萘敏维滴眼液中微量薄荷醇的顶空气相色谱法测定

建立了顶空气相色谱法检测萘敏维滴眼液中的微量薄荷醇.以0.1%聚山梨酯80溶液为顶空溶剂,85℃平衡20 min,抽取顶空气体1 ml进样测定.采用SMA-WAX毛细管柱,FID检测器.薄筒醇在2.4～76.8μg/ml浓度范围内线性关系良好,回收率为100.7%,RSD为1.3%.     

某校园环境中烟曲霉菌的分离及CSP分型鉴定

目的通过采集某校园环境标本,分离、鉴定出烟曲霉菌并对其进行分型研究,了解该校园环境中烟曲霉菌基因型及其分布情况。方法釆集该校内土壤、腐叶来源样本进行培养,10%KOH染色及乳酸棉兰染色,显微镜下观察;提取基因组DNA并扩增β-微管蛋白(β-tubulin)基因以鉴定烟曲霉菌,利用烟曲霉细胞表面蛋白(CSP)对其进行分型。结果从土壤、腐叶各20份共40份样本中共分离到43株真菌,其中土壤样本中分离到19株,腐叶样本中分离到24株;经β-tubulin基因PCR扩增鉴定,22株为烟曲霉菌,包括土壤来源的8株和腐叶来源的14株;所获的烟曲霉菌经CSP基因扩增及序列测定,分为2个基因型:t01型和t25型,其中t25型为新增CSP基因型。结论烟曲霉菌在环境中普遍存在,不同地区其烟曲霉菌种类存在差异,该研究中所发现的烟曲霉菌CSP基因型t25为新增型。     

HS-SPME-GC-MS法分析海南产黄皮不同部位的挥发性成分

目的采用顶空固相微萃取(HS-SPME)结合气相色谱质谱法(GC-MS)分析检测海南产黄皮不同部位的挥发油成分。方法在对5种不同性质的萃取头考察优化后,选用L_(16)(4~5)正交表进行正交试验优化其他5个影响HS-SPME萃取的因素(水的体积、萃取温度、平衡时间、萃取时间、NaCl添加量),最终采用GC-MS相似度检索结合保留指数对黄皮叶、果皮和种子中的挥发性成分进行分析与鉴定。结果最终确定的萃取条件为采用50/30μm DVB/CAR/PDMS萃取头,取样品粉末10.0 mg于20 mL顶空瓶中,加水2.0 mL和NaCl 0.2 g,萃取温度80℃,平衡时间30 min,萃取时间60 min。在此条件下从海南产黄皮叶、果皮和种子中分别鉴定出83、96和106种挥发性成分,分别占挥发油总量的95.24%、92.15%和95.92%,含量较高的均为倍半萜类成分,其成分和含量在不同部位中差异较大。结论 HS-SPME-GC-MS法灵敏度高,样品用量少,操作简便,无需有机溶剂,谱库相似度检索结合保留指数提高了分析鉴定的准确性,为海南产黄皮的进一步研究提供了科学依据。该方法能对中药中高沸点及微量成分进行富集分析,更全面、科学地对中药的质量进行表征及评估。     

直接顶空GC测定罗浮山百草油中的薄荷脑和水杨酸甲酯

目的 采用顶空GC快速测定罗浮山了丁草油中薄荷脑和水杨酸甲酯的含量.方法 将样品液直接注入2 ml水中顶空分析,顶空温度80℃,平衡时间30 min.采用30 mm×0.53 mm×0.50μm的毛细管柱,聚乙二醇为固定液,FID检测器.结果 薄荷脑、水杨酸甲酯和其他成分的分离度良好,加样回收率分别为99.2%、98.1%,RSD分别为0.5%、0.8%.其线性范围分别为62.40～9.98 ×102、1.25×102～2.00×103μg·ml-1(r>0.9990).结论 该法操作简便快速,定量准确,既减少了对待测物的干扰,又不污染色谱系统,适用于罗浮山百草油的质量控制.     

HPLC辅助滴定法测定含辅酶Q10保健食品中过氧化值

目的通过研究含辅酶Q10软胶囊保健食品中过氧化值含量偏高的现象,建立了一种可排除辅酶Q10干扰的HPLC辅助滴定法测定该类样品中过氧化值的方法。方法采用GB/T5009.56中方法提取辅酶Q10软胶囊中的油脂,HPLC法测定油脂中辅酶Q10的含量,并采用GB/T5009.37中硫代硫酸钠滴定法分别滴定油脂和辅酶Q10的过氧化值,通过计算排除辅酶Q10的干扰达到测定含辅酶Q10软胶囊保健食品中过氧化值的目的。结果 HPLC方法中辅酶Q10在2.00～32.0μg.mL-（1r=0.9998）的范围内线性关系良好。所建的HPLC辅助滴定法通过植物油中添加定量的辅酶Q10标准品验证了所建方法的可行性,含辅酶Q10软胶囊保健食品中过氧化值含量的加标回收率为98.4%,RSD为0.88%。结论该方法排除了辅酶Q10的干扰,解决了该类样品中过氧化值含量偏高的问题,结果准确,适用于含辅酶Q10软胶囊保健食品中过氧化值的测定。     

植物挥发油成分分析及抗假丝酵母菌活性的研究进展

侵袭性真菌感染是造成目前临床真菌感染的发病率和死亡率逐年上升的重要原因,其中以假丝酵母菌感染尤为严重。近年来主要的抗真菌药物均发现一定程度的毒副作用,由于临床上抗真菌药物的广泛使用造成耐药性日趋严重,因此迫切需要寻找安全有效的新型抗真菌药物。天然植物成分尤其是植物挥发油多具有抗菌消炎、解热镇痛、抗病毒等多种生物活性,其凭借来源广、低毒、广谱、作用途径多样化等优点成为了抗真菌药物研究开发的热点。植物挥发油的抗假丝酵母菌活性与其中成分及含量紧密相关。该文综述了近年来不同科属的植物挥发油的成分分析及抗假丝酵母菌活性研究,系统归纳总结了唇形科、樟科、桃金娘科等植物挥发油的提取、分析及抗假丝酵母菌活性的研究方法和结果,并对目前的研究方向进行了展望,以期为今后植物挥发油的成分分析和活性研究提供方向,为植物挥发油开发成为新的抗假丝酵母菌药物奠定理论基础,为真菌耐药问题造成的临床难题提供新的解决方案。     

顶空单滴微萃取-气相色谱法快速分析百草油中挥发性成分

目的:采用简单快速的顶空单滴微萃取-气相色谱法分析测定百草油中挥发性成分薄荷醇和水杨酸甲酯含量。方法:精密吸取样品的甲醇溶液10μL注入盛有5 mL水的样品瓶中,以1.5μLN,N-二甲基甲酰胺为萃取溶液(含内标苯甲醇),萃取温度为40℃、萃取时间为5 min,萃取后直接吸回0.5μL进样GC分析检测。采用30 m×0.53 mm PEG毛细管柱,FID检测器,程序升温。结果:薄荷醇、水杨酸甲酯和其他成分的分离度良好,加样回收率在95.4%~99.2%,RSD均低于1.9%。薄荷醇和水杨酸甲酯分别在1.26~80.5(r=0.999 0),2.49~1.59×102mg.L-1(r=0.999 1)线性关系良好。结论:该方法避免了复杂的样品前处理,操作简单快速,定量准确,且成本低,适用于中药中挥发性成分的含量测定。     

某医院急诊科住院患者口腔酵母菌分离鉴定及耐药性分析

目的了解急诊科住院患者口腔酵母菌的种类分布情况及其药物敏感性,为临床预防真菌感染及合理用药提供依据。方法用常规棉拭子法采集2015-2016年海南省人民医院急诊科352例住院患者口腔黏膜标本进行真菌分离培养、科玛嘉显色及ITS鉴定,分析不同疾病、年龄段患者酵母菌的检出情况,并进行体外两性霉素B、氟康唑、酮康唑、伊曲康唑及氟胞嘧啶纸片法药敏测定。结果 352例住院患者口腔标本中,241例(68.8%)口腔携带酵母菌,其中8例患者携带2种以上菌株,60岁以上患者分离率显著高于60岁以下患者(P0.05);共分离到10种酵母菌共250株,包括白假丝酵母菌134株,光滑假丝酵母菌61株,热带假丝酵母菌28株,克柔假丝酵母菌13株,其他14株。体外5种抗真菌药物敏感性分析发现,两性霉素B的耐药率为2.0%,氟康唑的耐药率为20.4%,伊曲康唑的耐药率为19.6%,酮康唑的耐药率为11.6%,氟胞嘧啶的耐药率为8.4%。结论急诊科住院患者口腔酵母分离率高,且对临床常见的5种抗真菌药物存在不同的耐药率,尤其是唑类药物存在较高的耐药率。     

顶空气相色谱法分析检测清凉含片中薄荷脑的含量

目的建立一种分析检测清凉含片中薄荷脑的顶空气相色谱方法。方法以吐温80水溶液为顶空溶剂,在85℃的顶空温度下平衡20 min,抽取顶空气体1 ml进样测定。采用DM-WAX（30 m×0.32 mm×0.25μm）的毛细管柱,柱温：125℃,进样口温度：150℃,FID检测器温度：180℃。结果薄荷脑在1.25～40.0μg/ml的范围内线性关系良好（r=0.9992）,加样回收率为99.6%～100.5%,RSD均低于2.0%。结论该方法操作简单快速,定量准确,灵敏度高,适用于清凉含片中薄荷脑的质量控制。     

高效液相色谱-荧光检测法测定瑞格列奈片含量及其溶出度研究

目的:建立测定痕量瑞格列奈的方法,并用于瑞格列奈片的溶出度研究。方法:采用高效液相色谱-荧光检测法。色谱柱为C18,流动相为0.5%磷酸(pH调至2.5)-甲醇-乙腈(40∶10∶50),流速为1.0mL·min-1,柱温为40℃,进样量为20μL,荧光检测波长为λex=244nm、λem=348nm。溶出度测定方法为桨法,溶出介质为枸橼酸-磷酸盐缓冲液(pH=5.0),转速为75r·min-1,测定3批片剂在60min内的累积溶出度。结果:瑞格列奈检测浓度线性范围为0.055～1.76μg·mL-1(r=0.9997),低、中、高浓度平均回收率分别为98.8%、99.4%、99.6%(RSD=1.4%、1.3%、1.5%),最低定量限0.21ng,最低检测限0.05ng。3批片剂30min时累积溶出度为89.6%～93.4%。结论:该方法灵敏度高、专属性强,适用于瑞格列奈的痕量测定及满足大杯法研究瑞格列奈片的溶出度的要求。