、普通豚草、蟑螂、真菌混合组及食入性过敏原阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同季节的尘螨组合(屋尘螨/粉尘螨)、艾蒿阳性率比较,差异有统计学意义(χ2=11.130、8.750,P=0.011、0.033),而... 相似文献
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采用噬菌体展示技术筛选黄曲霉毒素B_1模拟抗原表位 总被引:4,自引:0,他引:4
目的从随机肽库中筛选黄曲霉毒素B1模拟抗原表位,以建立无需黄曲霉毒素B1偶联抗原的免疫学检测方法。方法利用噬菌体展示技术,以抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体为靶分子,从随机七肽库中进行生物亲和淘选,ELISA鉴定阳性克隆,通过DNA测序对每个阳性克隆进行定性分析。结果通过4轮结合/扩增循环,获得了能与抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体结合的肽,采用间接竞争ELISA,筛选到了4株能抑制黄曲霉毒素B1的阳性克隆子,经DNA测序得到HXXDPXH共有序列,其中X为任意氨基酸。以其中P10噬菌体阳性克隆建立竞争ELISA方法,线性范围为500~2000pg/ml,检测下限为50pg/ml。结论利用噬菌体展示技术筛选到了黄曲霉毒素B1模拟抗原表位,并以其代替黄曲霉毒素B1偶联抗原建立了免疫学检测方法。 相似文献
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目的:探讨各类型的乙型病毒性肝炎患者血清白细胞介素-Ⅱ(IL-2)、可溶性白细胞介素-Ⅱ受体(sIL-2R)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化规律和临床意义,以及重症肝炎患者进行人工肝支持系统(ALSS)治疗后上述指标的变化规律。方法:应用酶联免疫吸附实验(ELISA)测 相似文献
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目的 建立用免疫亲和柱分离净化、高效液相色谱法测定食品中苏丹红Ⅰ的方法.方法 将制备好的苏丹红Ⅰ单克隆抗体与经修饰的琼脂糖凝胶Sepharose-4FF偶联,制成苏丹红Ⅰ免疫亲和柱,样品经乙腈提取,并用PBS缓冲液稀释成20%乙腈-PBS溶液后,过实验室自制的苏丹红Ⅰ免疫亲和柱净化,建立IAC-HPLC法检测苏丹红I含量.结果 测得辣椒粉中SudanⅠ的回收率为29.12% ~90.32%,并随机抽检了市售的及自种的四种辣椒粉,检测结果均为阴性.结论 成功制备了苏丹红Ⅰ免疫亲和柱,并建立了免疫亲和柱-HPLC法测定辣椒粉中的苏丹红Ⅰ的方法. 相似文献
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目的 研制高灵敏度玉米赤霉烯酮免疫层析检测卡。方法 制备一种粒径为(116.7±2.0)nm、分支多的金纳米花(AuNFs),用AuNFs标记玉米赤霉烯酮(ZEN)单克隆抗体(AuNF-ZEN-Mab),研制出用于检测粮食和饲料中的玉米赤霉烯酮金纳米花免疫层析卡(ZEN-GFICT)。结果 对比法ZEN-GFICT和消线法ZEN-GFICT对ZEN标准品的检测灵敏度分别为0.5和6 ng/mL,对实际样品检出限分别为5和60μg/kg,是传统ZEN纳米金免疫层析检测卡(ZEN-GICT)的6倍(对比法)和4.5倍(消线法)。21份样品的ZEN-GFICT判断结果(对比法和消线法)与ELISA试剂盒检测结果相比,总符合率均为90.5%。结论 ZEN-GFICT对比法和消线法可以对样品中ZEN含量做出5、 5~60和60μg/kg的三个区间判定。检测样品时,能够筛查ZEN污染程度低的样品。 相似文献