黄连-干姜药对预防DSS诱导的小鼠结肠炎作用及其机制

目的:研究黄连-干姜药对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导结肠炎的预防作用及其机制。方法:将45只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、黄连-干姜低、中、高剂量(1.2,2.4,4.8 mg·kg~(-1))组,黄连-干姜各剂量组预防性灌胃给药7 d后(正常组和模型组灌胃等量生理盐水),在继续给予相应干预的同时,模型组和中药组分别给予3%DSS水溶液自由饮用,连续饮用6 d,正常组小鼠给予自来水自由饮用。记录每日疾病活动指数(DAI),取材后测量结肠长度,苏木素-伊红(HE)染色观察结肠病理变化并记录病理组织学评分,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测小鼠血浆中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测结肠上皮细胞中JAK2,STAT3蛋白磷酸化水平,激光共聚焦显微镜检测结肠组织中磷酸化STAT3(p-STAT3)表达水平。结果:模型组从第2天开始DAI较正常组均升高;黄连-干姜低剂量组DAI较模型组在第2,4,6天降低;黄连-干姜中剂量组除了第4天,均低于模型组;黄连-干姜高剂量组第2天即低于模型组,并持续至实验结束。模型组小鼠结肠长度较正常组显著缩短(P0.01),黄连-干姜各个剂量组结肠长度较模型组显著增长(P0.05)。结肠组织HE染色观察发现模型组炎症损伤明显较正常组严重;黄连-干姜组炎症损伤明显轻于模型组,模型组病理学评分显著高于正常组(P0.01),黄连-干姜中、高剂量组病理学评分显著低于模型组(P0.05)。小鼠血浆中IL-6,TNF-α含量模型组显著高于正常组(P0.01),黄连-干姜各剂量组均显著低于模型组(P0.01)。结肠组织中JAK2和STAT3蛋白活化水平模型组显著高于正常组(P0.01),黄连-干姜各剂量组均低于模型组(P0.01,P0.05)。结论:黄连-干姜药对可能通过抑制IL-6/STAT3信号通路从而预防DSS诱导的结肠炎症状及结肠组织炎症损伤。