地龙抗呼吸道合胞病毒的有效部位筛选

目的:研究地龙不同极性的粗提取物经纯化分离后对呼吸道合胞病毒(RSV)的体外抗病毒活性,从而确定抗病毒的有效部位。方法:预实验依次用乙酸乙酯、95%乙醇水溶液、水作为溶剂提取药物,采用RSV-Hep-2细胞感染模型,初步检测地龙的体外抗RSV活性。依据预实验的结果,分别采用水提醇沉法和醇提水沉法对粗提取物进一步地分离和纯化,将处理后的上清液和沉淀物分别进行体外抗病毒实验。然后根据实验结果将醇提水沉后的沉淀过大孔树脂DM130,分别用25%、50%、75%的乙醇水溶液洗脱,将洗脱液浓缩后做抗病毒实验,在显微镜下观察细胞的病变,用酶标仪测定中性红染色A540值,计算其治疗指数。结果:乙酸乙酯、乙醇、水3种粗提取物中水粗提取物对呼吸道合胞病毒的抑制效果最好,TI=74.21。将粗提取液水提醇沉或醇提水沉后发现醇提水沉的沉淀对呼吸道合胞病毒的抑制效果最好,TI=107.11。将地龙醇提水沉的沉淀过大孔树脂DM130发现75%乙醇2号水溶液冲洗的洗脱液抑制呼吸道合胞病毒的效果最好,TI=63.05.结论:地龙的醇溶性成分对RSV病毒具有明显的抑制作用。